- •Цитохимические исследования лейкоцитов
- •35 Мл буферного раствора.
- •Метод азосочетания (модификация м. Г. Шу-
- •130 Активность фермента высокая при остром миелобластном лейкозе, слабая — при остром монобластном и отсутствует — при остром лимфобластном лейкозе.
- •Кислая а-нафтилацетат-эстераза.
- •40 Мл буферного раствора (реактив № 2); встря-
- •Нафтол-as d-хлорацетат-эстера-
- •Пероксидаза (миелопероксида-
- •Фетальный гемоглобин. Метод Ветке.
- •37 °С в течение 30 мин цитратно-фосфатный
- •Эритроцитов (соэ).
- •Унифицированный микрометод Панченкова
- •1/4 (До метки 0,75).
Фетальный гемоглобин. Метод Ветке.
П р и н ц и п . Элюция гемоглобина кислотой с
докраской мазков дает возможность отличить
эритроциты, содержащие фетальный гемогло-
бин, по сохраненной окраске в отличие от обес-
цвеченных эритроцитов, содержащих гемогло-
бин А.
Р е а к т и в ы . 1. Цитратно-фосфатный бу-
фер (рН 3,2): 24,7 мл 0,2 М раствора Na2HPO4
(35,6 г Na2HPO4 • 2Н2О и до 1 л дистиллирован-
ной воды) и 75,3 мл 0,1 М раствора лимонной
кислоты (21,01 г лимонной кислоты и до 1 л ди-
стиллированной воды). 2. 1 % раствор метило-
вого фиолетового или 1 % раствор эозина. Луч-
шие результаты дает докраска метиловым фио-
летовым. 3. Этиловый спирт 80 %.
С п е ц и а л ь н о е о б о р у д о в а н и е . 1 .
Микроскоп. 2. Термостат на 37 °С.
Х о д о п р е д е л е н и я . Фиксируют мазки
крови в 80 % этиловом спирте 5 мин. Промы-
вают дистиллированной водой и высушивают.
Погружают мазки на 5 мин в прогретый при
37 °С в течение 30 мин цитратно-фосфатный
буфер (для элюции гемоглобина), периодически
помешивая раствор стеклянной палочкой для
удаления пузырьков воздуха. Ополаскивают
мазки дистиллированной водой, высушивают
фильтровальной бумагой. Докрашивают реакти-
вом 2 в течение 2—3 мин. Промывают дистил-
лированной водой и высушивают.
Н о р м а л ь н ы е в е л и ч и н ы . У взрослых
встречаются единичные окрашенные эритроциты
(содержащие гемоглобин F); увеличение числа
окрашенных эритроцитов наблюдается у ново-
рожденных и детей до 5-месячного возраста.
К л и н и ч е с к о е з н а ч е н и е . Увеличе-
ние числа эритроцитов с гемоглобином F наблю-
дается у больных талассемией, особенно при
гомозиготной форме.
Активность Г-6-ФД (К.Ф.1.1.1.49). П р и н -
ц и п . Окисление глюкозо-6-фосфата в присут-
ствии Г-6-ФД при участии NADP, который
восстанавливается в NADP-H; под влиянием
последнего тетразолий выявляется в виде гра-
нул формазана.
Р е а к т и в ы . 1. 10% раствор формалина.
2. Инкубационная среда: глюкозо-6-фосфат —
3 мг в 1 мл, NADP — 1 мг в 1 мл, магния
хлорид — 0,1 М в 0,2 мл, нитросиний тетразо-
лий — 1 мг в 1 мл, трис-буфер 0,25 М (рН 7,6) — 2,3 мл, феназин-метасульфат — 0,5 мл.
С п е ц и а л ь н о е о б о р у д о в а н и е .
1. Термостат на 37 °С. 2. Микроскоп.
Х о д и с с л е д о в а н и я . На нефиксиро-
ванные мазки крови наносят 0,1—0,2 мл инку-
бационной среды и помещают мазки в гори-
зонтальном положении в термостат на 1 ч
15 мин. Фиксируют в 10 % растворе формалина
10 мин при комнатной температуре. Высушива-
ют на воздухе и микроскопируют.
Н о р м а л ь н ы е в е л и ч и н ы . В эритро-
цитах обнаруживают 10—20 гранул формазана.
К л и н и ч е с к о е з н а ч е н и е . Снижение
числа гранул формазана в эритроцитах или их
отсутствие указывает на дефицит Г-6-ФД.
3.3.10. Скорость оседания
Эритроцитов (соэ).
Исследование СОЭ является одним из самых
распространенных в лабораторной практике и
входит в состав общего клинического анализа
крови. Кроме того, нередко проводится одновре-
менно с определением концентрации гемоглоби-
на и количества лейкоцитов в крови при про-
филактических осмотрах.