-
Указания к занятию. Методические рекомендации:
-
Внимательно изучите инструкцию.
-
Приготовьте необходимое оборудование и реактивы для исследования.
-
В работе используйте пипетки вместимостью 0,1-1,0 мл.
-
Соблюдайте дезинфекционный режим в работе.
-
-
Практическая часть.
3.1. Лабораторная работа: «Определение естественного (спонтанного) лизиса и ретракции фибринового сгустка».
ПРИНЦИП: При сокращении (ретракции, Р) и растворении фибринового сгустка (спонтанного фибринолиза, СФ) выделяется сыворотка, а форменные элементы выпадают в осадок. Зная гематокрит (соотношение объёма эритроцитов и плазмы крови) исследуемой крови и количество форменных элементов, выпавших из сгустка, рассчитывают СФ и Р в процентах.
Оборудование и реактивы:
-
Пробирки центифужные градуированные.
-
Пробирка с якорьком.
-
Термостат на 37°C, центрифуга.
-
Вата, спирт, шприц, жгут; дезинфицирующий раствор – 0,5% раствор Полидеза.
Материал для исследования: цельная кровь из вены.
Ход определения.
В сухую центрифужную градуированную пробирку набирают 2 мл крови из вены немедленно погружают в неё якорь (крючок из нержавеющей стали либо специальная стеклянная палочка). Пробирку помещают в термостат при 37°C на 2 ч, затем вынимают из термостата, осторожно удаляют прикрепившийся к якорьку сгусток, а пробирку центрифугируют 15 мин. при 1500 об/мин. для осаждения форменных элементов крови, выпавших в результате лизиса сгустка. Определяют, какой объём (мл) в пробирке занимают сыворотка (F2) и эритроциты (F3). Спонтанный фибринолиз и ретракцию рассчитывают по следующим формулам:
,
где F2 – объём сыворотки (мл) в 2 мл взятой крови; Vпл – объём плазмы, высчитанный по гематокриту (Vпл = 1 – гематокрит); 50 – расчёт на 100 мл плазмы.
Норма составляет 60-80%.
,
где F3 – объём форменных элементов (мл) на 2 мл крови; гематокрит – объём эритроцитов; 50 – расчёт на 100 мл плазмы.
Норма составляет 10-20%.
4. Закрепление знаний, умений и навыков.
4.1. Выполнение опытов и лабораторной работы.
4.2. Учёт результатов. Начальная интерпретация.
5. Контроль конечного уровня знаний, умений.
-
Оформление работы. Запись КДЗ.
Степень ретракции кровяного сгустка является показателем количества и функционального состояния тромбоцитов. Недостаточная ретракция наблюдается при выраженных тромбоцитопениях, некоторых видах качественной неполноценности тромбоцитов, избытке эритроцитов (эритроцитозы). Ложно завышенная ретракция наблюдается при анемиях и снижении гематокрита, а также при гипофибриногенемиях. Увеличение процесса лизиса фибринового сгустка свидетельствует об активности, а уменьшение – о торможении фибринолитической (плазминовой) системы крови. Активация ФАК наблюдается у больных в послеоперационном периоде, особенно при операциях на матке, лёгких, поджелудочной железе, предстательной железе, ожогах, шоковых состояниях, циррозах печени, злокачественных опухолях, действии ионизирующего излучения и др. Торможение ФАК является показателем риска тромбообразования. Снижается фибринолиз при атеросклерозе, гипертонической болезни, инфаркте миокарда, тромбоэмболических осложнениях и др.
5.2. Решение ситуационных задач.