- •Отбор образцов крови
- •Подготовка комплемента к работе
- •Постановка реакции гемолиза
- •Постановка реакции агглютинации
- •Постановка непрямой реакции агглютинации (по Кумбсу)
- •Методические указания по выполнению заданий
- •Определение достоверности происхождения крупного рогатого скота
- •Определение достоверности происхождения свиней
- •Метод иммуногенетического контроля достоверности происхождения лошадей
- •Определение генотипа выбывших родителей на основе генотипов оставшихся родителей и потомков
- •Основные понятии и категории
Определение достоверности происхождения свиней
Для проведения экспертизы достоверности происхождения животных по группам крови целесообразно использовать системы В, D, Е, F, G, I, L, N, О. Это "закрытые'' системы, то ее такие системы, на которые имеются моноспецифические сыворотки, выявляющие все, входящие в эту систему, эритроцитарные антигены. При наличии сывороток-реагентов, выявляющих все эритроцитарные антигены, входящие в определенную «закрытую"систему, легко установить непосредственно по фенотипу генотип групп крови животного. После сопоставления генотипов групп крови предполагаемого отца и матери можно дать заключение о соответствии племенных записей происхождения животного (табл. 8).
При сопоставлении аллелей групп крови родителей и потомка N 1 обнаружено несоответствие наследования аллелей по следующим показателям.
Система D. У предполагаемой родительской пары могли родиться потомки, имеющие в этом локусе феногруппы Dab или Daa. Наличие у потомка аллеля Db в гомозиготном состоянии ставит под сомнения принадлежность его к данной родительской паре.
У предполагаемых отца и матери отсутствует аллель Ebdg, а у потомка он имеется.
От гомозиготного хряка и матки по Сa-аллелю не могут родиться поросята, гомозиготные по Сb аллелю.
В системе L потомок наследовал аллель Lbdfi, которого нет ни у матери, ни у отца.
Таким образом, данная пара животных не является родителями поросенка N 1.
Потомок N 2 происходит от этой пары, так как он несет аллели, которые имеются у его родителей.
Потомок N 3 не происходит от зарегистрированного отца, так как он несет феногруппы Eedg, Ladhjk, которые у отца отсутствуют. Этот потомок гетерозиготен (СаЬ), а мать и отец гомозиготны по Са-аллелю. Он является
Таблица 8-Генотипы групп крови свиней
Родственные отношения
|
Системы групп крови |
Заключение
|
||||||
В |
D |
F |
E |
G |
I |
L |
||
Отец |
ab |
ab |
ab |
aeg/aeg |
aa |
bb |
abhi/adhi |
|
Мать |
bb |
aa |
ab |
bdf /aeg |
aa |
aa |
begi/begi |
|
Потомки |
|
|
|
|
|
|
|
|
№1 |
bb |
bb |
ab |
bdg/bdg |
bb |
aa |
adhi/bdfi |
|
№2 |
bb |
ab |
aa |
aeg/bdf |
aa |
ab |
adhi/begi |
|
№3 |
ab |
ab |
ab |
edg/bdg |
ab |
aa |
begi/adhjk |
|
№4 |
ab |
aa |
bb |
aeg/aeg |
aa |
ab |
abhi/ begi |
|
№5 |
aa |
bb |
bb |
aeg /aeg |
aa |
ab |
abhi/adhi |
|
№6 |
ab |
ab |
bb |
bdf/ bdf |
aa |
ab |
abhi/ begi |
|
№7 |
aa |
ab |
ab |
aeg/aeg |
bb |
ab |
abhi/adhi |
|
№8 |
bb |
aa |
aa |
bdf /bdf |
aa |
ab |
abhi/adhi |
|
№9 |
ab |
bb |
ab |
aeg /aeg |
aa |
aa |
abhi/ begi |
|
№10 |
aa |
ab |
ab |
bdf/bdf |
bb |
aa |
abhi/adhi |
|
№11 |
ab |
bb |
aa |
aeg/bdf |
aa |
aa |
abhi/ begi |
|
гомозиготным по Iа-аллелю, в то время, как отец гомозиготен по Ib-аллелю. Материнство у этого потомка подтверждается.
При определении происхождения животных по группам крови необходимо иметь в виду, что наличие несоответствия наследования аллеля в одном из локусов не может служить недостоверным показателем для заключения о наличии неправильных записей о происхождении по отцу или матери. Дело в том, что по разным причинам могла не пройти серологическая реакция у одного из родителей или потомка с монорецепторной сывороткой и, таким образом, у одной или более особей из триады (отец, мать, потомок) неправильно определен антигенный состав эритроцитов.
