
- •3.Панель биохимической дифференцировки энтеробактерий - пбдэ.
- •Автоматизация микробиологических исследований
- •1. Система контроля стерильности Bact/Alert (гемокультиватор)
- •(Этапы).
- •4 Этап определение количественного содержания и активности фага
- •3.2 Определение количества фага методом агаровых слоев по Грациа
- •История открытия бактериофагов.
- •Maldi Biotyper.
История открытия бактериофагов.
В 1896 г. русский Владимир Ааронович Хавкин обнаружил антимикробную активность водных образцов из рек Индии. Эти препараты, предварительно пропущенные через бактериальные фильтры, ингибировали рост культуры холерного вибриона.
В 1898 г. русский Н.Ф. Гамалея наблюдал растворение культуры возбудителя сибирской язвыпод действием фильтрата этого микроорганизма и назвали его (фильтрат) бактериолизином.
В 1915 г. англичанин Эдвард Творт описал агент, проходящий через бактериальный фильтр и вызывающий лизис стафилококков.
В 1917 г. француз Феликс Д'Эррель – обнаружил феномен литического действия фильтрата испражнений переболевшего дизентерией, что выразилось в просветлении бульонной культуры и образовании «стерильных пятен» на агаровой культуре возбудителя. Он назвал это явлениебактериофагией, а литический агент, способный размножаться на гомологичных бактериях, -бактериофагом (от лат. phagos - пожираюший бактерии).В книге "Бактериофаги" (1922) Д'Эррель рассмотрел природу фага,методы его выделения.Вся его дальнейшая деятельность была посвящена изучению бактериофагов, их использованию в лечении инфекционных заболеваний -фаготерапии.
В настоящее время бактериофаги применяют в медицине для диагностики, лечения и профилактики инфекционных заболеваний.
|
|
|
|
Владимир Ааронович Хавкин (15.03 1860, Одесса, Россия, - 26.10.1930, Лозанна, Швейцария), бактериолог |
Никола́й Фёдорович Гамалея (5 (17) февраля 1859, Одесса — 29 марта 1949, Москва), советский микробиолог, эпидемиолог |
Фредерик Туорт (22.10.1877, Камберли, Англия, — 20.03.1950, там же), английский микробиолог. |
Феликс Д"Эрелль (25.04.1873, Монреаль, — 22.02.1949, Париж), бактериолог.
|
Специфичность взаимодействия фагов с бактериями.
Для бактериофагов характерна строгая специфичность, что может выражаться в способности лизировать бактерии только одного вида - видовая специфичность,либо внутри вида – типовая специфичность. Если фаги лизируют бактерии близких видов, входящих в один род, например в род Shigella (возбудители дизентерии), то их называют поливалентными. Типовая специфичность применяется для типирования ( фаготипирования) бактерий с целью выявления источника инфекции.
По конечному результату взаимодействия
с клеткой все фаги
можно разделить навирулентные иумеренные.
Типирование штаммов стафилококков
(Н.Р. Иванов, Л.М. Скитева, Н.С. Солун «Бактериологическая диагностика и профилактика стафилококковых заболеваний»
Культура
засевается в бульон (Хоттингера или
Мартена), инкубируется три часа, а затем
пересевается «газоном» на чашки с МПА,
содержащим 0,025—0,04% хлористого кальция.
Дно чашки предварительно разграфляют
на квадраты, количество которых
соответствует числу фагов.
Стандартный набор включает 21 фаг (80, 79, 52А, 52, 29, 71, 55, 3С, 3В, 3А, 53,47,42Е, 7, 6, 42Д, 77,75, 83А, 54, 81, 187.
Засеянные чашки подсушивают при температуре 37° в течение 30—40 минут, затем петлей наносят каплю соответствующего фага всегда в одном и том же порядке.
Если культур много, то чашки расставляют на столе (в боксе) и снимают крышки. Пастеровской пипеткой набирают первую, а затем очередную по порядку расу тест-фага и наносят небольшие капли на соответствующий квадрат в каждой чашке. При этом прикасаться к агару нельзя во избежание переноса исследуемых культур с одной чашки на другую. После -высыхания капель фагов чашки помещают в перевернутом положении на 5—6 часов в термостат (температура 37°) и до утра оставляют при комнатной температуре. Учет результатов производят простым глазом и при помощи лупы, отмечая номер фага, давшего лизис на + + и выше, а в скобках отмечают номер фага, давшего лизис на +.