Рекомендации к составлению протокола.

Результаты работы записать в форме таблицы.

Разведение крови	Взято разведённой крови для анализа, мл		Количество 0,1н.раствора KMnO4, пошедшее на титрование, мл		Количество Н2О2, разложенное каталазой		Каталазное число
	контроль	опыт	контроль	опыт	мл 0,1 н раствора	мг

В выводах сопоставить величину полученного каталазного числа с нормальными значениями его и оценить активность каталазы.

Работа № 7. Витамины. Качественный анализ витаминов

Витамины — незаменимые низкомолекулярные составные части пищи человека. Многие витамины функционируют как кофакторы ферментов (ретинол, аскорбиновая кислота, тиамин, ниацин, рибофлавин, пиридоксин, биотин, пантотеновая кислота, фолиевая кислота, цианкобаламин), но не все кофакторы ферментов являются витаминами. Некоторые витамины функционируют как биологические антиоксиданты (токоферол, аскорбиновая кислота), другие действуют как кофакторы метаболических реакций окисления-восстановления (токоферол, аскорбиновая кислота ниацин, рибофлавин, пантотеновая кислота). Витамины отличаются от всех других органических пищевых веществ (белков, жиров, углеводов) тем, что они требуются в очень малых количествах, выражающихся в мг и мкг.

Присутствие витаминов в пищевых продуктах и других материалах может быть обнаружено при помощи качественных цветных реакций на витамины или на основании свойства некоторых витаминов флуоресцировать. При этом учитывается способность тех иных витаминов растворяться преимущественно в воде или в липидах.

7.1. Витамин в1 (тиамин, анейрин)

Химически чистый тиамин — бесцветный кристаллический порошок, хорошо растворимый в воде. Тиамин устойчив в кислой среде (например, в желудке), но разрушается в щелочном растворе, поэтому варка пищи в щелочной среде приводит к потере витамина

Витамин B₁ представляет собой замещенный пиримидин, связанный метиленовой группой с замещенным тиазолом. В виде своего пирофосфорного эфира он в организме животных и человека, в ком­плексе с другими коферментами — липоевой кислотой, коэнзимом A (HS—КоА), НАД⁺, ФАД — входит в состав ферментной сис­темы, осуществляющей окислительное декарбоксилирование -кетокислот (пировиноградной, -кетоглутаровой). При отсутствии или недостаточном поступлении в организм ти­амина окислительное декарбоксилирование пировиноградной кис­лоты и последующее ее окисление нарушаются, что приводит к накоплению этой кислоты в тканях. Особенно резкие нарушения в превращениях пировиноградной кислоты наблюдаются в мозгу. Это выражается в различных расстройствах функции центральной и периферической нервной системы (невриты, параличи и др.).

Реакция окисления витамина в1 в тиохром (2,7-диметилтиохромин-8-этанол)

Реакция основана на способности тиамина окисляться в щелочной среде под действием красной кровяной соли в тиохром, который извлекается из раствора изобугиловым спиртом и дает в ультрафиолетовых лучах сине-голубую флюоресценцию.

Реактивы и материалы: тиамин в порошке, железосинеродистый калий, 5% раствор, гидроксид натрия, 30% раствор, изобутиловый спирт.

Оборудование и посуда: стеклянные лопаточки, штатив с пробирками, капельницы, капилляры, микропипетки, сухие стеклянные пробирки из нефлюоресцирующего стекла, флюороскоп.