При анализе происхождения по "незакрытым" системам групп крови или, когда исследователь не располагает полным набором реагентов для определения всех эритроцитарных антигенов, могут быть сделаны ошибочные заключения о соответствии или несоответствии племенных записей. Это связано с тем, что при отсутствии возможности определить второй аллель, нельзя установить в каком наборе (гомо- или гетерозиготном) представлен известный аллель, установленный по сыворотке-реагенту. Например, в системе а – групп крови имеется возможность установить наличие только ас и ар антигенов. При этом по результатам определения указанных антигенов моноспецифическими сыворотками невозможно определить содержатся в гомо-или гетерозиготном наборе аллели, контролирующие синтез данных антигенов. В связи с этим от аcp-положительных родимей могут родиться аcp-отрицательные потомки, что, казалось бы, противоречит кодоминантному принципу наследования признака.
Предположим, по результатам определения антигенного состава эритроцитов установлено, что оба родителя имели аллель аcp. На основании определения антигенного состава данной «незакрытой" системы невозможно сделать заключение являются ли эти животные гомо- или гетерозиготными по аcp аллелю, но можно ожидать следующие варианты наследования аллеля:
В случаях, когда оба родителя были гомозиготными по аcp аллелю (аcp аcp) все потомки будут гомозиготными и эритроциты их будут положительно реагировать с сывороткой-реагентом.
При гетерозиготном наборе аcp аcp - аллеля могут родиться дети следующими генотипами в этой системе: аcp аcp ; аcp А-; А- А- .
При определении антигенного состава в эритроцитах по аср-антисыворотке два первых потомка будут аcp -положительными, а третий - отрицательный и может быть по эму признаку ошибочно истолкован, как потомок, не принадлежащий к данной родительской паре.
Для исключения подобных ошибочных заключений иммуногенетического анализа происхождения по "незакрытым» системам необходимо устанавливать генотип матери и отца в этих системах путем семейного анализа, а затем определять имеются или отсутствуют разногласия между племенными записями и данными серологического анализа.
Задание 6. Сделать заключение о соответствии потомков №4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 родителям (табл.8).
Задание 7 . Свиноматка Соя 972 была осеменена спермой двух хряков: Драгуна 2337 и Лафета 523. Определить родительские пары представленных потомков (табл.9). Установить отличительные феногруппы трех родителей.
Задание 8. Свиноматка кемеровской породы Жемчужина 28 была осеменена двумя хряками: Быстрым 627 и Беркутом 8. Установить отца у поросят по антигенам крови свиноматки и хряков («+» означает присутствие антигена; «–» - отсутствие антигена). Данные приведены в таблице 10.
В свиноводстве при оценке хряков-производителей по качеству потомства проводится осеменение свиноматок смешанной спермой двух или нескольких хряков. Тем самым достигается максимальная уравненность в условиях эмбрионального и постэмбрионального развития потомков оцениваемых производителей. Сравнением потомства нескольких производителей,
Таблица 9-Определение достоверности происхождения поросят
Пол, кличка, номер животного
|
Генотипы и фенотипы по системам антигенов |
Заключение |
||||||||||||||
В |
С |
D |
E |
F |
G |
H |
I |
J |
к |
L |
M |
N |
О |
Отец |
Мать |
|
Хряк Драчун 2337 |
bb |
a |
bb |
aeg/edg |
bb |
ab |
a |
ab |
b |
aсe |
bagi/begi |
a |
b |
bb |
|
|
Хряк Лафет 523 |
bb |
- |
ab |
bdg/bdg |
bb |
bb |
- |
bb |
b |
b |
adhi/bdfi |
- |
ab |
bb |
|
|
Матка Соя 972 |
ab |
- |
bb |
aeg/bdg |
bb |
ab |
a |
ab |
b |
b |
begi/begi |
a |
a |
bb |
|
|
Потомки: |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
№1 |
bb |
- |
ab |
aeg/bdg |
bb |
bb |
- |
bb |
b |
' b |
adhi/begi |
- |
ab |
bb |
|
|
№2 |
bb |
a |
bb |
aeg/aeg |
bb |
aa |
a |
ab |
b |
b |
begi/begi |
a |
b |
bb |
|
|
№3 |
ab |
- |
bb |
bdg/bdg |
bb |
ab |
|
bb |
b |
b |
adhi/begi |
- |
b |
bb |
|
|
№4 |
bb |
a |
bb |
edg/aeg |
bb |
ab |
a |
bb |
b |
ace |
begi/begi |
- |
b |
bb |
|
|
№5 |
ab |
a |
bb |
aeg/bdg |
bb |
bb |
a |
aa |
b |
b |
begi/begi |
a |
b |
bb |
|
|
№6 |
ab |
- |
bb |
bdg/bdg |
bb |
bb |
- |
bb |
b |
b |
adhi/begi |
- |
ab |
bb |
|
|
№7 |
bb |
- |
bb |
bdg / bdg |
