Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Генетика.docx
Скачиваний:
219
Добавлен:
17.06.2019
Размер:
2.65 Mб
Скачать
  1. Представление о геноме.

  • Гено́м — совокупность наследственного материала, заключённого в клетке организма. Геном содержит биологическую информацию, необходимую для построения и поддержания организма. Большинство геномов, в том числе геном человека и геномы всех остальных клеточных форм жизни, построены из ДНК, однако некоторые вирусы имеют геномы из РНК.

  • Существует также и другое определение термина «геном», в котором под геномом понимают совокупность генетического материала гаплоидного набора хромосом данного вида. Когда говорят о размерах генома эукариот, то подразумевают именно это определение генома, то есть размер эукариотического генома измеряют в парах нуклеотидов ДНК или пикограммах ДНК на гаплоидный геном.

  • У человека (Homo sapiens) наследственный материал соматической клетки представлен 23 парами хромосом (22 пары аутосом и пара половых хромосом), находящихся в ядре, а также клетка обладает множеством копий митохондриальной ДНК. Двадцать две аутосомы, половые хромосомы Х и Y, митохондриальная ДНК человека содержат вместе примерно 3,1 млрд пар оснований.

  • Термин «геном» был предложен Гансом Винклером в 1920 году

  1. Понятие транскрипция. Условия необходимые для протекания транскрипции, значение.

  • Транскри́пция — процесс синтеза РНК с использованием ДНК в качестве матрицы, происходящий во всех живых клетках.

  • Матрица – кодирующая цепочка ДНК

  • Продукт – РНК

  • Комплементарность между нуклеотидами кДНК и РНК

  • В определенном участке ДНК разрываются водородные связи, получается две одинарных цепочки. На одной из них по принципу комплементарности строится иРНК. Затем она отсоединяется и уходит в цитоплазму, а цепочки ДНК снова соединяются между собой.

  • Значение транскрипции заключается в переносе генетической информации с ДНК на РНК. 

  • Условия протекания транскрипции:

    • Матрица - 1 нить ДНК. Образуется транскрипционный глазок;

    • Структурные компоненты - рибонуклеозидтрифосфаты (АТФ, ГТФ, ЦТФ, УТФ). Они будут распадаться до монофосфатов с выделением энергии;

    • Mg2+;

    • Белковые факторы транскрипции;

    • РНК-полимераза-I (пре-рРНК), РНК-полимераза-II (пре-мРНК), РНК-полимераза-III (пре-тРНК).

  • Этапы транскрипции:

  • 1) Инициация (начало);

  • 2) Элонгация (продолжение);

  • 3) Терминация (окончание);

  • Инициация

  • Ини­ци­а­ция тран­скрип­ции — про­цесс свя­зы­ва­ния ДНК-за­ви­си­мой РНК-по­ли­ме­ра­зы с про­мо­то­ром и об­ра­зо­ва­ния ста­биль­но­го ком­плек­са для про­дол­же­ния тран­скрип­ции.

  • Ини­ци­а­ции тран­скрип­ции может быть раз­би­та на несколь­ко шагов.

  1. РНК-полимераза (вместе с факторами инициации транскрипции у эукариот) связывается с промотором с образование закрытого комплекса. В такой форме внутри комплекса находится двойная спираль ДНК.

  2. Преобразование в открытый комплекс. Спираль ДНК на расстоянии около 13 пар нуклеотидов от точки старта транскрипции плавится, то есть цепи ДНК отделяются друг от друга. Участок разделённых спиралей ДНК называется транскрипционным пузырем.

  3. Разделение цепей открывает доступ к некодирующей цепочке ДНК. Первые два рибонуклеотида выравниваниюся с шаблонной ДНК и соединяются. Далее удлинение РНК происходит при присоединении рибонуклеотидов к 3'-концу цепочки. Соединение первых 10 нуклеотидов – неэффективный процесс, поэтому транскрипция на этой стадии часто обрывается, короткий транскрипт высвобождается и синтез начинается снова. Такая пробуксовка полимеразы называется  абортивной транскрипцией.

  4. Как только полимеразно-промоторный комплекс образует транскрипт длиннее 10 нуклеотидов, он становится достаточно стабильным, чтобы продолжать транскрипцию и переходит в стадию элонгации. Также это называется избеганием промотора.

