21.3. Гормон мозгового слоя надпочечников – адреналин

В основе химической структуры адреналина лежит ядро пирокатехина. При взаимодействии адреналина с хлорным железом возникает изумрудно-зеленое окрашивание. Реакция обусловлена наличием пирокатехиновой группировки в молекуле адреналина. Образуется соединение типа фенолята зеленого цвета.

Подобное окрашивание в присутствии хлорного железа получа­ется с пирокатехином.

Реактивы и материалы: адреналин, 0,1% раствор, хлорное железо, 3% раствор, гидроксид натрия, 10% раствор, пирокатехин, 0,05% раствор.

Оборудование и посуда: штатив с пробирками, капельницы.

Порядок выполнения работы

1. В пробирку помещают 10 капель 0,1% раствора адреналина и прибавляют 1 каплю 3% раствора хлорного железа. Жидкость окра­шивается в изумрудно-зеленый цвет.

2. К содержимому пробирки добавляют 1 каплю 10% раствора гидроксида натрия. Окраска переходит в винно-красную, а затем в коричневую.

3. Проделывают такую же пробу с 0,05% раствором пирокатехина и убеждаются в том, что она аналогична реакции с адреналином. Это доказывает присутствие ядра пирокатехина в молекуле адреналина.

Сделать вывод.

21.4. Гормоны коркового слоя надпочечников (кортикостероиды)

Кортикостероиды имеют в основе своего строения кольцо циклопентанпергидро-фенантрена. Они синтезируются в корковом слое надпочечников из ацетилкоэнзима А (активная форма уксус­ной кислоты, источником которой являются как углеводы, так и липиды) или из холестерина. Важнейшим промежуточным продук­том является прогестерон. Из прогестерона образуются также жен­ские (эстрогены) и мужские (андрогены) половые гормоны.

Основными нейтральными 17-кетостероидами, встречающими­ся в моче человека, являются андростерон, этиохоланолон, дегидроэпиандростерон, эпиандростерон и др.

Реакция открытия 17-кетостероидов в моче основана на способности 17-кетостероидов давать в щелочной среде с мета-динитробензолом продукт конденсации крас­ного или красно-фиолетового цвета за счет метиленовой группы (СН₂), соседней с кетогруппой. Интенсивность окраски пропорциональна количеству находящихся в моче 17-кетостероидов.

Реактивы и материалы: моча, метадинитробензол, 2% раствор в этаноле, натрия гидроксид, 30% раствор.

Оборудование и посуда: штатив с пробирками, капельницы.

Порядок выполнения работы

1. В пробирку вносят 5 капель мочи, добавляют 5 капель 30% раствора гидроксида натрия и 5 капель 2% раствора мета-динитробензола.

2. Содержимое пробирки смешивают и оставляют стоять на несколько минут. При стоянии появляется красное окрашивание, обусловленное наличием 17-кетостероидов в моче. Сделать вывод.

21.5. Гормоны половых желез

В основе структуры половых гормонов лежит кольцо циклопентанпергидрофенантрена. Их биосинтез может происходить в коре надпо­чечников, однако образование основной массы этих гормонов сосредоточено избирательно: андрогенов – в мужских половых железах, эстрогенов – в яичниках (во время беременности также в плаценте).

Женские половые гормоны (эстрадиол, эстрон, эстриол) содержат фенолъное кольцо (А) и поэтому дают ряд реакций, характерных для фенолов.

При взаимодействии диазореактива с эстроном образуется со­единение, окрашенное в желтый цвет.

Реактивы и материалы: фолликулин, масляный раствор (в ампулах), сульфаниловая кислота, 1% раствор, азотистокислый натрий, 5% раствор, углекислый натрий, 10% раствор.

Оборудование и посуда: штатив с пробирками, капельницы.

Порядок выполнения работы

1. Получают диазореактив. Для этого в пробирке смешивают 3 капли 1% раствора сульфаниловой кислоты и 3 капли 5% раство­ра азотистокислого натрия.

2. К диазореактиву добавляют 3 капли масляного раствора фолликулина и 2 капли 10% раствора углекислого натрия.

3. Пробирку встряхивают и наблюдают постепенное окрашивание жидкости в желтый цвет.

Сделать вывод.

21.6. Открытие фолликулина

Реактивы и материалы: спиртоый раствора фолликулина, концентрированная серная кислота, вода, 30%-ный раствор гидроксида натрия, реактив Фолина.

Оборудование и посуда: пробирки, пипетки, водяная баня.

Порядок выполнения работы

Реакция с концентрированной серной кислотой

В пробирку берут 1 мл спиртового раствора фолликулина и помещают ее в кипящую водяную баню на 5—10 мин для испарения спирта. К оставшемуся в пробирке фолликулину добавляют 1 мл концентрированной серной кислоты и пробир­ку вновь помещают в кипящую водяную баню на 5—10 мин. Жидкость в пробирке окрашивается в соломенно-желтый цвет, переходящий при нагревании в оранжевый и имеющий зеленую флюоресценцию.