Радиоиммунный метод (рим)

Сущность метода:метод позволяет в любом биологическом субстрате (моче, крови и т.д.) определять ничтожно малые концентрации растворимых антигенов, продукты метаболизма микроорганизмов, гормоны и пр. на основе конкуренции с радиоактивным антигеном.

Этапы постановки реакции

1. Стандартное количество антигена, идентичного меченому радиоактивной меткой (например, I¹²³,I¹³¹, либо другими изотопами) антигену, наливают в пробирку.

2. Добавляют стандартное количество иммунной сыворотки, специфичной антигену. 70- 80% меченного антигена связывается при этом с антителами, образуя радиоактивный преципитат.

3. Добавляют субстрат, исследуемый на присутствие предполагаемого антигена. Если в субстрате есть антиген, идентичный меченному, то он конкурирует с ним, отнимая антитела. Радиоактивность преципитат при этом снижается.

Чем больше в субстрате антигена, тем меньше радиоактивность преципитата.

Приложение 12

Тестовыи контроль усвоения темы

1. Для постановки реакции агглютинации с целью серодиагностики необходимо:

а) эритроцитарный диагностикум

б) испытуемая сыворотка

в) комплемент

2. Для постановки РНГА с целью серодиагностики необходимо:

а) типовые иммунные сыворотки

б) эритроцитарный диагностикум

в) комплемент

3. Для постановки реакции агглютинации с целью серотипирования выделенной культуры необходимо:

а) диагностикум

б) эритроциты барана

в) типовые иммунные сыворотки

4. Подберите необходимое для развёрнутой РА:

а) физиологический раствор

б) пробирки

в) пипетки

г) иммунологический планшет с лунками

л) испытуемая сыворотка

е) диагностикум

ж) все выше перечисленное

5. В РА участвуют антигены:

а) растворимые

б) корпускулярные

6. Для поиска антигена в РИФ необходимо:

а) культура

б) испытуемая сыворотка

в) меченая ФИТЦ сыворотка, содержащая антитела к иммуноглобулинам человека

г) иммунная сыворотка

7. Для поиска антител в РНИФ используется все, кроме:

а) антиген

б) испытуемая сыворотка

в) меченая ФИТЦ сыворотка, содержащая антитела к иммуноглобулинам человека

г) иммунная сыворотка

8. Выбрать необходимый компонент для р. Хеддльсона:

а) дистиллированная вода

б) люминесцентный микроскоп

в) цельная кровь из пальца

г) окрашенный метиленовой синью бруцеллезный диагностикум

д) меченые флюорохромом антителпа

9. Выбрать необходимый компонент для р. Минкевича:

а) фотопластина (отмытая, сухая)

б) люминесцентный микроскоп

в) цельная кровь из пальца

г) окрашенный метиленовой синью бруцеллезный диагностикум

д) меченые флюорохромом антитела

10. В какой иммунологической реакции наличие антител регистрируют по прекращению подвижности возбудителя болезни?

а) РА

б) РНГА

в) РНИФ

г) РИФ

д) РТГА

е) РИТ

11. Как исключить групповую РА:

а) повторить РА через 3-4 дня по нарастанию титра

б) поставить РА по Кастеллани

в) заменить физиологический раствор в РА на гипертонический по Фишеру

г) по титру РА с разными антигенами

12. Как уточнить диагноз болезни с помощью иммунологической реакции:

а) повторить реакцию через 3-4 дня - по нарастанию титра

б) поставить РА по Кастеллани

в) заменить физиологический раствор в РА на дистиллированную воду

13. Развёрнутая реакция Видаля, поставленная в 3-х рядах с сывороткой крови больного тифо-паратифозной инфекцией, дала такие результаты:

Iряд – О-АГ возбудителя брюшного тифа 1 : 4ОО;

IIряд – Н-АГ брюшного тифа 1 : 2ОО;

III ряд – АГ возбудителя паратифа А - 1: 50

IVряд - АГ возбудителя паратифа В - 1: 50.

Дать заключение:

а) разгар заболевания

б) инкубационный период

в) период реконвалесценции

14. Какая из перечисленных реакций не относится к иммунологическим?

а) РА

б) РТГадс

в) РГадс

15. Какую реакцию следует отнести к ускоренно - ориентировочной?

а) РИФ

б) РНГА

в) РИТ

г) серотипирование в РА на стекле

16. В чём преимущества РНИФ перед РИФ?

а) более широкие диагностические возможности

б) дешевизна

в) доступность

г) скорость получения ответа

д) наглядность.

РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА

1. Борисов Л.Б. Руководство к лабораторным и практическим занятиям по микробиологии. М., 2005. С. 332-336.

2. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования под ред. М.О. Биргер, 1982. С. 126-142, 154-155

3. Вершигора А.Е. Общая иммунология. Киев, 1990. С. 34-227.

4. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. С-Пб, 2002. С. 228-238.

5. ПоздеевO.K. Медицинская микробиология (под ред. Покровского В.И.). М., 2006.

6. Медицинская микробиология. Под ред. Королюка А.М., Сбойчакова В.Б. С-Пб, 2002. С. 94-106.

119