- •4.Методы выделения чистых культур бактерий.
- •5.Особенности культивирования анаэробных бактерий. Методы создания анаэробиоза.
- •6.Принципы культивирования микроорганизмов.
- •8.Требования к условиям культивирования бактерий
- •25) Методы индикации вирусов при культивировании их в организме лабораторных животных
- •26)Что такое цпд? Виды цпд?
- •27) Механизм рга и ргАдс
- •28)Цветная реакция механизмы
- •Вопрос 42
- •Вопрос 43
- •Вопрос 45
- •47. Особенности
- •54 Мутагены
- •55 Репарации
- •56 Рекомбинационная изменчивость у бактерий
54 Мутагены
Определение
Химические вещества или физические факторы, вызывающие предмутационные изменения в ДНК, которые в результате ошибок репарирующих ферментов или в процессе репарации переходят в мутацию.
Физические (УФ-излучение, R-лучи)
Химические (бензпирен, азид натрия, 5 бромурацил, 2 аминопурин, азотистая кислота)
Биологические (транспозоны, µ-бактериофаги, Is –элементы)
КЛАССИФИКАЦИЯ МУТАГЕНОВ
По механизму действия
аналоги азотистых оснований ð замена пар оснований
акридиновые красители ð выпадения или вставки оснований
УФ, некоторые продукты микробного метаболизма ð нарушение работы ДНК-полимеразы ð образование тиминовых димеров
нитрозосоединения ð множественный эффект («супермутагены»)
55 Репарации
Определение
Процесс восстановления повреждённой ДНК ферментами репарационных систем
Виды репарационных систем
Система фотореактивации – ферменты активны в присутствии видимого света
Система темновой репарации – ферменты действуют в темноте
Этапы репарации
Обнаружение и надрезание поврежденного фрагмента ДНК эндонуклеазой
Удаление вырезанного фрагмента ДНК-полимеразой 1
Синтез нуклеотидов по матрице второй сохранившейся нити – работает ДНК-полимераза 1 и 3
«Сшивание» восстановленного фрагмента ДНК с основной нитью за счет лигазы
56 Рекомбинационная изменчивость у бактерий
Определение
Изменчивость, происходящая в результате включения в ДНК реципиентной клетки участка ДНК донорской клетки
Виды рекомбинаций
Законная – происходит спаривание гомологичных генетических структур за счет образования водородных связей между комплементарными нуклеотидами
Незаконная – при встраивании в любом месте ДНК бактерий транспозонов, Is - элементов
РЕКОМБИНАЦИОННАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ У БАКТЕРИЙ
Виды
Трансформация – непосредственная передача генетического материала от донорской к реципиентной клетке
Трансдукция – передача генетического материала от донорской к реципиентной клетке с помощью дефектных бактериофагов
неспецифическая (общая)
абортивная
специфическая
Конъюгация – передача генетического материала от донорской к реципиентной клетке с помощью конъюгационных пилей
Лизогенизация
Фаговая конверсия
Этапы трансформации
1. Выделение ДНК из клетки-донора в результате разрушения и адсорбция на рецепторах бактерии-реципиента
2. Разрезание эндонуклеазой двунитевой ДНК на отдельные двунитевые фрагменты
3. Эндонуклеаза вызывает деградацию одной из нитей двунитевых фрагментов ДНК
4. Синтез белка-лоцмана, который соединяется с фрагментом ДНК и переносит их цитоплазму
5. Интеграция поступившего однонитевого фрагмента ДНК в ДНК клетки-реципиента
Конъюгация – передача генетического материала от донорской к реципиентной клетке с помощью конъюгационных пилей.
Идет в 2 стадии:
Контакт поверхности клетки-донора и клетки-реципиента посредством половых пилей.
Прохождение генетического материала через конъюгативный мостик
Механизм конъюгации
Бактерии-доноры должны обладать F-плазмидой, которая кодирует образование sex-пилей. С помощью них донор находит реципиента, прикрепляется и затем подтягивает его к себе. Клеточные стенки бактерий входят в тесный контакт
Трансдукция – передача генетического материала от донорской к реципиентной клетке с помощью бактериофагов
неспецифическая (общая)
абортивная
специфическая