Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Метод. указания Методы прижизн д-ки.doc
Скачиваний:
80
Добавлен:
28.09.2018
Размер:
119.3 Кб
Скачать

1. Метод нативного мазка.

Наиболее прост, но наименее эффективен. Он заключается в том, что берут 2-3 кусочка фекалий (с горошину), помещают на предметное стекло, разбавляют 2-3 каплями воды или смеси глицерина с водой (1:1). Затем грубые частички удаляют, а осадок исследуют под микроскопом. Глицерин просветляет препарат, что облегчает исследование и предохраняет препарат от быстрого высыхания. От одного животного одновременно рекомендуют готовить 2-3 препарата. Недостаток этого метода в том, что при слабой инвазии он дает большой процент отрицательных результатов. Данным методом можно исследовать фекалии на стронгилидоз, аскаридоз, фасциолез, трихоцефалез и другие.

2. Метод последовательного промывания (метод осаждения).

Небольшую порцию фекалии (5-10 гр.) смешивают с 10%-ым количеством воды. Смесь фильтруют через металлическое сито или марлю, отстаивают в течение 10 минут (в среднем), после чего слой жидкости сливают, а к осадку добавляют свежую порцию воды и снова дают отстояться 6-8 минут. И так делают до тех пор, пока верхний слой не станет прозрачным. Затем жидкость сливают, а осадок микроскопируют на наличие яиц. Данным методом диагностируют фасциолез и другие трематодозы.

3. Флотационные методы

Эти методы основаны на принципе флотации: всплытие вследствие низкой плотности яиц и личинок гельминтов на поверхность исследуемой взвеси при обработке пробы растворами различных солей. Для вылавливания всплывших яиц используют петлю из мягкой проволоки с диаметром кольца 2-10 мм. При меньшем диаметре затрудняется сбрасывание капли на предметное стекло, а при большем - пленка в кольце разрывается. Целесообразно брать с поверхности от 3 до 6 капель в зависимости от величины покровного стекла. Если же поставлена цель - обнаружить яйца, то исследуют поверхностный слой капель без покровного стекла.

В настоящее время для флотации предложено большое количество насыщенных растворов солей: хлорид натрия (поваренная соль) плотностью 1,18-1,20 (400г на 1л воды), нитрат аммония (гранулированная или химически чистая аммиачная селитра) плотностью 1,3 (1500г на 1л воды), нитрат свинца (азотнокислый свинец) плотностью 1,5 (6550 г на 1 л воды), нитрат натрия (натриевая селитра) плотностью 1,38-1,4 (100 г на 1 л воды), тиосульфат натрия плотностью 1,4 (1750 г на 1 л воды), хлорид цинка плотностью 1,82 (2000 г на 1 л горячей воды), сульфат магния (английская соль) плотностью 1,26-1,28 (920 г на 1 л воды).

Наилучшей флотационной способностью обладают растворы при t 20-22˚ С.

Методами флотации следует пользоваться для диагностике нематодозов и аноплоцефалезов. При наличие соответствующих солевых растворов с высокой плотностью можно диагностировать и трематодозы.

Метод Фюллеборна.

5-8 грамм (можно 10-20 г) фекалий в стаканчик или фарфоровую ступку и заливают небольшим количеством насыщенного раствора поваренной соли. После тщательного растворения фекалий в смесь доливают 150-200 мл. раствора и процеживают через сито в сухой и чистый стакан размешивая стеклянной палочкой. Взвесь отстаивают 10-15 мин. Затем с поверхности отстоявшейся жидкости с помощью металлической петли снимают пленку, переносят ее на предметное стекло для микроскопирования.

Метод Фюллеборна рекомендуют применять главным образом для обнаружения яиц круглых гельминтов (аскарид, стронгилид, трихоцефалят и других) и частично для ленточных червей (тений, аноплоцефалид).

Метод Дарлинга.

Этот метод сочетает процедуры осаждения и флотации. Фекалии смешивают с водой до полужидкой консистенции и центрифугируют 3-5 мин., вследствие чего яйца гельминтов осаждаются на дно. Верхний слой жидкости сливают, а к осадку добавляют жидкость Дарлинга (глицерин, смешанный в равных частях с насыщенным раствором поваренной соли). И уже после этого яйца паразитических червей из осадка всплывают на поверхность. Металлической петлей пленку снимают на предметное стекло, накрывают покровным и исследуют. Применяют при диагностике кишечных нематодозов.

Соседние файлы в предмете Паразитология животных