МЕТОДИЧЕСКАЯ РАЗРАБОТКА №15

ТЕМА: Иммунопрофилактика, иммунотерапия, иммунокоррекция. Вакцины, иммунные сыворотки. Методы и средства интра- и экстракорпоральной иммунокоррекции. Иммунная инженерия.

МОТИВАЦИОННАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА: Специфическая иммунотерапия, иммунопрофилактика и иммунокоррекция занимают важное место в общей системе противоэпидемических мероприятий. Эффективность применения лечебно-профилактических препаратов зависит как от реактивных сил организма, так и от качества препаратов.

Данное занятие знакомит студентов с физиологическими законами вакцинации, видами вакцин, техникой их приготовления, способам их введения, возможными осложнениями при их применении.

Тема знакомит с иммунными сыворотками, их получением и назначением, применением генно-иммунной инженерии, иммунокоррекцией (назначение, средства и методы).

УЧЕБНАЯ ЦЕЛЬ:

Изучить место и значение учения об иммунитете в общей системе противоэпидемических и лечебных мероприятий.

Научить методам приготовления вакцин, анатоксинов, лечебно-профилактических и диагностических иммунных сывороток, методам их введения.

Ознакомить со средствами экстра и интракорпоральной иммунокоррекции.

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ ПОДГОТОВКИ И ВВОДНОГО

КОНТРОЛЯ ЗНАНИЙ:

1. Понятие об иммунотерапии, иммунопрофилактике, иммунокоррекции.

2. Вклад отечественных ученых в развитие иммунопрофилактики.

3. Вакцины. Классификация, назначение (профилактическое, лечебное).

4. Вакцины. Методы приготовления, контроль качества, назначение «убитая вакцина, анатоксин».

5. Живые вакцины, аттенуация, назначение, способы.

6. Физиологические законы вакцинации.

7. Перспективы развития вакцинологии.

8. Иммунные сыворотки. Классификация. Методы получения, оценка, применение.

9. Возможные осложнения при применении иммунных препаратов.

10. Иммуномодуляторы. Классификация. Механизм действия. Область, показания, и время применения.

11. Понятие об экстра- и интракорпоральной иммунокоррекции, показания к их применению. Биостимуляторы общего действия.

12. Перспективы дальнейшего совершенствования препаратов для иммунопрофилактики, иммунотерапии и иммунокоррекции.

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ВЫПОЛНЕНИЮ ПРАКТИЧЕСКОЙ РАБОТЫ С ПОЛНЫМ РЕГЛАМЕНТОМ ПРОТОКОЛА ЗАНЯТИЯ И ЕГО ОФОРМЛЕНИЕМ

№	Наименование учебного элемента (задания)	Методическое решение	Регламент протокола
1.	Вводный контроль исходных знаний	Согласно перечня вопросов для подготовки	В протокол дома записать сложные схемы, таблицы
2.	Классификация вакцин	Приложение 1	Дополнить, занести в протокол
3.	Общая схема и принципы приготовления убитых вакцин	Приложение 2	Занести в протокол
4.	Приготовление убитой вакцины	Приложение 3	Занести в протокол
5.	Приготовление вакцины анатоксина	Приложение 4	Занести в протокол
6.	Живые вакцины тканевые, бактериальные	Приложение 5	Занести в протокол
7.	Физиологические законы вакцинации: а) профилактический б) лечебной	Приложение 6	Занести в протокол
8.	Приготовление иммунных сывороток	Приложение 7, 8	Занести в протокол
9.	Диагностические, лечебно-профилактические сыворотки	Приложение 9,10	Занести в протокол
10.	Основные иммуномодуляторы	Приложение 11	Занести в протокол
11.	Тестовый контроль усвоения материала	Приложение 12	Сложное записать.

Приложение 1

Классификация вакцин

№	Вид вакцин	Сырьевая основа	Пример
1.	Убитые вакцины	Бактерии
2.	Живые аттенуированные	Бактерии
3.	Анатоксины	Бактерии
4.	Полные антигены	Токсин
5.	Ассоциированные вакцины	Антигенные
6.	Синтетические	Экстракты
7.	Моно – и поливакцины	Полимерные
8.	Аутовакцины	Изоляты
9.	Тканевые вакцины (вирусные)	Вирусы
10.	Поливалентные вакцины	Бактерии, вирусы

Приложение 2

Общая схема приготовления убитых (нежизнеспособных) вакцин

1.Отбор вакцинных штаммов, контроль их соответствия таксономической принадлежности по всем параметрам.

