- •Предисловие
- •I. Краткие сведения об инфекции и иммунитете
- •II. Бактерийные препараты и химиотерапевтиче- ские средства, применяемые в ветеринарной практике
- •Вакцины
- •Вакцины, изготовленные из ослабленных живых (матриксов) культур
- •Вакцины, изготовленные из культур, убитых формалином
- •Вирусы. Используемые для вакцинации
- •Иммунные сыворотки, применяемые для серотерапии и серопрофилактики
- •Средства, применяемые для диагностической цели
- •Препараты, применяемые для диагностических реакций на животных
- •Препараты, применяемые для лабораторных диагностических реакций
- •Химиотерапевтические препараты
- •III. Хранение и транспортировка прививочных средств
- •IV.Инструментарий, применяемый при прививках
- •V. Организация и техника проведения прививок организация прививок
- •Фиксация животных
- •Подготовка препаратов и инструментария
- •Способ введения препаратов
- •VI. Предохранительные, лечебные и вынужденные прививки
- •1. Прививки против сибирской язвы
- •Предохранительные прививки
- •Вынужденные прививки
- •Комбинационные прививки
- •Пассивные прививки
- •Возможные осложнения при прнпивках
- •Учёт результатов прививок
- •Производство прививок против сибирской язвы северным оленям
- •2. Прививки против эмфизематозного (шумящего) карбункула
- •3. Прививки против паратифа и колибациллеза телят
- •4. Прививки против рожи свиней
- •Способ применения
- •Возможные осложнения после прививки
- •Учет результатов
- •5. Прививки против паратифа поросят
- •6. Прививки против дизентерии ягнят
- •7. Прививки против столбняка
- •8. Прививки против геморрагической септицемии сельскохозяйственных животных и холеры птиц
- •9. Прививки при мыте лошадей
- •10. Прививки против чумы свиней
- •11. Прививки против оспы овец
- •12. Прививки против чумы крупного рогатого скота
- •13. Прививка против бешенства
- •14. Прививки крупного рогатого скота против перипневмонии
- •15. Прививки против оспы-дифтерита птиц
- •VII. Аллергические реакции у животных
- •1. Диагностика туберкулёза у крупного рогатого скота. Свиней и птиц
- •Внутрикожная нроба у крупного рогатого скота
- •Внутрикожная туберкулинизация у свиней
- •Глазная туберкулинизация
- •Подкожная туберкулинизация
- •Диагностика туберкулёза птиц с помощью туберкулина
- •2. Диагностика сапа у однокопытных животных с помощью маллеина
- •Глазная маллеинизация
- •Подкожная маллеинизация
- •3. Диагностика бруцеллёза у овец и коз с помощью бруцеллизата
- •4. Диагностика бруцеллёза у крупного рогатого скота с помощью абортина
- •VIII. Серологические методы лабораторной диагностики
- •1. Методика постановки реакции преципитации на сибирскую язву
- •2. Методика постановки реакции агглютинации (реакции райта) на бруцеллёз сельскохозяйственных животных
- •8. Методика постановки реакции агглютинации при инфекционном аборте лошадей
- •4. Методика постановки реакции агглютинации со свежей каплей крови при диагностике бациллоносителей белого поноса у кур
- •5. Методика постановки реакции связывания комплемента при бруцеллезе
- •Компоненты реакции
- •Титрация компонентов реакции
- •Титрация гемолизина
- •Титрация комплемента в гемолитической системе
- •Титрация комплемента в бактериологической системе
- •Титрация бруцеллёзного антигена
- •Примерный результат реакции
- •Главный опыт
- •Оценка результатов реакции
- •6. Методика постановки реакции связывания комплемента при сапе
- •Компоненты реакции
- •Титрация компонентов реакции
- •Титра ция гемолизина
- •Титрация комплемента в гемолитической системе
- •Титрация комплемента в бактериологической системе
- •Разведение комплемента для главного опыта
- •Главный опыт
- •Титрация сапного антигена
- •7. Методика постановки рск при перипневмонии крупного рогатого скота
- •Титрация компонентов реакции
- •Титрация комплемента в гемолитической системе
- •Титрация комплемента в бактериологической системе
- •Разведение комплемента для главного опыта
- •Титрация антигена
- •Главный опыт
- •Учёт реакции
- •8. Методика постановки реакции связывания комплемента при случной болезни
- •Титрация компонентов реакции
- •Титрация гемолизина
- •Титрация комплемента в гемолигической системе
- •Подтитровка комплемента на сыворотках
- •Разведение комплемента в установленном титре
- •Главный опыт
- •Титрация трипанозомного антигена
- •IX. Применение химиотерапевтических препаратов
- •1.Применение наганина
