Порядок выполнения работы

1. Несколько капель дефибринированной крови выпаривают досуха в небольшой фарфоровой чашке (под тягой), обугливают и озоляют, добавляя 2-3 капли концентрированной азотной кислоты и продолжая нагревание до образования сухого остатка. При этом гем, являясь органическим веществом, разрушается, а железо переходит в состав золы.

2. Сухой остаток соскабливают и полученный порошок переносят в пробирку. Добавляют 20 капель 10% раствора соляной кислоты и взбалтывают в течение нескольких минут для растворения остатка и получения FeCl₃.

3.Содержимое пробирки делят на две части и проделывают реакции на Fe³⁺.

А. К одной части жидкости добавляют по каплям 5% раствор железисто-синеродистого калия до появления зеленого или синего окрашивания вследствие образования берлинской лазури, которая затем может выпасть в виде синего осадка.

4FeCl₃ + 3K₄Fe(CN)₆ → 3Fe₄[Fe(CN)₆]₃ + 12KCl

Б. К другой части жидкости добавляют по каплям 5% раствор роданистого калия до появления розового или красного окрашивания, указывающего на образование роданистого железа.

FeCl₃ + 3KSCN → Fe(SCN)₃ + 3KCl

4.2.2. Получение кристаллов гемина (Тейхмана)

При нагревании высушенной крови с ледяной уксусной кислотой кровяной пигмент распадается на глобин и гематин. Гематин при действии хлористого водорода, возникающего при взаимодействии хлористого натрия (имеющегося в крови или добавленного) и уксусной кислоты, переходит в хлоропроизводное гемин. Последний выкристаллизовывается при остывании.

Реактивы и материалы: дефибринированная кровь, ледяная уксусная кислота.

Оборудование и посуда: предметные стекла, покровные стекла, микроскоп, стеклянные палочки или капельницы.

Порядок выполнения работы

1. Стеклянной палочкой (или капельницей) наносят на предметное стекло каплю крови и размазывают ее встряхиванием стекла или краем другого предметного стекла (полученный мазок не должен быть очень тонким).

2. Кровь высушивают, держа стекло высоко над пламенем горелки во избежание перегревания выше 60 °С (контролировать нагрев прикосновением стекла к тыльной поверхности кисти руки).

3.После полного высушивания добавляют 1—2 капли ледяной уксусной кислоты, накрывают покровным стеклом и осторожно нагревают на маленьком пламени горелки до закипания кислоты.

4. После охлаждения препарат рассматривают под микроскопом, зарисовывают форму кристаллов. Если кристаллов гемина обнаружить не удается, то вводят под покровное стекло еще 1—2 ледяной уксусной кислоты, поднося капельницу к краю покровного стекла, и вновь нагревают.

При исследовании старых кровяных пятен геминовую пробу производят с соскобом пятна или же кусочек ткани с пятном режут на мелкие части.

Перед обработкой ледяной уксусной кислотой добавляют один маленький кристаллик хлористого натрия.

4.3. Фосфопротеины

Фосфопротеины состоят из простого белка и фосфорной кислоты в качестве простетической группы. Фосфорная кислота соединена с остатками оксиаминокислот (серии, треонин) белковой части по типу сложных эфиров. К фосфопротеинам относится казеин молока, ововителлин яичного желтка и др. Они являются питательным материалом. Вместе с аминокислотами фосфопротеины доставляют необходимую для организма фосфорную кислоту. Фосфорная кислота особенно важна для развития скелета и зубов растущих организмов.