- •1. Цели и задачи мед бактериологии, вирусологии, иммунологии.
- •2. Систематика микроорганизмов. Основы систематики и таксономические группы микроорганизмов.
- •3. Морфология, ультраструктура бактерий.
- •4. Морфология, ультраструктура микоплазм.
- •5. Морфология, ультраструктура хламидий.
- •6. Морфология, ультраструктура риккетсий.
- •7. Морфология, ультраструктура спирохет.
- •8. Морфология, ультраструктура актиномицетов.
- •9. Морфология, ультраструктура грибов.
- •11. Структура липополисахарида и механизмы его биологического воздействия на макроорганизмы
- •12. Дифференциально-диагностические среды, их состав и механизм действия.
- •13. Дыхание бактерий. Методы создания анаэробных условий.
- •14. Питание бактерий. Клсф питательных сред, их состав.
- •15. Периодические и хемостатные культуры.
- •16. Биология и морфология вирусов. Их взаимоотношения с клеткой хозяина.
- •17. Клеточные культуры, их происхождение. Способы выявления вирусов в клеточных культурах.
- •18. Бактериофаги. Морфология, взаимодействие с клеткой, культивирование, практическое использование.
- •19. Строение генетического аппарата у бактерий. Плазмиды. Виды плазмид и их значение в изменчивости бактерий.
- •20. Генотипическая и фенотипическая формы изменчивости, их механизм.
- •21. Генетические рекомбинации (трансдукция, конъюгация, трансформация), их механизм и значение в изменчивости.
- •22. Споры и спорообразование у микроорганизмов, свойства спор, методы обнаружения спор.
- •23. Методы микроскопии в микробиологии: световая, темнопольная, фазовоконтрастная, люминесцентная. Их практическое применение.
- •24. Стерилизация. Методы стерилизации и стерилизационная аппаратура. Режимы стерилизации и контроль качества стерилизации в автоклаве.
- •25. Асептика, антисептика, дезинфекция. Определение понятий, механизмы влияния химических веществ на микробную клетку
- •26. Простые и сложные способы окраски микроорганизмов. Способы окраски спор, жгутиков, капсул, включений.
- •27. Антибиотики. Механизмы проявления чувствительности и устойчивости микроорганизмов к антибиотикам.
- •28. Нормальная микрофлора тела человека. Её роль в организме. Гнотобиология.
- •29. Микрофлора окружающей среды. Её значение в экологии.
- •30. Чистая культура микроорганизмов. Способы выделения аэробных и анаэробных микроорганизмов.
21. Генетические рекомбинации (трансдукция, конъюгация, трансформация), их механизм и значение в изменчивости.
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ РЕКОМБИНАЦИИ у эукариот совершаются в процессе полового размножения путем взаимного обмена фрагментами хромосом, при этом из двух родительских хромосом образуются две рекомбинантные, т.е. возникают две рекомбинантные особи.
У прокариотов нет полового размножения в результате внутригеномных перестроек: изменение локализации генов в пределах хромосомы, или при проникновении в реципиента части ДНК донора → формирование мерозиготы, т.е. образуется только ОДИН РЕКОМБИНАТ.
ГенР происходят при участии ферментов в пределах отдельных генов или групп сцеплений генов. Существуют специальные REC–ГЕНЫ, определяющие способность бактерий к рекомбинациям. Передача генетического материала от Б! к Б! происходит путем трансформации, трансдукции и конъюгации, а плазмидных генов — путем трансдукции и конъюгации.
ТРАНСФОРМАЦИЯ – непосредственная передача генетического материала (фрагмента ДНК) донора Рец. (Впервые Гриффитс – опыт с живым авирулентным бескапсульным штаммом пневмококка, к/й стал вирулентным при обработке экстрактом убитых капсульных пневмококков.)
С донорной ДНК в реципиентную клетку обычно передается только один ген, т.к. фрагмент ДНК, который может проникнуть в Рец очень маленький. Трансформации поддаётся только часть клеток Б!! популяции – КОМПЕТЕНТНЫМИ. Состояние компетентности (когда стенка Б! проницаема для высокополимерных (Мг=0,5–1 млн) фрагментов ДНК) возникает обычно в конце LOG–ФАЗЫ.
Фазы процесса трансформации:
адсорбция ДНК-донора на Рец;
проникновение ДНК внутрь Рец и деспирализация ДНК.
соединение любой из двух нитей ДНК донора с гомологичным участком хромосомы реципиента и последующая рекомбинацией.
Эффективность зависит от СТЕПЕНИ ГОМОЛОГИЧНОСТИ ДНК донора и реципиента, что определяет конечный результат, т. е. количество формирующихся рекомбинантов (трансформантов) межвидовая трансформация происходит гораздо реже, чем внутривидовая.
ТРАНСДУКЦИЯ – передача генетического материала с помощью фагов. Различают три типа трансдукции:
Неспецифическая (общая). В момент сборки фаговых частиц в их головку может проникнуть ЛЮБОЙ фрагмент ДНК Б!–донора. Вместе с фаговой ДНК переносятся любые гены донора и включаются в гомологичную область ДНК Рец путем рекомбинации. Фаги только переносят генетического материала
Специфическая – фаг переносит ОПРЕДЕЛЕННЫЕ гены при выщеплении профага из Б! хромосомы вместе с рядом расположенными генами, при этом фаг становится дефектным. При взаимодействии фага с Рец происходит включение гена донора и дефектного фага в хромосому РецБ!, а Б!! становятся невосприимчивыми к последующему заражению вирулентным фагом.
Абортивная – фрагмент ДНК бактерии-донора не включается в хромосому РецБ!, а располагается в цитоплазме и в таком виде функционирует. Во время деления этот фрагмент ДНК передаётся только одной дочерней , и в конечном итоге утрачиваться в потомстве.
КОНЪЮГАЦИЯ – перенос генетического материала из клетки-донора в клетку реципиента при их СКРЕЩИВАНИИ. Доноры – с F-плазмидой (половой фактор). При скрещивании F+ с F– половой фактор передается независимо от хромосомы донора, при этом почти все Рец становятся F+.
F-плазмида может интегрировать в Б! хромосому. В некоторых случаях она освобождается, захватывая при этом сцепленные с ней Б! гены (обозначаются с указанием включенного гена: F-lac).
ЭТАПЫ:
прикрепление клетки-донора к Рец с помощью SEX-ПИЛЕЙ
образование конъюгационного МОСТИКА, через который передаётся F-фактор и другие плазмиды, находящиеся в цитоплазме донора.
разрыв одной из цепей ДНК (в месте включения F-плазмиды) при участии эндонуклеазы. Один конец ДНК проникает в Реци сразу же достраивается до 2-нитевой структуры. При переносе захватывается часть ДНК Б!-донора – Hfr-штаммы (HIGH FREQUENCY OF RECOMBINATION). При скрещивании Hfr-штамма с F–F-фактор, не передается (т.к. конъюгационный мостик разрывается, а F-фактор расположен в дистальной части хромосомы). Передаются только гены Б! хромосомы, расположенные вблизи начала переноса (О–точка (origin)).
На ОСТАВШЕЙСЯ в нити ДНК синтезируется 2 цепочка.