9.5. Извлечение эмбрионов

Эмбрионы извлекают хирургическим и нехирургическим путем.

Хирургический путь – это извлечение эмбрионов через разрез брюшной стенки в области голодной ямки. Применяются

- 172 -

и другие оперативные доступы: через разрез по белой линии живота, через верхний свод влагалища.

Независимо от оперативного доступа матку подтягивают к операционной ране, делают небольшой разрез стенки одного из рогов вблизи тела матки, через него вставляют катетер Фоллея и продвигают к верхушке рога. В баллончик-манжету катетера Фоллея нагнетают 20-30 см³ воздуха и таким образом отграни­чивают промывную полость передней части рога. Далее к кате­теру присоединяют шприц и через него подают в верхушку рога подогретую до 37°С промывную жидкость. Вытекающую через катетер Фоллея жидкость собирают в стерильный флакон и пе­реносят в лабораторию. Так же поступают и со вторым рогом.

Для нехирургического извлечения эмбрионов лучший срок – 7-8-е сутки (отсчет ведут от первого осеменения).

Для расслабления канала шейки матки и снятия напряже­ния прямой кишки делают низкую эпидуральную анестезию: вводят 5 мл 2%-ного раствора новокаина. Строптивым живот­ным инъецируют миорелаксант (ромпун или рометар).

Вымывание проводят при помощи резинового катетера Фоллея с приспособлением в виде надувного резинового балло­на для фиксации его в роге матки. При подготовке к работе ка­тетер Фоллея стерилизуют 70%-ным спиртом-ректификатом, а внутрь его вставляют стальной стилет.

Левую руку вводят в прямую кишку и освобождают ее от фекалий. Катетер вместе со стилетом, заключенным в санитар­ный чехол, направляют в наружное отверстие канала шейки матки и расчехляют. Ладонью левой руки захватывают шейку и, поворачивая ее влево-вправо, натягивают на катетер, после чего катетер направляют в один из рогов. Как только верхушка кате­тера достигнет середины рога, дальнейшее его продвижение осуществляют по мере извлечения стилета. Убедившись в том, что конец катетера находится вблизи верхушки рога, а баллон – впереди бифуркации, стилет полностью вынимают из катетера. При помощи 20-граммового шприца баллон заполняют возду­хом в объеме 10-15 см³, что обеспечивает фиксацию катетера с одновременной изоляцией промывной полости, ограниченной передним участком рога матки. Далее к катетеру присоединяют специальный шприц объемом 50-60 мл и медленно вводят в рог

- 173 -

матки 40-50 мл фосфатного буфера Дюльбекко, содержащего 1%-ную инактивированную сыворотку крови новорожденного теленка. Рог матки осторожно поглаживают, чтобы отделить эмбрионы от стенок матки.

Промывную жидкость отсасывают шприцем и собирают в стерильный флакон. Вымывание повторяют 4-6 раз, расходуя 200-400 мл физиологической среды. Катетер переводят в другой рог, и манипуляции по вымыванию эмбрионов повторяют. Про­цедура вымывания эмбрионов обычно длится 20-50 минут.

Степень извлечения эмбрионов этим методом составляет 56-80%.

9.6. Поиск и оценка качества эмбрионов

Промывную жидкость отстаивают в термостате при 37°С в течение 30-40 минут. Затем верхний слой жидкости отсасыва­ют. Нижний слой объемом 100 мл разливают в 2-3 пластмассо­вые чашки Петри диаметром 100 мм с расчерченным на полосы или квадраты дном и ведут поиск эмбрионов под стереоскопи­ческим микроскопом МБС-10 при 25-кратном увеличении. Об­наруженные эмбрионы забирают автоматической пипеткой и переносят в чашку Петри диаметром 40 мм или на часовое стек­ло с небольшим объемом физиологической среды.

Точная оценка эмбрионов важна для прогнозирования ре­зультатов пересадки и отбора, на пригодность к заморажива­нию. Ее проводят под инвертированным микроскопом при уве­личении в 50 раз. При этом определяют стадию развития эм­бриона, категорию качества.

Различают четыре категории качества: отличное, хорошее, удовлетворительное, плохое. Для пересадки используют эм­брионы отличного и хорошего качества.