- •Асептика и антисептика. Стерилизация и дезинфекция. Определение понятий, методы, область применения.
- •Влияние и механизм действия физических факторов на жизнедеятельность бактерий: высокие температуры, высушивание, ультразвук, уф-лучи, ионизирующее излучение. Практическое применение.
- •Газовая стерилизация, область применения.
- •Механические методы стерилизации, область применения.
- •1) Промывание
- •4) Хирургическая обработка раны – иссечение раны.
- •Пастеризация, тиндализация. Режим работы, область применения.
- •Дезинфектанты, основные группы дезинфектантов, механизм действия, область применения.
- •Антисептики, требования, предъявляемые к ним, основные группы, механизм их действия, область применения, определение чувствительности к ним микробов.
- •Бактериофаги, их природа, строение, формы существования (вегетативный фаг, зрелый фаг, профаг).
- •Классификация фагов по характеру взаимодействия с бактериальной клеткой (умеренные и вирулентные). Лизогения и лизогенная конверсия.
- •Методы культивирования и титрования бактериофагов (по Грациа и Аппельману).
- •Лечебно-профилактическое и диагностическое использование бактериофагов в медицине.
- •Понятие о генотипе и фенотипе. Генетические детерминанты бактерий (нуклеоид, плазмиды, транспозоны, Is-последовательности), особенности строения, функции.
- •Фенотипическая и генотипическая изменчивости, их суть, отличительные черты.
- •Мутации, их виды. Мутагены, основные группы. Репарации, их разновидности, биологическая значимость.
- •Генетические рекомбинации (трансформация, трансдукция, конъюгация), их ме6ханизмы, биологическая значимость.
- •Плазмиды, их основные виды, характеристика.
- •Использование бактериоциногении и бактериоциночувствительности культур как эпидемиологического маркёра для установления идентичности культур различного происхождения.
- •Микробный антагонизм, его эволюционная значимость.
- •Понятие «антибиотик», основные источники получения антибиотиков, природные, полусинтетические и синтетические антибиотики.
- •Классификация антибиотиков по химическому составу, механизму действия, спектру действия на микроорганизмы.
- •Методы определения чувствительности микробов к антибиотикам (диско-диффузионный метод, метод серийных разведений). Определение мпк и расчёт терапевтической концентрации антибиотика.
- •Резистентность микробов к антибиотикам, генетические и биохимические механизмы резистентности, методы их выявления.
- •Условия селекции устойчивых штаммов и формирования полирезистентных микробных популяций.
- •Рациональная антибиотикотерапия. Осложнения при антибиотикотерапии.
Влияние и механизм действия физических факторов на жизнедеятельность бактерий: высокие температуры, высушивание, ультразвук, уф-лучи, ионизирующее излучение. Практическое применение.
Температура
Высушивание
Лучистая энергия
Ультразвук
По отношению к температуре микроорганизмы делятся на:
Психрофилы (греч. “psychros” – холодный) – холодолюбивые микроорганизмы, растут при относительно низкой температуре, минимум – 0˚ C, оптимум -10 – 20˚ C, максимум - 30˚ C.
Мезофилы (от греч. mesos – средний). Оптимум роста +28 – +37˚ C.
Термофилы – оптимум роста +50 – +60˚ C.
Тиндализация (предложил Тиндэлл) – дробная стерилизация при низких температурах 56 – 58˚ C в течение 5 – 6 суток. Основан на поочерёдном уничтожении вегетативных клеток, проросших спор. Основной недостаток – невозможность полной элиминации микроорганизмов, т.к. некоторые споры не успевают прорастать в указанных временных интервалах, а некоторые вегетативные клетки успевают образовать термостабильные споры. Метод используют для стерилизации сыворотки, асцитической жидкости.
Пастеризация – способ инактивации вегетативных форм бактерий (предложил Луи Пастер). Нестерильный продукт пастеризуют при t=65 – 70˚ C в течение 1 часа. Молочные продукты, вина, пиво хранят в холодильнике.
Высушивание.
Лиофильная сушка – объект замораживают, далее производят возгонку льда в условиях вакуума. Микробные клетки переходят в состояние анабиоза и сохраняют свои биологические свойства в течение нескольких месяцев или лет.
Лучистая энергия.
Ультрафиолетовое облучение (УФО) вызывает поломку генетического аппарата. Образуются димеры тимина.
Рентгеновские лучи
Альфа-лучи
Бета-лучи
Гамма-лучи (кобальт 60, цезий 137)
Вызывают повреждение нуклеиновых кислот.
Электронное излучение – применяют ускорители электронов с высоким уровнем поражающего действия. Механизм действия – гибель микробов обусловлена разрушением ядерных структур и клеточной ДНК.
Применение.
Лучевая стерилизация позволяет обрабатывать большое количество предметов (одноразовые шприцы, системы). Применяют лучевую стерилизацию, когда объекты не выдерживают высоких температур. Альтернатива газовой стерилизации.
Ультразвук.
Под воздействием ультразвука газообразные вещества, находящиеся в жидкой среде цитоплазмы, активируются, внутри клетки возникает высокое давление до 10 тысяч атмосфер. Образуются кавитационные полости, что приводит к взрыву внутри бактериальной клетки.
Ионизирующее излучение. Вызывает повреждение генома бактерий от несовместимых с жизнью дефектов до точечных мутаций. Для микробных клеток летальные дозы в сотни и тысячи раз выше, чем для животных и растений.
Газовая стерилизация, область применения.
Химическую стерилизацию используют при обработке крупногабаритных изделий, приборов, а также аппаратов и термолабильных изделий, которые можно повредить высокой температурой – эндоскопы, изделия из резины, полимерные, титановые сплавы. Для газовой («холодной») стерилизации используют герметичные контейнеры, которые заполняют парами летучих веществ: формальдегида, смесью паров формальдегида и этилового спирта, окисью этилена, смесью окиси этилена и бромистого метила. Так обрабатывают многокомпонентное оборудование. Используют для гемодиализа.