1. Теоретическая часть:

1.1. Повторение и углубление теоретического материала по теме: « Водно- минеральный обмен»

1.2. Рассказ преподавателя.

2. Указания к занятию. Методические рекомендации.

0. 2.1.Внимательно изучите инструкцию.

1. 2.2.Приготовьте всё необходимое оборудование, реактивы для проведения анализа.

2. 2.3.Соблюдайте меры предосторожности при работе с биологическим материалом, реактивами; на спектрофотометре

3. 2.4. Осмыслите ход выполнения лабораторной работы

4. 2.5 В работе используйте параллельные пробы с целью самоконтроля за качеством работы

5. 2.6 Соблюдайте дезрежим, используя 0,5% раствор «Полидеза»

3.Практическая часть

0. Лабораторная работа №1. Определение общей железосвязывающей способности сыворотки крови с использованием основного карбоната магния.

Принцип метода:

В результате инкубации исследуемого образца с раствором, содержащим ионы Fe³⁺ происходит насыщение участков связывания железа на молекулах трансферрина. Избыток ионов Fe³⁺ удаляется адсорбцией на основном карбонате магния, после чего определяется концентрация ионов Fe³⁺ колориметрическим методом. Для проведения анализа необходим набор реагентов для определения концентрации ионов Fe³⁺

Оборудование. Реактивы. Исследуемый материал.

1. Спектрофотометр; центрифуга;

2. Набор реагентов «Абрис+» «ОЖСС»;

3. Набор реагентов «Био-Ла-Тест» «Железо»;

4. Центрифужные пробирки, штатив, дозатор объёмом 200мкл; пипетки градуированные объёмом 1,0 мл; 2,0 мл;

5. Дезраствор 0,5% р-р Полидеза;

6. Исследуемый материал: сыворотка крови или гепаринизированная плазма крови. Гемолиз недопустим!

Процедура анализа

Реагенты	Внести в центрифужную пробирку
Раствор железохлорного	200мкл (0,2мл)
Сыворотка крови	200мкл (0,2мл)

Смешать и инкубировать при температуре 18-25°С 25 минут с обязательным периодическим перемешиванием содержимого пробирок. По окончании инкубации пробы центрифугировать в течение 10 минут при 1500 об/мин.

Внести в пробирки	Опытная проба	Калибратор	Контроль
Супернатант	0,5 мл
Стандартный р-р (р-в №1)		0,5 мл
Дистиллированная вода			0,5 мл
Батофенантролин (р-в№2)	1,0 мл	1,0 мл	1,0 мл

Перемешать содержимое пробирок. Выдержать 5 минут. Измерить Е_оп и Е_кал против контрольной пробы.

Расчёт:

С (Fe³⁺) = 17,9 * Еоп

Екал

Где С_ст = 17.9 мкмоль/л.

При расчёте результата исследования учесть двукратное разведение пробы в процессе проведения анализа.

Референтные пределы: 44.8-76,1 мкмоль/л

Приложение №4

Закрепление знаний, умений и навыков