Препараты для лечения и профилактики стафи­лококковых инфекций

В связи с множественной устойчивостью клинических штаммов возбудителей к химиотера­певтическим препаратам перед началом этиотропной терапии не­обходимо определение антибиотикочувствительности выделенного штамма стафилококка.

Химиотерапевтические схемы ле­чения инфекций, которые обусловлены стафилококками, чувствительными к метициллину (оксациллину) и устойчивыми к метициллину (оксациллину), раз­личны. Для лечения первой группы стафилококковых инфекций могут быть использованы антибиотики: цефалоспорины 1-4 поко­ления, полусинтетические пенициллины, устойчивые к пеницил­линазам (метициллин, оксациллин), аминопенициллины в сочетании с клавулановой кислотой (амоксициллин/клавуланат, ампициллин/сульбактам), карбапенемы, гликопептиды, фторхинолоны, аминогликозиды, макролиды, миноциклин, триметоприм/сульфаметоксазол. Химиотерапевтический спектр воздействия на метициллинустойчивые стафилококки очень узок и включает: гликопептиды (ванкомицин, тейкопланин) и фузидиевую кислоту.

При хронических формах стафилококковых инфекций рекомендуют аутовакцину, представляющую собой инактивированную взвесь чистой культуры клинического штамма, выделенного от данного пациента; а также стафилококковую инактивированную, поли­валентную вакцину из взвеси коагулазоположительных штаммов стафилококка.

Для иммунотерапии хронических стафилококковых инфекций применяют также антифагин стафилококковый (фильтрат культур инактивированных вирулентных штаммов стафилококков).

Для лечения стафилококковых инфекций и их профилактики у беременных, новорожденных, ослабленных лиц с иммунодефицитом, используется очищенный, адсорбированный на гидроксиде алюминия стафилококковый анатоксин.

В случаях тя­желых интоксикаций и сепсиса, показано применение человеческого антистафилококкового иммуноглобулина из крови доноров, иммунизированных стафилококковым анатоксином.

Для лечения и санации стафилококконосителей местно и парентерально используют стафилококковый бактериофаг.

Лабораторная диагностика стрептококковых инфекций

Используют: бактериоскопический, бактериологический, серологический и биологический методы исследований.

Бактериоскопический метод. В качестве материала для ис­следования берут гнойное отделяемое, мокроту, в случае сеп­сиса – кровь. Из исследуемого материала готовят мазки, окра­шивают по Граму и микроскопируют. Предварительный диагноз основывается на выявлении грамположительных шаровидных кок­ков размером 0,6-1,0 мкм, располагающихся преимущественно цепочками и попарно.

Бактериологический метод. Проводят посев исследуемого материала (гной, мокрота, моча, кровь и др.) на специальные среды: сахарный бульон и агар, для выявления гемолитических свойств – на кровяной агар.

Выделенную чистую культуру идентифицируют по морфологи­ческим, культуральным, биохимическим, антигенным и токсиген­ным свойствам. Наиболее важными тестами являются: вид гемолиза на кровяном агаре; каталазная активность; чувствительность к бацитрацину, сульфаметоксазолу и триметоприму; САМР-тест; гидролиз гиппурата натрия; желчно-эскулиновый тест; рост в бульоне с 6,5% NaCl; наличие пирролидонилариламидазы (PYR), и характер группового полисахаридного антигена.

По картине гемолиза на кровяном агаре стрептококки делят на три группы. -гемолитические стрептококки, вызывают полный лизис эритроцитов, наблюдаемый в виде полного просветления среды вокруг колонии. -гемолитические или «зеленящие» стрептококки, вызывают частичный гемолиз и образуют колонии, окруженные зоной зеленоватого оттенка, что обусловлено превращением гемоглобина в метгемоглобин. Третью группу составляют негемолитические стрептококки, не вызывающие гемолиза на кровяном агаре.

Каталазная активность определяется по выделению пузырьков газа при смешивании исследуемой культуры с каплей 3-10% раствора перекиси водорода на предметном стекле.

Чувствительность к вышеуказанным химиопрепаратам исследуют методом индикаторных («бумажных») дисков.

САМР тест основан на способности стрептококков продуцировать экстрацеллюлярный протеин, усиливающий лизис эритроцитов на кровяном агаре при совместном культивировании с золотистым стафилококком, продуцирующим -лизин.

Для определения гидролиза гиппурата натрия петлю чистую культуру исследуемого штамма суспендируют в 0,4 мл 1% водного раствора гиппурата натрия, а через 2 часа инкубации добавляют 0,2 мл 3,5% раствора нингидрина в смеси бутанола и ацетона (1:1). Положительным результатом является пурпурное окрашивание в течение 10 минут.

Для проведения желчно-эскулинового теста исследуемую культуру засевают на питательный агар с 40% желчи, 0,1 % эскулина и 0,05% цитрата железа. Положительным результатом является образование в питательной среде комплекса темно-коричневого цвета.

С целью обнаружения фермента пирролидонилариламидазы (PYR) исследуемую культуру засевают на питательный бульон, содержащий 0,01% L-пирролидонил--нафтиламида. Положительной реакцией считают ярко-красное окрашивание среды при добавлении капли диметиламиноациннамальдегида через 4 часа.

Антигенную дифференциацию стрептококков проводят по группоспецифическому полисахариду клеточной стенки с помошью антигенных диагностикумов в реакциях преципитации и латекс-агглютинации.

Серологический метод. Для обнаружения пиогенного стрептококка в патологическом материале применяют реакцию коагглютинации и прямую реакцию иммунофлуоресценции (РИФ).

Реакция коагглютинации основывается на применении группоспецифических антител, сорбированных на клетках золотистого стафилококка, против -гемолитического стрептококка. Тампон с исследуемым материалом вначале опускают в раствор для экстрагирования полисахаридного стрептококкового антигена. Затем полученный экстракт на предметном стекле смешивают с диагностикумом и через 2-3 минуты учитывают результат. Положительной реакцией является выпадение хлопьев и просветление взвеси.

Для постановки РИФ используют меченные флуорохромом противострептококковые антитела. Реакцию используют для экспресс-диагностики в нативном материале и идентификации чистой культуры возбудителя.

Биологический метод. Используют для диагностики пневмококковых инфекций. С этой целью внутрибрюшинно заражают белых мышей, обладающих высокой чувствительностью к возбудителю, а затем через 1-5 дней из органов погибших животных делают мазки-отпечатки, проводят посев крови и перитонеального экссудата на питательные среды. Предварительный диагноз ставят при обнаружении ланцетовидных диплококков, окруженных капсулой (отличительная особенность S.pneumoniae). Последующую идентификацию проводят путем бактериологических и серологических исследований.