- •Асептика и антисептика. Стерилизация и дезинфекция. Определение понятий, методы, область применения.
- •Влияние и механизм действия физических факторов на жизнедеятельность бактерий: высокие температуры, высушивание, ультразвук, уф-лучи, ионизирующее излучение. Практическое применение.
- •Газовая стерилизация, область применения.
- •Механические методы стерилизации, область применения.
- •1) Промывание
- •4) Хирургическая обработка раны – иссечение раны.
- •Пастеризация, тиндализация. Режим работы, область применения.
- •Дезинфектанты, основные группы дезинфектантов, механизм действия, область применения.
- •Антисептики, требования, предъявляемые к ним, основные группы, механизм их действия, область применения, определение чувствительности к ним микробов.
- •Бактериофаги, их природа, строение, формы существования (вегетативный фаг, зрелый фаг, профаг).
- •Классификация фагов по характеру взаимодействия с бактериальной клеткой (умеренные и вирулентные). Лизогения и лизогенная конверсия.
- •Методы культивирования и титрования бактериофагов (по Грациа и Аппельману).
- •Лечебно-профилактическое и диагностическое использование бактериофагов в медицине.
- •Понятие о генотипе и фенотипе. Генетические детерминанты бактерий (нуклеоид, плазмиды, транспозоны, Is-последовательности), особенности строения, функции.
- •Фенотипическая и генотипическая изменчивости, их суть, отличительные черты.
- •Мутации, их виды. Мутагены, основные группы. Репарации, их разновидности, биологическая значимость.
- •Генетические рекомбинации (трансформация, трансдукция, конъюгация), их ме6ханизмы, биологическая значимость.
- •Плазмиды, их основные виды, характеристика.
- •Использование бактериоциногении и бактериоциночувствительности культур как эпидемиологического маркёра для установления идентичности культур различного происхождения.
- •Микробный антагонизм, его эволюционная значимость.
- •Понятие «антибиотик», основные источники получения антибиотиков, природные, полусинтетические и синтетические антибиотики.
- •Классификация антибиотиков по химическому составу, механизму действия, спектру действия на микроорганизмы.
- •Методы определения чувствительности микробов к антибиотикам (диско-диффузионный метод, метод серийных разведений). Определение мпк и расчёт терапевтической концентрации антибиотика.
- •Резистентность микробов к антибиотикам, генетические и биохимические механизмы резистентности, методы их выявления.
- •Условия селекции устойчивых штаммов и формирования полирезистентных микробных популяций.
- •Рациональная антибиотикотерапия. Осложнения при антибиотикотерапии.
Механические методы стерилизации, область применения.
1) Промывание
2) Фильтрация (размер пор в фильтре 0,22 микрон, а размер бактерий – 1 – 2 мкм, бактерии крупные и не проходят через фильтр). Механическая стерилизация осуществляется при помощи бактериальных фильтров (асбестовые, мембранные). Они имеют поры определённой величины. Используют для стерилизации сывороток бактериофагов.
3) Ламинарный шкаф + фильтр тонкой очистки (для термолабильных жидкостей)
4) Хирургическая обработка раны – иссечение раны.
Стерилизация текучим паром и паром под давлением. Аппаратура, правила работы, механизм действия стерилизующих факторов. Режим стерилизации, область применения. Физический, химический и биологический контроли стерилизации.
Обработка насыщенным водяным паром под давлением в паровых стерилизаторах (автоклавах) более предпочтительна, чем воздействие сухого жара в воздушных стерилизаторах (сухожаровых шкафах). Чем выше давление, создаваемое в герметично закрытой камере, тем выше температура пара.
Паровой стерилизации подвергают изделия из текстиля (бельё, вату, бинты, шовный материал), из резины, стекла, полимерных материалов, питательные среды, лекарственные препараты. Воздушной стерилизации подвергают изделия из металла, стекла, силиконовой резины.
Стерилизационная аппаратура.
Сухожаровой шкаф (печь Пастера). Стерилизующий момент – коагуляция белка. Шкаф работает при t˚ 160 – 165˚ C. Время стерилизации – 1 час. При 180˚ C – 15 минут, при 200˚ C – 5 минут.
Автоклав. Текучий пар /пар под давлением. Стерилизующий момент – гидролиз белков.
Режим работы автоклава
-
Показания манометра (в атмосферах)
t˚ кипения воды (градусы C)
0
100
0,5
112
1,0
120
1,5
127
2,0
134
При увеличении температуры кипения вода переходит в химически агрессивное состояние и вызывает гидролитическое расщепление белковых структур микроорганизмов. Для проверки эффективности стерилизации используют несколько методов:
Химический – с помощью индикаторов по изменению их окраски.
Физический – с помощью термометра + временной контроль.
Биологический – вместе с материалом для стерилизации помещают пробирку со спорообразующей культурой.
Пастеризация, тиндализация. Режим работы, область применения.
Тиндализация (предложил Тиндэлл) – дробная стерилизация при низких температурах 56 – 58˚ C в течение 5 – 6 суток. Основан на поочерёдном уничтожении вегетативных клеток, проросших спор. Основной недостаток – невозможность полной элиминации микроорганизмов, т.к. некоторые споры не успевают прорастать в указанных временных интервалах, а некоторые вегетативные клетки успевают образовать термостабильные споры. Метод используют для стерилизации сыворотки, асцитической жидкости. Пастеризация – способ инактивации вегетативных форм бактерий (предложил Луи Пастер). Нестерильный продукт пастеризуют при t=65 – 70˚ C в течение 1 часа. Молочные продукты, вина, пиво хранят в холодильнике.