bb |
ab |
- |
ab |
b |
b |
bdg/begi |
- |
b |
bb |
|
|
№8 |
ab |
- |
bb |
aeg/bdg |
bb |
bb |
- |
bb |
b |
b |
bdfi/begi |
- |
b |
bb |
|
|
№9 |
bb |
- |
ab |
bdg /bdg |
bb |
bb |
- |
bb |
b |
b |
adhi/begi |
- |
b |
bb |
|
|
№10 |
bb |
- |
bb |
bdg /bdg |
bb |
ab |
- |
ab |
b |
b |
bdfi/begi |
- |
b |
bb |
|
|
Таблица 10.- Определение отцовства у поросят
Пол, кличка и индивидуальный номер животного |
Антигены |
, Заключение |
||||||||||||
Аа |
Еа |
Eb |
Ej |
Ее |
Ef |
Fa |
Cb |
Hb |
Ka |
Kb |
La |
Отец |
Мать |
|
Св-ка Жемчужина 1028 |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
+ |
+ |
- |
- |
|
|
Хряк Быстрый 627 |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
- |
+ |
- |
+ |
|
|
Хряк Беркут 518 |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
|
|
Поросята |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
№1361 |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
|
|
№1362 |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
- |
- |
|
|
№1363 |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
- |
+ |
- |
+ |
|
|
№1364 |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
- |
- |
- |
|
|
№1365 |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
+ |
+ |
- |
- |
|
|
№1366 |
- |
+ |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
- |
+ |
- |
- |
|
|
№1367 |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
+ |
- |
- |
- |
|
|
№1368 |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
- |
+ |
- |
+ |
|
|
№1369 |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
+ |
+ |
- |
- |
|
|
№1370 |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
- |
- |
|
|
рожденного одной свиноматкой, удается достоверным образов выявить различия по оцениваемым признакам.
Задание 9. Свиноматка крупной белой породы Волшебницы 3510 осеменена спермой хряков Самсона 1773 и Секрета 1271. Установить отца у поросят по антигенам крови свиноматки и хряков («+» означает присутствие антигенов, отсутствие «–» антигенов). Данные в табл.11. У каких поросят отцом являете* хряк Самсон 1773, у каких - Секрет 1271? Какие антигены можно использовать для установления их отцовства?
Задание 10. Свиноматка крупной белой породы Тайга 572 был осеменена смешанной спермой трех хряков: Титана 1411, Веселой 1495, Рекорда 1449. Установить отца у поросят по антигенам крови свиноматки и хряков (табл.12). Определить, у каких поросят отцом является хряк Титан 1411, хряк Веселый 1495, Рекорд 1449? По каким антигенам устанавливается их отцовство?
Таблица 11 - Определение отцовства у поросят при осеменении свиноматки Волшебница 3510 смешанной спермой двух хряков
Пол, кличка и |
Антигены |
Заключение |
||||||||||||
номер животн. |
Аа |
Еа |
Е b |
El |
Ее |
Е f |
Fа |
С b |
Нb |
Ка |
Кb |
Lа |
Отец |
Мать |
Хряк Самсон 1773 |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
- |
+ |
- |
+ |
|
|
Хряк Секрет 1271 |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
|
|
Свиноматка Волшебница 3510 |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
- |
- |
- |
+ |
+ |
- |
- |
|
|
Поросята: |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
№1 |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
- |
- |
- |
|
|
№2 |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
+ |
- |
- |
|
|
№3 |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
- |
|
|
+ |
|
|
№4 |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
- |
- |
- |
|
|
№5 |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
+ |
+ |
- |
- |
|
|
№6 |
- |
+ |
- |
- |
* |
- |
- |
- |
- |
+ |
- |
- |
|
|
№7 |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
+ |
- |
- |
- |
|
|
Таблица 12 - Определение отцовства у поросят при осеменении свиноматки Тайги 572 смешанной спермой трех хряков
Пол, кличка и номер животного |
Антигены |
Заключение |
|||||
|
Аа |
Ка |
Kb |
Мс |
Fa |
Отец |
Мать |
Свиноматка Тайга 572 |
- |
+ |
- |
+ |
- |
|
|
Хряки: |
|
|
|
|
|
|
|
Титан 1411 |
+ |
- |
- |
+ |
- |
|
|
Веселый 1495 |
- |
+ |
- |
+ |
+ |
|
|
Рекорд 1449 |
- |
+ |
+ |
|
- |
|
|
Поросята: |
|
|
|
|
|
|
|
№1 |
- |
+ |
- |
- |
+ |
|
|
№2 |
+ |
- |
- |
- |
- |
|
|
№3 |
- |
+ |
+ |
- |
- |
|
|
№4 |
- |
+ |
- |
- |
+ |
|
|
№5 |
+ |
- |
- |
+ |
- |
|
|
№6 |
- |
- |
+ |
- |
- |
|
|
№7 |
+ |
+ |
- |
+ |
- |
|
|