23.4. Минеральные вещества мышечной ткани

В состав мышечной ткани входят К⁺, Na⁺, Ca²⁺, Mg²⁺, Cl^-, SO₄^2-, PO₄^3- и др. Наиболее просто их определять в остатке после озоления. Однако при температуре озоления возможны потери хлора. Поэтому, когда определяют хлор, сжигание про­изводят только до обугливания. Большинство минеральных ве­ществ можно определять в золе.

Для определения железа небольшое количество (несколько граммов) измельченной мышечной ткани помещают в фарфоровый тигель и озоляют обычным образом. Золу смывают в стакан 10%-ным раствором соляной кислоты, тщательно перемешивают и после настаивания в течение 5—10 мин отфильтровывают через бумажный фильтр. В фильт­рате содержатся почти все минеральные составные части мышечной ткани.

Реакция основана на образовании роданового железа, имеющего красную окраску:

FeCl₃ + 3KCNS = Fe(CNS)₃ + 3KCl.

Реактивы и материалы: солянокислая вытяжка из золы, 5%-ный раствор роданистого калия (KCNS).

Оборудование и посуда: пробирки, капельницы.

Порядок выполнения работы

К 5 мл солянокислой вытяжки из золы добавляют 5%-ный раствор роданистого калия (KCNS) и наблюдают за появлени­ем красной окраски.

23.5. Получение и исследование свойств желатины из сухожилий

Сухожилия крупного рогатого скота очищают от фасций, промывают водой, разрезают на куски и заливают насыщенным раствором известкового молока Ca(OH)₂. На 100 г сухожилий берут 200 мл известкового молока.

Золка продолжается 1—2 недели. Золеные сухожилия про­мывают водой, а затем нейтрализуют. При нейтрализации сухо­жилия заливают 1%-ным раствором соляной кислоты и после достижения слабокислой реакции (рН около 6) по универсальному индикатору на разрезе сухожилия нейтрализацию заканчивают. Сухожилия промывают водой, затем помещают в стакан, который ставят в водяную баню при 60—70 С. Здесь выплавляется желатина. Раствор ее используют для проведения соответствующих опытов.

Реактивы и материалы: 1%-ный раствор желатины, 4%-ный раствор желатины, 1 %-ный раствор уксусной кислоты, 1%-ным раствор желатины, сухой сернокислый аммоний, насыщенный раствор танина.

Оборудование и посуда: пробирки, пипетки, капельницы.

Порядок выполнения работы

1. Кипятят в пробирке 1%-ный раствор желатины и устанав­ливают, что этот белок не свертывается при нагревании.

2. В пробирку наливают 2—3 мл 4%-ного расплавленного раствора желатины, охлаждают под струей холодной воды и отмечают, что через некоторое время желатина застывает, образуя гель.

3. В пробирку наливают 5 мл 4%-ного расплавленного раствора желатины, добавляют 0,5 мл 1 %-ного раствора уксусной кислоты, кипятят 10—15 мин и после охлаждения наблюдают отсутствие желирующей способности. Желатина легко гидролизуется при кипячении с кислотами. Этим объясняется потеря желирующей способности.

4. Проделывают с 1%-ным раствором желатины ксантопротеиновую реакцию и убеждаются, что от азотной кислоты осадка не образуется, появляется лишь слабо-желтая окраска. Это указывает на то, что в желатине содержится очень мало аминокислот с бензольным ядром.

1. К 5 мл 1%-ного раствора желатины добавляют сухой сернокислый аммоний до выпадения желатины в осадок.

5. К 5 мл 1%-ного раствора желатины добавляют насыщенный раствор танина. Желатина выпадает в осадок. Реакции 5 и 6 указывают на способность желатины осаждаться реактивами, применяемыми для осаждения других белков.