МеТодика проведения занятия

Овоскопирование. Метод основан на том, что при помещении яйца в луче проходящего света вследствие определенной проз­рачности скорлупы возможно видеть содержимое яйца.

При развитии эмбриона и его оболочек картина просвечивания яйца изменяется. Принято определять нормальность развития эмбриона овоскопированием в определенные периоды, когда картина просвечивания наиболее отчетлива и типична (табл. 16).

На инкубаторных станциях для контрольного овоскопирования достаточно взять из разных мест инкубатора 15—20% лотков с яйцами (если не ставится цель отобрать все яйца с нарушенным развитием). При просвечивании яйца с зародышем прежде всего видны розовая тень аллантоиса и темная тень эмбриона (или его органов). Степень развития и расположения аллантоиса и зародыша позволяет судить, насколько правильно протекает развитие (рис. 19).

Рис. 19. Картина овоскопирования в разные периоды инкубации (для кур):

а — 6-й день: б—11-й день; в—19-й день; 1 — тень аллантоиса; 2—тень зародыша; 3—воздушная камера

При овоскопировании на 6-й день инкубации зародыш курицы плохо различим, так как лежит глубоко в желтке. На месте зародыша видно светлое поле, на некотором расстоянии от которого видны хорошо развитые кровеносные сосуды аллаютоиса. Аллантоис еще не закрывает острый конец яйца.

На 11-й день аллантоис выстилает всю скорлупу внутри яйца, замыкаясь на остром конце. Тень зародыша хорошо различима.

После 19 сут инкубации тело зародыша заполняет всю полость яйца. Острый конец яйца не просвечивается, линия воздушной камеры изломана вследствие выпячивания шеи зародыша.

При отставании в развитии эмбриона картина просвечивания в указанные периоды инкубации нарушается.

При изучении развития эмбрионов птиц других видов сроки просмотра яиц несколько меняются, но основные признаки, характеризующие развитие, те же.

Таблица 16

Сроки овоскопирования яиц сельскохозяйственной птицы при биологическом контроле

Вид птицы	Период овоскопирования
	1-й	2-й	3-й
	Дни инкубации
Куры	6	11	19
Утки и индейки	7	13	25
Цесарки	8,5	13,5	25-26
Гуси	8	15	28
Фазаны	7	12	21
Перепела	5	10	16
Страус африканский	14	21	39

В настоящее время в практике мирового птицеводства в целях автоматизации биологического контроля при крупномасштабной инкубации яиц разрабатывается методика термальной диагностики специальными датчиками яиц с живыми и мертвыми эмбрионами при переносе на вывод.

Вскрытие яиц с живыми зародышами на разных стадиях развития позволяет непосредственно проследить развитие эмбриона и уточнить результаты овоскопирования. При вскрытии в яйце ножницами вырезается овальное отверстие разменом 2,83,5 см, после чего яйцо ставится в подставку. В зависимости от стадии развития рассматриваются сосудистое поле, положение, зародыша, состояние зародышевых оболочек. На самых ранних стадиях развития (первые 2—3 сут) для рассмотрения зародыша можно приготовить тотальные препараты. Для этого из фильтровальной бумаги вырезается кольцо (диаметр: 20—25 мм внешний и 15 мм внутренний), которое накладывается на бластодиск. Бумага прилипает к вителлиновой мембране, зародыш, виден в, центре кольца. Ножницами обрезают мембрану по периметру кольца, пинцетом снимают зародыш с бумагой и помещают на предметное стекло для рассмотрения, предварительно промыв в физиологическом растворе. На более поздних стадиях развития содержимое яйца выливают в чашку Петри, где удобно рассмотреть зародышевые оболочки (особенно амнион и желточный мешок) и установить количество неиспользованных желтка и белка.

В целях исследования зародыша его следует отделить от содержимого яйца и перенести в другую чашку Петри. Для лучшей контрастности при рассмотрении зародыша, имеющего прозрачное тело, в чашку Петри наливают немного дистиллированной воды и капают несколько капель метиленовой сини.

Эмбрионы ранних стадий развития (36—48 ч) прозрачны и плохо просматриваются на фоне желтка. При рассмотрении таких эмбрионов можно после вскрытия яйца шприцем ввести в подзародышевую полость немного туши. По-разному окрашивая сосудистое поле и ткани зародыша, тушь позволяет рассмотреть эмбрион через лупу, определить его размеры и число пар сомитов.

Эмбрионы старшего возраста рассматривают в чашке Петри, сравнивая признаки морфологического развития с приведенным выше описанием. После 8 сут. эмбрион можно вскрыть и опреде­лить пол по виду половых желез.

Эмбрион занимает совершенно определенное положение в яйце. Если положить яйцо налево тупым, а направо острым концом (по отношению к наблюдателю), то первичная полоска, а позднее зародыш будут расположены поперек длинной оси яйца хвостовой частью в сторону наблюдателя. С 13—14-го дня инкубации он располагается вдоль яйца головой к тупому концу. К моменту вылупления нормальное положение цыпленка следующее: голова в тупом конце и подогнута под правое крыло так, что клюв обращен к воздушной камере, ноги прижаты к животу, тело ориентировано вдоль большой оси яйца. Соответствие положения цыпленка нормальному важно при выводе и учитывается при биологическом контроле (рис. 20).

Рис.20 Нормальное положение цыпленка перед вылуплением

Практические задания

Объекты и оборудование:

1. Яйца с зародышами кур разных степеней развития (5 на двоих студентов).

2. Почкообразные кюветы.

3. Чашки Петри.

4. Овоскоп.

5. Лупы.

6. Глазные ножницы.

7. Шприцы.

8. Глазные пинцеты.

9. Метиленовая синь.

10. Дистиллированная вода.

11. Тушь.

12. Фильтровальная бумага.

Работа 1. Рассмотреть через овоскоп яйца с эмбрионами разных стадий развития. Обратить внимание на характерные черты, свойственные зародышу данного возраста. Результаты занести в форму15.

Форма 15

Результаты овоскопирования

Картина овоскопирования	Возраст эмбрионов, дни
Развитие зародыша, его вид и размеры
Развитие аллантоиса
Просвечиваемость острого конца яйца
Размер и вид воздушной камеры

Работа 2. Вскрыть яйца с эмбрионами, начиная с ранних стадий. Внимательно рассмотреть морфологические особенности эмбрионов и зародышевых оболочек на каждой стадии развития. Результаты записать в форму 16.

Работа 3. На основании вскрытия эмбрионов старше 8-дневного возраста определить их пол.

Форма 16

Результаты прижизненного вскрытия яиц с эмбрионами

Возраст эмбрионов, дни	Морфологические признаки эмбриона и зародышевых оболочек