- •Техника приготовления раствора наганина
- •Техника введения раствора
- •Применение наганина с профилактической целью
- •Применение наганина с лечебной целью
- •Терапия осложнений после лечения
- •2. Применение новарсенола
- •3. Применение, флавакридина (трипафлавина, акрифлавина. Эифлавина)
- •Способ применения и возможные осложнения
- •4. Применение трипанблау (трипансинь)
- •Признаки побочного действия трипанблау
- •Профилактическое применение трипанблау
- •Лечебное применение трипанблау
- •Техника приготовления растворов
- •5. Применение альбаргина
- •6. Применение новоплазмина (лп4)
- •7. Применение сульфантрола (сульфамид - с55)
- •8. Применение пироплазмина (акаприн)
- •Содержание
- •Справочная таблица по проведению прививок
- •Применение химиотерапевтических препаратов при протозойных заболеваниях сельскохозяйственных животных
VIII. Серологические методы лабораторной диагностики
Серологические методы лабораторной диагностики многих инфекционных заболеваний основаны на принципах иммунитета. В понятие-иммунитет входит не только представление о невосприимчивости к повторному заражению после перенесённой болезни, но и представление о наступающих в крови изменениях, которые вызываются реакцией организма на попадающий в него антиген в виде образования соответствующих антител.
Одними из первых изученных антител были агглютинины. Свойство их заключается в следующем: если в животный организм вводить каких-либо микробов, то сыворотка крови получает способность, даже будучи разведённой во много раз, склеивать этих микробов. Такое явление объясняется наличием в сыворотке крови агглютининов. Антиген, вызывающий появление в крови агглютининов, носит название агглютиногена.
Если иммунизировать кролика отмытыми эритроцитами барана или другими клеточными элементами и к разведённой во много раз сыворотке подготовленного таким образом кролика прибавить эритроциты барана, то получится полное растворение этих эритроцитов. Такое свойство обусловливается появлением в крови кролика после обработки его клеточными элементами так называемых гемолизинов—веществ растворяющих эритроциты. Подобные явления получаются при иммунизации животного бактериями: в крови его образуются соответствующие лизины (бактериолизины и т. д.).
Далее, если иммунизировать животное чуждым для него раствором белка животного или растительного происхождения, то сыворотка подготовляемого животного получает особое свойство: если на такую сыворотку наслоить раствор того белка, который получило животное, даже в больших разведениях, то на границе двух соприкасающихся жидкостей получается колечко осадка—преципитат. Появление этого преципитата зависит от наличия в сыворотке так называемого лреципитина. Белок, который вызвал появление преципитииов в организме кроликов, называется преципнтиногеном.
Агглютинины, гемолизины, бактериолизины и другие вещества, образующиеся в крови животного, являются одними из многих веществ, появляющихся в результате соприкосновения организма с инфекционным началом. Наличие их в крови улавливается соответствующими диагностическими реактивами. Некоторые реактивы нашли своё практическое применение при диагностике отдельных инфекционных заболеваний животных.
В настоящем справочнике мы даём описание методов серологических реакций, применяемых в лабораторной практике при диагностике некоторых инфекционных заболеваний.
1. Методика постановки реакции преципитации на сибирскую язву
Реакцию преципитации применяют для диагностики сибирской язвы как при исследовании кожевенного сырья в лабораториях Асколи, так и в диагностических бактериологических лабораториях, как подсобную реакцию при бактериологических исследованиях на сибирскую язву.
Исследование кожевенного сырья на сибирскую язву при помощи реакции преципитации ведут холодным способом после предварительной стерилизации взятых проб. Доставленные в лабораторию пробы стерилизуют в автоклаве при 11/2 атмосферах в течение получаса или при 1 атмосфере в течение одного часа. После стерилизаций пробы охлаждают и затем измельчают. Измельчённые пробы должны быть весом не менее 1 г. Нумерация банок должна соответствовать номерам проб.
Экстрагирование проб производят холодным способом в материальных банках ёмкостью до 50 г.
Пробы от свиных шкур экстрагируют горячим способом в пробирках на водяной бане при кипячении в течение 30 минут.
