Rabochaya_tetrad_-_4_Virusologia_Chastnaya_bakteriologia
.pdfДоказательство этиологической роли выделенного вируса – постановка РН с парными сыворотками больного и вирусом, выделенным от этого же больного
Сыворотки |
|
Разведения сыворотки больного |
|
Контроли |
||||||
больного |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1/10 |
|
1/20 |
1/40 |
1/80 |
1/160 |
1/320 |
дозы вируса |
сыворотки |
||
А |
|
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1-3 день |
+ |
|
- |
- |
- |
- |
|
- |
|
|
болезни |
|
|
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Через 2-3 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
нед. |
+ |
|
+ |
+ |
+ |
- |
|
- |
|
|
болезни |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Вывод:____________________________________________________________
___________________________________________________________________
Сыворотки |
|
Разведения сыворотки больного |
|
Контроли |
||||||
больного |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
В |
1/10 |
|
1/20 |
1/40 |
1/80 |
1/160 |
1/320 |
дозы вируса |
сыворотки |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1-3 день |
+ |
|
+ |
- |
- |
- |
|
- |
|
|
болезни |
|
|
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Через 2-3 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
нед. |
+ |
|
+ |
- |
- |
- |
|
- |
|
|
болезни |
|
|
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Вывод:____________________________________________________________
___________________________________________________________________
Заключение: Для доказательства этиологической роли выделенного вируса необходимо:
1.четырехкратное нарастание титра антител к выделенному вирусу;
2.вирусологические и серологические показатели в отношении возбудителей других, клинически сходных, инфекций должны быть отрицательными;
3.вирус должен в значительных количествах выделяться из пораженных органов и тканей;
4.вирус должен чаще обнаруживаться у больных, чем у здоровых людей того же возраста, в той же местности и в данное время года.
30
ВИРУСНЫЕ ГЕПАТИТЫ СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТОВ
|
Таксономическое |
А(HVA) |
|
В(HVB) |
|
С(HVC) |
D (HVD) |
Е(HVE) |
|||||||||
|
|
положение |
|
|
|||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
Семейство |
Picornaviridaе |
Hepadnaviridae |
|
Flaviviridae |
|
|
|
Caliciviridae |
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Тип НК |
РНК |
|
ДНК |
|
|
РНК |
РНК |
|
РНК |
|||||||
|
Источник |
Человек |
Человек |
|
|
Человек |
Человек |
|
Человек |
||||||||
|
инфекции |
|
|
|
|||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
водный, |
половой, |
|
|
гемоконтактный |
как HVB |
как НVА |
|||||||
|
Пути передачи |
алиментарный |
гемоконтактный |
|
половой |
|
|
|
|
|
|||||||
|
контактно- |
трансплацентар- |
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||
|
|
|
|
бытовой |
ный |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
Методы |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
диагностики: |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
Экспресс |
+ |
|
+ |
|
|
|
+ |
|
+ |
|
|
+ |
||||
|
Вирусологический |
+ |
|
- |
|
|
|
- |
|
- |
|
|
- |
||||
|
Серодиагностика |
+ |
|
+ |
|
|
|
+ |
|
+ |
|
|
- |
||||
|
|
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ГЕПАТИТОВ А и Е |
|
|
|||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
Исследуемый материал: |
|
|
|
|
|
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
Фекалии |
|
|
|
Парные сыворотки крови |
|
|
|||||||||
|
(в инкубационном и продромальном |
|
|
(все периоды заболевания) |
|
|
|||||||||||
|
периоде, первая неделя желтушного |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
|
периода) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
Выявление антигенов |
|
|
|
|
Выявление антител |
|
|
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Иммунная электрон- |
|
ИФА, ПЦР |
|
|
|
|
ИФА |
|
||||||
|
ная микроскопия |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
#С# |
Диагностика гепатита А в ИФА |
|
|
|
||||||||
|
|
|
|
Сыворотки обследуемых |
|
|
