Раздел 3 работа № 25. Рн и буферные системы

Постоянство концентрации ионов водорода – необходимое условие правильного протекания биохимических процессов. В организме постоянный рН в различ­ных тканях и органах поддерживается буферными системами, а вне организма при проведении биохимических реакций – буферными смесями.

Буферные смеси состоят преимущественно из растворов сла­бых кислот и их щелочных солей. Они поддерживают постоян­ный рН, связывая известное количество ионов Н+ и ОН^-, обра­зующихся в процессе реакции или специально добавленных.

Одной из употребительных буферных смесей является лимоннофосфатная. А важнейшими буферными системами крови являются бикарбонатная, фосфатная, белковая и наиболее мощная гемоглобиновая.

25.1. Лимонно-фосфатная буферная смесь. Приготовление растворов

Реактивы и материалы: раствор Na₂HPO₄ (0,2 М), соль Na₂HPO₄·12H₂O; дистиллированная вода, лимонная кислота, универсальный индикатор.

Оборудование и посуда: фильтровальная бумага, воронка, стаканы, стеклянные палочки, термостат, электроплитка, весы, форфоровая чашка.

Порядок выполнения работы

1. Раствор Na₂HPO₄ (0,2 М) готовят из очищенного препарата соли. Соль Na₂HPO₄·12H₂O растворяют при нагревании в 1,3 части воды; раствор фильтруют и охлаждают при помешивании. Осадок отсасывают и высушивают при 36 – 38°С в течение нескольких дней, контролируя содержание кристаллизационной воды прокаливанием. Препарат точно соответствует формуле дигидрата, когда потери массы при прокаливании составляют 25,28±0,1 %. Для приготовления 1 л 0.2 М раствора требуется 35,603 г Na₂HPO₄·2H₂O.

2. Для приготовления раствора лимонной кислоты пригодна лимонная кислота квалификации ч.д.а. На 1 л 0,1 М раствора требуется 21,008 г лимонной кислоты.

Для приготовления буферных смесей в пробирках смешива­ют буферные растворы в соотношениях, указанных в таблице.

№	pH	0,2 М раствор Na2HPO4, мл	0,1 М раствор лимонной кислоты, мл
1	2,2	0,20	9,80
2	2,4	0,62	9,38
3	2,6	1,09	8,91
4	2,8	1,58	8,42
5	3,0	2,05	7,95
6	3,2	2,47	7,53
7	3,4	2,85	7,15
8	3,6	3,22	6,78
9	3,8	3,55	6,45
10	4,0	3,85	6,15
11	4,2	4,14	5,86
12	4,4	4,41	5,59
13	4,6	4,68	5,32
14	4,8	4,93	5,07
15	5,0	5,15	4,85
16	5,2	5,36	4,61
17	5,4	5,58	4,42
18	5,6	5,80	4,20
19	5,8	6,05	3,95
20	6,0	6,31	3,69
21	6,2	6,61	3,39
22	6,4	6,92	3,08
23	6,6	7,28	2,72
24	6,8	7,72	2,28
25	7,0	8,24	1,76
26	7,2	8,69	1,31
27	7,4	9,08	0,92
28	7,6	9,36	0,64
29	7,8	9,57	0,43
30	8,0	9,72	0,28