Микра / Занятия / 12. Т-лимфоциты Клеточный иммунный ответ

ЗАНЯТИЕ № 12

ТЕМА: Т-ЛИМФОЦИТЫ. КЛЕТОЧНЫЙ ИММУННЫЙ ОТВЕТ. ИММУНОДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ

ПЕРЕЧЕНЬ КОНТРОЛЬНЫХ ВОПРОСОВ

1. Т-лимфоциты: развитие, маркеры. Субпопуляции Т-лимфоцитов (Т-хелперы нулевые, Т-хелперы 1, 2 типов, Т-регуляторы; Т-эффекторы: цитотоксические Т-лимфоциты, Т-лимфоциты памяти).

2. Т-клеточный рецептор: строение, типы, генетический контроль, разнообразие. Роль Т-клеточного рецептора. Т-зависимые антигены.

3. Клеточный иммунный ответ, динамика развития, мишени действия Т-килеров, проявления.

4. Серологический метод исследования: задачи, этапы, оценка. Общая классификация иммунологических методов диагностики: серотипирование, серодиагностика

5. Диагностикумы. Диагностические иммунные сыворотки. Методы их получения. Поливалентные, монорецепторные адсорбированные (поликлональные) и моноклональные диагностические сыворотки и тест-системы.

6. Качественная и количественная оценка серологических реакций: титр иммунных сывороток, диагностический титр, нарастание титра антител, аффинность антител, их авидность.

7. Механизмы течения и проявления реакций агглютинации. Нагрузочные реакции агглютинации: постановка и учет реакции непрямой гемагглютинации (РНГА), латекс-агглютинации. Реакция ко-агглютинации. Оценка результатов.

8. Реакции иммунопреципитации: варианты постановки. (кольцепреципитация по Асколи, двойная диффузия в агаре, иммуноэлектрофорез), методы учета и оценки.

9. Реакции нейтрализации токсина антитоксической сывороткой: варианты постановки.

ЛАБОРАТОРНАЯ И САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА

Серологический метод исследования:

Серотипирование ____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________

Серодиагностика _____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________

Реакция агглютинации__________________________________________________________________________

Агглютинирующая диагностическая сыворотка (что содержит, как получена)_____________________________

_____________________________________________________________________________________________

Агглютинирующие диагностические сыворотки бывают_______________________________________________

_____________________________________________________________________________________________

►1. Постановка ориентировочной реакции агглютинации  на стекле (реакция Грубера) для идентификации бактерий (применение РА в серотипировании).

Вывод: ___________________________________ ___________________________________ ___________________________________

►2. Постановка развернутой реакции агглютинации в пробирках для определения титра антител в сыворотке (применение РА в серодиагностике).

Диагностикум _________________________________________________________________________________

Виды диагностикумов __________________________________________________________________________

Развернутая реакция агглютинации с целью серодиагностики брюшного тифа

Разведение сыворотки	1:100	1:200	1:400	1:800	1:1600	КА	КС
Результат

Вывод: Титр Ат в реакции ______________________________________________________________________

Критерии серодиагностики:

■1) Диагностический титр_______________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________

■2) Нарастание титра Ат ________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________

►3. Постановка и учет реакции непрямой гемагглютинации (РНГА)

Учет и оценка результатов.

Разведения сыворотки	1:10	1:20	1:40	1:80	1:160	1:320	КА
Учет результатов (зарисовать)

Заключение:___________________________________________________________________________________

Эритроцитарный антигенный диагностикум (что представляет, для чего используется) ____________________

_____________________________________________________________________________________________

Эритроцитарный антительный диагностикум (что представляет, для чего используется) ___________________

_____________________________________________________________________________________________

►4. Постановка и учет реакции кольцепреципитации по Асколи

Реакции преципитации ________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________

Преципитирующая сыворотка (что содержит, как получают) ___________________________________________

_____________________________________________________________________________________________

Схема постановки и учета реакции преципитации для обнаружения микробных антигенов. Реакция положительная. Реакция отрицательная (контроль).

►5. Реакция двойной встречной иммунодиффузии по Оухтерлони (реакция преципитации в геле)

Принцип метода: В агаровом геле формируют лунки, в которые вносят антигены А и Б и сыворотку, содержащую соответствующие антитела (Ат). Антитела и антигены диффундируют в агар и образуют линии преципитации. Возможны три варианта реакции: а – если антигены идентичны, образуются идентичные линии преципитации; б – если антигены частично идентичны, образуется одна оторванная от общей линия преципитации (это связано с тем, что одно антитело не реагирует с антигеном и продвигается дальше); в – если антигены не идентичны, линии преципитации перекрещиваются.

►6. Реакции нейтрализации (РН) токсина антитоксической сывороткой

Варианты постановки: __________________________________________________________________________

Антитоксическая сыворотка (что содержит, как получают) ____________________________________________

_____________________________________________________________________________________________

3