Контроли |
|
|||||||
|
|
А |
|
Б |
|
В |
|
Г |
|
Д |
(+) |
|
(-) |
||
|
Результат |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
31 |
|
|
|
|
|
|
|
||
Вывод:_______________________________________________________________
_________________________________________________________________
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ГЕПАТИТА В
Исследуемый материал:
Сыворотка крови, сперма, ткань |
Сыворотка крови |
печени (выявление ДНК вируса в ПЦР) |
|
|
|
Выявление АТ к HBsAg BeAg Ig M – 1-30 день желтухи
Ig G – с конца 2 месяца от начала желтухи
РИФ, РП, РНГА, РИА, |
|
РП, РНГА, РИА, ИФА |
ИФА |
|
|
Диагностика гепатита В в РНГА
Исследуемый материал:___________________________________________
Диагностический препарат:________________________________________
|
|
Сыворотки обследуемых |
|
Контроли |
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
А |
Б |
В |
Г |
Д |
(+) |
|
(-) |
Результат |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Вывод:_______________________________________________________________
_________________________________________________________________
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ГЕПАТИТОВ С, D
ГЕПАТИТ С |
|
|
|
ГЕПАТИТ D |
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Исследуемый материал: |
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Сыворотка крови, |
|
|
|
Сыворотка крови |
||||
плазма. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Выявление: |
|
|
|
Выявление: |
|
|||
РНК в ПЦР |
|
|
|
РНК в ПЦР |
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
HVСAg |
HVCAt |
|
|
|
HVDAg |
HVDAt |
|
|
|
|
32 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ИФА |
|
ИФА, РИА, им- |
|
ИФА, |
|
ИФА, |
||||
|
|
|
муноблоттинг |
|
РИА |
|
РИА |
|||
|
|
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
33
Занятие №4 |
Дата____________ |
Тема: Особо опасные вирусные инфекции. Основные группы особо опасных вирусных инфекций, особенности их эпидемиологии и лабораторной диагностики. Клещевой энцефалит, свойства вируса, патогенез, лабораторная диагностика, лечение и профилактика. Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ). Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции. Лечение и профилактика вирусных инфекций.
ЦЕЛЬ: Получить представление об особо опасных вирусных инфекциях, особенностях их распространения, диагностике и профилактике. Получить представление о ВИЧ-инфекции, методах лабораторной диагностики ВИЧинфекции. Ознакомиться с дополнительными методами диагностики вирусных заболеваний. Рассмотреть принципы использования лечебных и профилактических противовирусных препаратов.
ОСНОВНЫЕ ВОПРОСЫ, РАЗБИРАЕМЫЕ НА ЗАНЯТИИ:
1.Особо опасные вирусные инфекции, возбудители, особенности их эпидемиологии, патогенеза, принципов диагностики.
2.Арбовирусы : возбудители энцефалитов и геморрагических лихорадок.
3.Клещевой энцефалит. Биологические свойства возбудителя. Эпидемиология и патогенез.
4.Лабораторная диагностика клещевого энцефалита. Лечение и профилактика.
5.Рабдовирусы и филовирусы. Диагностика, лечение и профилактика бешенства.
6.ВИЧ-инфекция. Характеристика биологических свойств возбудителей.
7.Патогенез ВИЧ-инфекции, пути передачи, принципы профилактики и лечения.
8.Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции.
9.Дополнительные методы диагностики вирусных инфекций (вирусоскопия, РНГА).
10.Препараты для специфической профилактики и лечения вирусных заболеваний.
11.Химиотерапия вирусных заболеваний. Интерферонотерапия.
12.Классификация противовирусных химиопрепаратов. Механизмы действия.
#С# Отличительные характеристики особо опасных вирусных инфекций :
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
34
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
#С# Заполните таблицу
Семейство |
Свойства вирусов |
Заболевание |
Распространение |
|
|
|
|
Togaviridae |
|
|
|
|
|
|
|
Flaviviridae |
|
|
|
|
|
|
|
Bunyaviridae |
|
|
|
|
|
|
|
Arenaviridae |
|
|
|
|
|
|
|
Rhabdoviridae |
|
|
|
|
|
|
|
Filoviridae |
|
|
|
|
|
|
|
Reoviridae |
|
|
|
|
|
|
|
#С# Краткая характеристика вируса клещевого энцефалита.