Экстрагирующая жидкость разливается в отношении 1 : 10. В качестве экстрагирующей жидкости берут физиологический раствор (0,85% очищенной поваренной соли), к которому добавляют 0,3 о/о кристаллической карболовой кислоты для предотвращения роста бактерий и получения легко фильтруемых, прозрачных экстрактов. Лучшая температура для экстрагирования 8—14° С. Добавление карболовой кислоты особенно необходимо при температуре помещения от 14 до 20°С. Продолжительность экстрагирования—от 16 до 20 часов.
Экстракты фильтруют через воронки в укороченные бактериологические пробирки. В качестве фильтра употребляют асбестовую вату (нейтральную). Экстракты после фильтрации должны быть прозрачны. Если полученный фильтрат мутный, то допускается вторичная фильтрация экстрактов. При этом первую порцию второго фильтрата, который может содержать малое количество преципигиногена, выбрасывают.
Порядок применения сыворотки. Перед употреблением сыворотка должна быть проконтролирована посредством стандартного антигена и экстракта из заведомо сибиреязвенного материала (желателен материал такого же рода, как подвергаемый исследованию). Сыворотка должна давать ясно положительную реакцию через 30 секунд (до 1 минуты) со стандартным антигеном и до 5 минут—с экстрактом из заведомо сибиреязвенной кожи.
Лаборатории, применяющие преципитирующую сибиреязвенную сыворотку, должны иметь в своём распоряжении не менее 2—3 различных серий для взаимного контроля. Кожи, давшие положительную или сомнительную реакции на сибирскую язву, должны быть повторно экстрагированы и проверены повторно с двумя—тремя различными сериями сывороток. Сыворотка, употребляемая для реакции, должна быть прозрачной. Из фладсонов, с хорошо отстоявшейся сывороткой, возможно применение её без предварительного филь-трования при условии осторожного насасывания, без взбалтывания осадка на дне флакона. Сыворотки, имеющие муть даже после фильтрования через асбест, не должны применяться. Нельзя также применять сыворотки непосредственно после транспортировки или взбал-тывания их. В таких случаях сыворотке нужно дать отстояться не менее 10—15 дней, так как фильтрование не даёт той прозрачности, какая достигается путём отстоя. Сыворотка должна транспортироваться в тёплое время года (с 1 апреля по 1 ноября). В зимнее время сыворотку следует пережить в условиях, исключающих замораживание (в тёплом вагоне), так как тёплая упаковка {вата, войлок) не гарантируют от замораживания.
Соединение компонентов. Компоненты при реакции преципитации соединяют наслаиванием профильтрованных прозрачных экстрактов на разлитую и проконтролированную преципитирующую сыворотку. Сыворотку и экстракт для реакции берут по 0,25—0,3 см3. Можно наслаивать экстракт на разлитую сыворотку или подслаивать сыворотку под экстракт пастеровской пипеткой. Реакцию учитывают в зависимости от активности преципитирующей сыворотки в течение 10—15 минут. Реакцию с экстрактами из мокросолёного и сухосолёного сырья учитывают в течение 20 минут.
Диагностическую оценку реакции производят при проходящем свете на чёрном фоне. В тех пробирках, где граница между, сывороткой и экстрактами нерезко выражена, реакцию не учитывают и ставят вновь с тем же экстрактом.
Если материал был сибиреязвенным, то на месте соприкосновения экстракта с сывороткой через 1—15 минут появляется различной резкости серовато-белый диск (кольцо).
При сомнительных реакциях исследование повторяют. В тех случаях, когда вторично получается сомнительная реакция, исследуемая кожа считается сибиреязвенной.
Вся посуда для реакции преципитации должна быть чистой, прозрачной. Посуду промывают в тёплой солёной (1—2 о/о поваренной соли) воде при помощи волосяных ершей и щёток с последующим промыванием в чистой воде. Улелгутовские пробирки промывают в дестиллированной воде. После мытья посуду просушивают.
Ежедневно перед началом работы ставят следующие контроли:
а) преципитирующие сыворотки и стандартный антиген или экстракт из заведомо сибиреязвенной кожи (реакция положительная);
б) преципитирующие сыворотки и экстракт из заведомо здоровой кожи (реакция отрицательная);
в) нормальная сыворотка и экстракт из заведомо сибиреязвенной кожи или стандартный антиген (реакция отрицательная);
г) преципитирующая сыворотка и экстрагирующая жидкость (реакция отрицательная).
При исследовании методами преципитации лаборатория должна сообщить о положительных реакциях старшему районному (городскому) ветеринарному врачу, в район, откуда материал поступил на исследование.