2. Внесение микробного материала (штамма, экзотоксина).

3. Приготовление маточной взвеси и ее стандартизация по оптическим (бактериальным) стандартам мутности.

4. Инактивация маточной взвеси разными методами (физическим, химическим, биологическим).

5. Контроль соответствия требованиям к убитым вакцинам.

а) стерильность

б) отсутствие микробных загрязнений

в) антигенность

г) митогенность

д) пирогенность

з) аллергенность

6. Расфасовка и этикетировка:

Указываются

а) дата и место изготовления

б) серия

в) контрольный номер

г) срок годности и условия хранения.

Приложение 3

Приготовление убитых вакцин

1.Отобрать штамм. Проверить морфо тинкториальные свойства в мазках, окрашенных по Граму, изучают его культурально – биохимические особенности, антигенную структуру, их соответствие таксономии и характеристике вида.

2. Засеять культуру штамма на поверхность косячка или материала МПА. Поставить в термостат при +37 С⁰на 18-24 часа для получения массивного роста.

3. Смыть выросшую культуру стерильным 0,05 % изотонического раствором, получить маточную взвесь.

4. Маточную взвесь инактивировать одним из методов:

а) гретая - термовакцина

б) 0,25% раствора формалина – формалвакцина

в) ультразвуком – ультразвуковая вакцина.

5. Проверить стерильность инактивированной взвеси путем высева на МПА и контроля посевов.

6. Провести стандартизацию маточной взвеси, используя оптический стандарт мутности ГИСК 1 млрд.мт/мл и прилагающийся к нему стандартный шрифт. Для этого:

- в широкую чистую сухую пробирку диаметром, равным диаметру пробирки или ампулы стандарта мутности, внести 1 мл маточной взвеси;

- мерно добавить к ней в пробирку 0,5% изотонический раствор поваренной соли до получения мутности, идентичной стандарту;

- рассчитать количество микробных тел в 1 мл исходной маточной взвеси с учетом разведения, использованного для получения заданной мутности в опытной пробирке, одинаковой со стандартной мутностью. Например, для получения взвеси 1млрд мт/1мл пошло 2 мл изотонического раствора. Следовательно, исходная густота взвеси была в 3 раза больше, - 3 млрд. мт в 1 мл.

7. Приготовить вакцину с концентрацией 3 млрд. м.т. в 1мл, разбавив маточную взвесь в 3 раза стерильным изотоническим раствором;

8. Провести контроль вакцины на ее соответствие требованиям к готовому препарату:

- повторно после разведения проверить стерильность вакцины на МПА. При наличии роста вакцину повторно инактивировать;

- установить антигенность на кроликах путем их 3-х кратных прививок в ушную вену с недельным интервалом, последующего взятия крови, постановки с ее сывороткой РА и определения титра AT;

- проверка специфичности образовавшихся AT в РА на стекле или развернутом варианте;

- установить иммуногенность вакцины, то есть ее защитную активность на мышах: после 3-х кратной вакцинации животные заражаются 1 DLM исходного живого штамма. При высокой иммуногенности вакцина сохра­няет в живых не менее 2/3 из 30 особей;

- проверка пирогенности на кроликах 1-кратным внутривенным или подкожным введением вакцины с многократным ректальным замером температуры тела животного. Пирогенность должна быть не выше умеренной; (+37,5 С⁰);

- контроль реактогенности на здоровых людях должен быть либо отрицательным, либо местным умеренным.

Варианты убитых вакцин:

1. Стафилококковая

2. Гонококковая.

3. Холерная.

4. Тифозно-паратифозно-столбнячная.

5. Коклюшно- дифтерийно -столбнячная /АКДС/.

6. Дифтерийно-столбнячная /АДС/.

7. Дизентерийная.

8. Против клещевого энцефалита.

9. Лептоспирозная.

Приложение 4