Систематическое положение : ___________________________________________
Форма, тип симметрии: ________________________________________________
Размер: ______________________________________________________________
Наличие суперкапсида : ________________________________________________
35
Тип НК : _____________________________________________________________
Наличие сероваров и серотипов: ________________________________________
Методы культивирования : _____________________________________________
Локализация в организме человека : ____________________________________
_____________________________________________________________________
Источник инфекции :__________________________________________________
_____________________________________________________________________
Пути передачи :______________________________________________________
Ведущее звено патогенеза:____________________________________________
_________________________________________________________________
Препараты для профилактики клещевого энцефалита :
1.инактивированные вакцины __________________________________________
___________________________________________________________________
2.гамма – глобулин ____________________________________________________
____________________________________________________________________
#А # Лабораторная диагностика клещевого энцефалита.
1. Вирусологический метод – выделение вируса из крови, ликвора, секционного материала, от клещей путем заражения куриных эмбрионов, культур клеток или лабораторных животных.
2.Обнаружение антигенов вируса в РНГА, ИФА.
3.Обнаружение вирусной РНК в ПЦР.
4.Серодиагностика клещевого энцефалита в РТГА
Исследуемый материал _________________________________________________
36
_____________________________________________________________________
Диагностический препарат ______________________________________________
Ингредиенты реакции __________________________________________________
______________________________________________________________________
#С# Краткая характеристика вируса бешенства.
Систематическое положение:__________________________________________
___________________________________________________________________
Форма:_____________________________________________________________
Размер:_____________________________________________________________
Тип НК:____________________________________________________________
Наличие суперкапсида:_______________________________________________
Наличие сероваров и серотипов:_______________________________________
Методы культивирования:_____________________________________________
Локализация в организме человека:_____________________________________
___________________________________________________________________
Источник инфекции:_________________________________________________
Путь передачи:______________________________________________________
Ведущее звено патогенеза инфекции:___________________________________
Препараты для профилактики бешенства :
инактивированная антирабическая вакцина _______________________________
______________________________________________________________________
антирабический гамма – глобулин ________________________________________
_____________________________________________________________________
Лабораторная диагностика бешенства
1.Выявление специфических включений Бабеша-Негри в клетках мозга людей и животных погибших от бешенства.
37
Тельца Бабеша-Негри в клетках мозга. Окраска по Муромцеву-Селлеру. Увеличение х 630.
2.Выявление вирусного антигена в мазках – отпечатках мозга или слюнных желез.
3.Вирусологический метод – заражение вируссодержащим материалом :
а) куриных или утиных эмбрионов в мозг или желточный мешок.
в) культуры клеток ВНК – 21 или др.
с) белых мышей - в мозг.
ВИРУСЫ ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА
#С# КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
Систематическое положение:__________________________________________
___________________________________________________________________
Форма:_____________________________________________________________
Размер:_____________________________________________________________
Тип НК:____________________________________________________________
Наличие суперкапсида:_______________________________________________
Наличие сероваров и серотипов:_______________________________________
Методы культивирования:_____________________________________________
Локализация в организме человека:_____________________________________
___________________________________________________________________
Источник инфекции:_________________________________________________
Путь передачи:______________________________________________________
Ведущее звено патогенеза инфекции:___________________________________
СПИД-ассоциированные инфекции:____________________________________
___________________________________________________________________
___________________________________________________________________
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ВИЧ-ИНФЕКЦИИ
Исследуемый материал - кровь и любые биологические секреты обследуемого
38
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Выявление анти-ВИЧ Аt |
|
Выявление ВИЧ-Аg |
|
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ИФА |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ИФА |
|
|
ПЦР |
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
При положительном |
|
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
результате |
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
Иммуноблоттинг |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Основные этапы диагностики ВИЧ инфекции
В случае получения положительного результата, переходят к следующему этапу исследования, при отрицательном результате - исследование прекращают.
#А# 1. Скрининговое исследование - выявление суммарных антител к ВИЧ с помощью ИФА
1.1 Выявление антител к антигенам из вирусного лизата.
Исследуемый материал:_______________________________________________
Диагностический препарат:____________________________________________
|
|
Исследуемые сыворотки крови |
|
|
Контроли |
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
A |
Б |
В |
Г |
Д |
Е |
Ж |
(+) |
(-) |
Результат:______________________________________________________
Вывод:________________________________________________________
1.2Повторное исследование с тест-системой другой производственной серии.
1.3Референсное исследование с использованием тест-систем на основе
рекомбинантных или синтетических пептидов в качестве антигена.
2. Экспертное исследование (иммуноблоттинг, молекулярная гибридизация)
#С# 2. Иммуноблоттинг
Принцип метода:_______________________________________________________
39