
- •Основы биохимии и токсикологии
- •Введение
- •Лабораторная работа №1 Лабораторнаяя работа 2 поляриметрическое определение сахаров
- •Лабораторная работа № 2
- •Тема: Определение Сахаров
- •Количественное определение содержания углеводов (по методу Шоорля)
- •1. Определение моносахаридов и дисахаридов
- •Определение глюкозы по методу Шоорля
- •2. Определение крахмала
- •Содержание различных форм углеводов в растениях
- •Тема: белки
- •Качественные реакции на белки
- •Реакции осаждения белков
- •Определение белков в листьях растений при помощи цветных реакций (по методу м. X. Чайлахяна)
- •Количественное определение белковых фракций
- •Лабораторная работа № 4 Тема: Определение Липидов Определение в липидах чисел - кислотного, омыления и эфирного
- •Полумакрометоды определения чисел - кислотного, омыления и эфирного
- •Рефрактометрический метод определения йодного числа
- •Раздел 2
- •4.1. Ксенобиотики
- •Контрольные вопросы
- •Строение мембраны
- •Функции мембран
- •Пути поступления веществ в клетку
- •Мембранотропные свойства ксенобиотиков
- •Лабораторная работа № 8 Определение нитратов в растительной продукции
- •Ход работы
- •Литература
Лабораторная работа № 2
Тема: Определение Сахаров
Особенности сахаров и методов их определения. Содержание Сахаров в растениях и их качественный состав разнообразен. Широко распространены в основном 3 сахара - глюкоза, фруктоза и сахароза, редко − другие Сахара (например, сорбоза в ягодах рябины).
При одном и том же количественном содержании Сахаров у различных видов и сортов растений качественный их состав неодинаков. В сахарной свекле содержится в среднем около 19 % Сахаров, представленных главным образом сахарозой. Ягоды винограда содержат 15-25 % сахара, состоящего почти исключительно из глюкозы и фруктозы (примерно в равных количествах). В большинстве же плодов и овощей имеются все 3 вида сахара с преобладанием того или иного из них.
Основная часть сухого вещества плодов и овощей (70-97 %) представлена сахарами. В связи с этим колебания в содержании воды сильно отражаются на процентном содержании Сахаров. Дожди и избыточные поливы снижают процент сахара в овощах и плодах, а засуха или недостаток влаги увеличивают их содержание.
Одним из важных факторов накопления Сахаров в плодах, овощах является температура: плоды на юге значительно слаще, чем на севере; в одном и том же районе в годы с жарким солнечным летом плоды более сахаристы, чем в годы с преобладанием пасмурной, прохладной летней погоды.
Вкусовые свойства плодов многих культур и сортов, особенно их сладость, обусловлены отличиями не только в содержании сахара, но и других веществ -органических кислот (томаты, сливы, виноград, яблоки), а также эфирных масел (репчатый лук), капсаицина (в перце) и т. д. Эти вещества маскируют истинную сахаристость плодов, и для правильной оценки качества наряду с сахаристостью определяют и эти вещества (острые сорта репчатого лука содержат больше сахара и особенно сахарозы, чем сладкие).
Длина вегетационного периода оказывает влияние на сахаристость и соотношение Сахаров в плодах: ранние сорта, как правило, менее сахаристы, чем поздние и средние, и сахарозы у них меньше.
Чрезвычайно изменяется сахаристость плодов в процессе их созревания - изменяется общее количество сахаров и их соотношение. В начале хранения идет дозревание плодов некоторых культур (так называемых зимних сортов), и в этот период сахаристость может увеличиваться за счет гидролиза полисахаридов. В дальнейшем, как правило, содержание Сахаров снижается вследствие расходования их в процессе дыхания.
Большая часть растворимых сахаров находится в клеточном соке, и одним из приемов для оценки образцов является анализ сока, выжатого из растения. Для количественного определения сахаров применяются методы, основанные на физических или химических свойствах сахаров: рефрактометрический (по показателю преломления) или ареометрический (по плотности сока). Часто используют поляриметрический метод (анализ сахарной свеклы), основанный на оптической активности Сахаров и характерном удельном вращении.
Наиболее общий - классический метод количественного определения Сахаров, обладающих свободной альдегидной или кетонной группой, основан на их способности восстанавливать в щелочной среде сернокислую медь в закись меди и учете последней. Дисахариды определяют тем же методом, но лишь после их гидролиза.
Сахара легко растворяются в воде, и на этом свойстве основано выделение их из растений в водную вытяжку. Для отделения Сахаров от полисахаридов используют их свойство растворяться в 80-82-градусном спирте (полисахариды нерастворимы). Для разделения моносахаридов используют методы, основанные на способности фруктозы давать окрашивание с резорцином.
Глюкозу определяют по разности между общим содержанием моносахаридов и количеством фруктозы или количественным окислением ее D-глюкооксидазой.
Для разделения и идентификации более сложных смесей Сахаров, а также веществ, входящих в другие классы органических соединений, широко используют методы хроматографии, с помощью которых можно разделить смесь Сахаров на отдельные компоненты и количественно определить каждый из них. Пользуясь методом хроматографии, кроме широко распространенных фруктозы, глюкозы, сахарозы, во многих растениях можно обнаружить присутствие рафинозы, стахиозы, некоторых пентоз и других Сахаров. Однако этот метод требует сравнительно много времени.