- •Складні методи забарвлення бактерій
- •Забарвлення за Грамом
- •Мікроскопічне дослідження живих мікробів
- •Мікроскопічні методи дослідження мікроорганізмів
- •12 Частина і. Загальна мікробіологія
- •14 Частина і. Загальна мікробіологія
- •Правила роботи з імерсійною системою:
- •0,04 Мкм, тобто значно менші, ніж під звичайним світловим мікроскопом. Тому
- •5 Млн разів. За принципом дії розрізняють просвічуючі (трансмісивні), скануючі
- •18 Частина і. Загальна мікробіологія
5 Млн разів. За принципом дії розрізняють просвічуючі (трансмісивні), скануючі
(растрові) й комбіновані електронні мікроскопи.
Принципова схема просвічуючого елект-
ронного мікроскопа мало чим відрізняється від
звичайного оптичного. Можливості світлово-
го мікроскопа обмежені не якістю лінз, а вели-
кою довжиною світлових хвиль (0,29-0,8 мкм).
Мала довжина хвилі електронів (0,0002 мкм і
навіть менше) дозволяє значно збільшити роз-
дільну здатність електронного мікроскопа.
Замість світла в ньому використовують потік
електронів, джерелом яких є вольфрамова нит-
ка, що нагрівається електричним струмом
(електронна пушка). Роль лінз оптичного
мікроскопа виконує кругове електромагнітне
поле. Пучки електронів, проходячи через дос-
ліджуваний об’єкт, відхиляються під різними
кутами залежно від неоднакової товщини та Рис.3. Люмінесцентний мікроскоп.
18 Частина і. Загальна мікробіологія
щільності різних ділянок препарату і потрапляють в об’єктивну лінзу. В ній появ-
ляється перше корисне збільшення об’єкта.
Після об’єктивної лінзи електрони потрапляють у проміжну лінзу, яка слу-
жить для плавного збільшення зображення. Проекційна лінза створює кінцеве
збільшене зображення об’єкта, яке направляється на флуоресціюючий екран. Зав-
дяки взаємодії швидких електронів з люмінофором екрану виникає видиме зобра-
ження об’єктів. Після наведення чіткості проводять фотографування.
Електронна мікроскопія вимагає спеціальної підготовки об’єктів досліджен-
ня. Необхідна спеціальна фіксація тканин або бактерій, їх ретельне зневоднення,
заливка в епоксидні смоли, виготовлення ультратонких зрізів. Для підвищення
чіткості зображення використовують методи позитивного й негативного контрас-
тування та відтінення.
Досліджуваний об’єкт спочатку зафіксовують особливими фіксаторами, потім
наносять на надзвичайно тонку колодієву або целюлозну плівку, вміщену на спеці-
альну сіточку-підкладку. При напиленні на поверхню препарату під певним кутом
у вакуумі наносять тонким шаром важкі метали, хром, золото, паладій. Розпоро-
шені частинки металу осідають на піднесених чи заглиблених ділянках бактерій
або вірусів. При дослідженні таких препаратів деталі їх структури проявляються
рельєфно й контрастно (позитивне контрастування). Негативне контрастування
зводиться до нанесення на препарат розчинів з атомами важких металів, наприк-
лад, фосфорно-вольфрамової кислоти. Осідаючи навколо білкових частинок дос-
ліджуваного об’єкта й заповнюючи всі проміжки
між ними, атоми важких металів “забарвлюють”
фон, на якому виступають найменші деталі бу-
дови мікроорганізмів.
Широко також використовують ультратонкі
зрізи клітин, бактерій, що дає змогу вивчити їх
структуру на субклітинному й молекулярному
рівнях.
Сучасна українська й зарубіжна промис-
ловість випускає багато моделей електронних
мікроскопів (рис. 4), які мають величезні мож-
ливості для вивчення мікроскопічного світу.
Методи електронної мікроскопії привели до
великих успіхів у розвитку таких наук як цито-
логія, бактеріологія, генетика і, особливо, віру-
сологія. Успішно розвивається імунна електрон-
на мікроскопія, яка дає змогу визначити родову
належність вірусів, що використовується для
експрес-діагностики багатьох вірусних інфекцій.
Бактеріологічний, серологічний, біологічний та алергічний методи діагнос-
тики інфекційних хвороб детально викладені в наступних розділах.__