  • Элонгация

  • Мо­мент пе­ре­хо­да РНК-по­ли­ме­ра­зы от ини­ци­а­ции тран­скрип­ции к элон­га­ции точно не опре­де­лен. Три ос­нов­ных био­хи­ми­че­ских со­бы­тия ха­рак­те­ри­зу­ют этот пе­ре­ход в слу­чае РНК-по­ли­ме­ра­зы ки­шеч­ной па­лоч­ки: от­де­ле­ние сиг­ма-фак­то­ра, пер­вая транс­ло­ка­ция мо­ле­ку­лы фер­мен­та вдоль мат­ри­цы и силь­ная ста­би­ли­за­ция тран­скрип­ци­он­но­го ком­плек­са, ко­то­рый кроме РНК-по­ли­ме­ра­зы вклю­ча­ет рас­ту­щую цепь РНК и транс­кри­би­ру­е­мую ДНК. Эти же яв­ле­ния ха­рак­тер­ны и для РНК-по­ли­ме­раз эу­ка­ри­от. Пе­ре­ход от ини­ци­а­ции к элон­га­ции со­про­вож­да­ет­ся раз­ры­вом свя­зей между фер­мен­том, про­мо­то­ром, фак­то­ра­ми ини­ци­а­ции тран­скрип­ции, а в ряде слу­ча­ев — пе­ре­хо­дом РНК-по­ли­ме­ра­зы в со­сто­я­ние ком­пе­тент­но­сти в от­но­ше­нии элон­га­ции (на­при­мер, фос­фо­ри­ли­ро­ва­ние CTD-до­ме­на у РНК-по­ли­ме­ра­зы II). Фаза элон­га­ции за­кан­чи­ва­ет­ся после осво­бож­де­ния рас­ту­ще­го тран­скрип­та и дис­со­ци­а­ции фер­мен­та от мат­ри­цы (тер­ми­на­ция).

  • На ста­дии элон­га­ции в ДНК рас­пле­те­но при­мер­но 18 пар нук­лео­ти­дов. При­мер­но 12 нук­лео­ти­дов мат­рич­ной нити ДНК об­ра­зу­ет ги­брид­ную спи­раль с рас­ту­щим кон­цом цепи РНК. По мере дви­же­ния РНК-по­ли­ме­ра­зы по мат­ри­це впе­ре­ди неё про­ис­хо­дит рас­пле­та­ние, а по­за­ди — вос­ста­нов­ле­ние двой­ной спи­ра­ли ДНК. Од­но­вре­мен­но осво­бож­да­ет­ся оче­ред­ное звено рас­ту­щей цепи РНК из ком­плек­са с мат­ри­цей и РНК-по­ли­ме­ра­зой. Эти пе­ре­ме­ще­ния долж­ны со­про­вож­дать­ся от­но­си­тель­ным вра­ще­ни­ем РНК-по­ли­ме­ра­зы и ДНК. Труд­но себе пред­ста­вить, как это может про­ис­хо­дить в клет­ке, осо­бен­но при тран­скрип­ции хро­ма­ти­на. По­это­му не ис­клю­че­но, что для предот­вра­ще­ния та­ко­го вра­ще­ния дви­га­ю­щу­ю­ся по ДНК РНК-по­ли­ме­ра­зу со­про­вож­да­ют то­по­изо­ме­ра­зы.

  • Элон­га­ция осу­ществ­ля­ет­ся с по­мо­щью ос­нов­ных элон­ги­ру­ю­щих фак­то­ров, необ­хо­ди­мых, чтобы про­цесс не оста­нав­ли­вал­ся преждевременно.

  • В по­след­нее время по­яви­лись дан­ные, по­ка­зы­ва­ю­щие, что ре­гу­ля­тор­ные фак­то­ры также могут ре­гу­ли­ро­вать элон­га­цию. РНК-по­ли­ме­ра­за в про­цес­се элон­га­ции де­ла­ет паузы на опре­де­лен­ных участ­ках гена. Осо­бен­но четко это видно при низ­ких кон­цен­тра­ци­ях суб­стра­тов. В неко­то­рых участ­ках мат­ри­цы дли­тель­ные за­держ­ки в про­дви­же­нии РНК-по­ли­ме­ра­зы, т. н. паузы, на­блю­да­ют­ся даже при оп­ти­маль­ных кон­цен­тра­ци­ях суб­стра­тов. Про­дол­жи­тель­ность этих пауз может кон­тро­ли­ро­вать­ся фак­то­ра­ми элон­га­ции.

  • Терминация

  • У бак­те­рий есть два ме­ха­низ­ма тер­ми­на­ции тран­скрип­ции:

  • ро-зависимый механизм, при котором белок Rho ([ро]) дестабилизирует водородные связи между матрицей ДНК и мРНК, высвобождая молекулу РНК.

  • ро-независимый, при котором транскрипция останавливается, когда только что синтезированная молекула РНК формирует стебель-петлю, за которой расположено несколько урацилов (…УУУУ), что приводит к отсоединению молекулы РНК от матрицы ДНК.

  • Тер­ми­на­ция тран­скрип­ции у эу­ка­ри­от менее изу­че­на. Она за­вер­ша­ет­ся раз­ре­за­ни­ем РНК, после чего к её 3' концу фер­мент до­бав­ля­ет несколь­ко аде­ни­нов (…АААА), от числа ко­то­рых за­ви­сит ста­биль­ность дан­но­го транскрипта.