8.2. Количественное определение витамина р (рутина) в чае

Известно несколько соединений, обладающих Р-витаминной активностью. В основе их лежит скелет флавона.

Наиболее изучены строение и свойства рутина.

Рутин - кристаллическое вещество желто-оранжевой окраски. Содержится во всех продуктах, в которых обнаруживается витамин С. Много его в чае, фруктах, ягодах (бруснике, клюкве, сливе, винограде). Рутин участвует в окислительно-восстановительных процессах. Его присутствие усиливает окислительно-восстановительный эффект витамина С.

Количественное определение рутина основано на его способности окисляться перманганатом калия. В качестве индикатора применяют индигокармин, который вступает в реакцию с перманганатом после полного окисления всего рутина. Экспериментально установлено, что 1 мл 0,05 н раствора перманганата калия окисляет 3,2 мкг (0,00506 мкмоль) рутина. В черном чае содержится 300-500 мг/кг (474-790 мкмоль/кг) рутина.

Реактивы и материалы: черный или зеленый чай, дистиллированная вода, индигокармин.

Оборудование и посуда: конические колбы, пипетки.

Порядок выполнения работы

К 0,1 г черного или зеленого чая приливают по 50 мл горячей дистиллированной воды и проводят экстракцию в течение 5 мин. Отмеривают в кониче­ские колбочки по 10 мл экстракта, добавляют по 10 мл дистиллированной воды и 10 капель индигокармина. Титруют раствором перманганата калия до появления устойчивой желтой окраски. Расчеты производят по формуле:

Х= 3,2∙(0,00506)а∙50∙1000/10∙0,1 (мкг(мкмоль)/кг),

где 3,2(0,00506) - количество рутина (мкг, мкмоль), соответствующее 1 мл 0,05н раствора перманганата калия; а- количество 0,05 н раствора перманганата калия, израсходованное на титрование, мл; 10 - количество вытяжки, взятое для титрования, мл; 50 - общий объем экстракта; 0,1 - масса сухого вещества, мг; 1000- коэффициент пересчета на 1 кг сухого вещества.

Работа № 9. Углеводы

Углеводы - обширный класс соединений, широко распространенных в природе. По химической природе это органические вещества, представляющие собой альдегиды или кетоны многоатомных спиртов.

9.1. Хроматографический анализ углеводов

Метод основан на неодинаковой способности углеводов адсорбироваться на тех или иных адсорбентах и различной растворимости в смешивающихся жидкостях. Для идентификации углеводов на хроматограммах используют метчики, входящие в состав смеси и нанесенные на ту же хроматограмму. Степень подвижности углеводов на хроматограмме выражают через соотношение пути, пройденного данным соединением от линии старта к расстоянию, пройденному фронтом растворителя (R_f):

R_f = a/b,

где а - расстояние от линии старта до центра пятна; b - расстояние от старта до финиша.

Реактивы и материалы: 5%-ные водные растворы углеводов, разделяющая смесь состава: н-бутанол - уксусная кислота - вода (60 мл-15 мл-25 мл), реагентдля проявления состава: н-бутанол - вода - уксусная кислота - фосфорная кислота - анилин дефиниламин (60 мл-25 мл-15 мл- 10 мл-1 мл- 2 г).

Оборудование и посуда: хроматографические пластины, хроматограическая камера, термостат.