Перевод временных препаратов в постоянные

Существует несколько методов перевода временных препаратов в постоянные. Наиболее широко распространен метод с ис­пользованием твердой угольной -кислоты по Конжеру и Ферчайльду. Готовый давленый препарат кладут на ровную поверхность сухого льда на 1-1,5 мин. Покров­ное стекло становится неподвижным. Скальпелем или лезвием бритвы отделяют его от предметного. Клетки должны остаться на предметном стекле, которое затем последовательно выдержи­вают по 2-5 мин в 50, 70, 80, 96%-х растворах этилового спирта, абсолютном спирте и в ксилоле. При отсутствии 100%-го этило­вого спирта можно использовать бутиловый или изобутиловый спирт. Перед ксилолом иногда вводят смесь абсолютного этило­вого спирта и ксилола. После ксилола препарат заключают в ка­надский бальзам, используя чистое покровное стекло.

Многие лаборатории применяют для превращения давленых препаратов в постоянные метод с жидким азотом. Для этого в сосуды с жидким азотом вставляют алюминиевый стер­жень, имеющий небольшой столик. Столик быстро охлаждается, и на его поверхность кладут препараты. В дальнейшем, так же как это было описано выше, отделяют покровное стекло, а пред­метное стекло проводят последовательно через серию жидкостей, затем препарат заключают в бальзам.

Если нет сухого льда и жидкого азота, для отделения покров­ных стекол можно воспользоваться более простой методикой. Для ацетокарминовых препаратов берут 10%-й раствор уксусной кислоты. Наливают ее в чашку Петри, кладут туда две спички и на них помещают препарат покровным стеклом вниз. Через 10-15 мин покровное стекло отделяется, Предметное стекло быстро опускают в фиксатор - уксусный алкоголь, а затем по­следовательно в абсолютный спирт, ксилол и заключают в баль­зам. Этот метод применяют в различных модификациях.

После окрашивания препаратов по Фёльгену и отделения по­кровного стекла препарат обезвоживают последовательно в креп­ких спиртах и проводят через ксилол перед заключением в баль­зам (см. с. 103).

Существует методика перевода временных препаратов в по­стоянные без удаления покровного стекла путем пропускания с одной стороны покровного стекла и отсасывания с помощью фильтровальной бумаги с другой его стороны последо­вательно разных растворов: 45%-го раствора уксусной кислоты, смеси спирта и уксусной кислоты (1:2), абсолютного спирта. Можно также последовательно провести спирты разной концент­рации, а затем ксилол и бальзам. Эту методику применяют в ра­боте с ацетокарминовыми препаратами.

Наиболее просто можно заключить гистологические срезы в сахарный сироп по методике Шалумовича. Метод применяют в работе с ботаническими объектами, в том числе для флуорес­центной микроскопии. Растворяют 25 г сахара в 50 мл горячей воды и выпаривают до ¾ объема на водяной бане. После заки­пания раствора его фильтруют и добавляют кристаллик антисеп­тика - тимола. Полученный сироп в различных модификациях используют для быстрого изготовления постоянных препаратов. К окрашенному объекту после удаления избытка красителя с по­мощью фильтровальной бумаги добавляют каплю сиропа сбоку покровного стекла или раздавливают объект в капле сиропа. Пре­парат исследуют сразу или подсушивают его до превращения в постоянный.

Для превращения временных давленых препаратов в постоян­ные в лабораторной практике можно использовать термо­электрические охлажда­ющие столики - приспо­собления к замораживающему микротому (рис. 34). Они позво

Рис. 34. Термоэлектрический охлаждающий столик (ТОС): 1 - рабочая охлаждающая поверхность; 2 - корпус; 3 - штуцер для подключения воды; 4 - клемма для подключения электрического тока.