6 Химический состав эритроцитов

Воды в них содер­жится от 57 до 68%, основную массу белков составляет гемоглобин (41%). Молекула гемоглобина состоит из четырех субъединиц, каждая из которых представлена пептидными цепями, соединенными нековалентной связью со своим гемом. Пептидные цепи двух видов: две — α- и α-цепи (141 аминокислотный остаток) и две — β- и β-цепи (146 остатков). Субъединицы соеди­нены между собой солевыми связями.

Двухвалентное железо гема имеет шесть координа­ционных связей, из которых четыре удерживают железо внутри порфиринового кольца и лежат в его плоскости. Две оставшиеся связи железа направлены перпендику­лярно плоскости порфиринового кольца. Одна из этих связей соединена с белком глобином, а другая свободна, она может связывать молекулу кислорода, не меняя валентность железа.

Гемоглобин плода (или фетальный) отличается по ряду свойств от гемоглобина взрослых, в частности по способности связывать кислород. У взрослых животных он оказался гетерогенной системой, состоящей из не­скольких компонентов: HbAi, HbA₂, НЬА₃. Обнаружены также патологические формы гемоглобина S, С, D, Е и др. Патология обусловлена изменением первичной структуры белковой части глобина. Например, гемогло­бин А отличается от гемоглобина тем, что в последнем вместо глутаминовой кислоты содержится остаток вали-на. Гемоглобин А—гис-вал-лей-лей-тре-про-глю-глю-лиз. Гемоглобин — гиснвал-лей-лей-тре-про-вал-глю-лиз.

Из небелковых веществ в эритроцитах находится большое количество лецитина (в среднем 350 мг %) и холестерина (175 мг %), содержится глюкоза, но меньше чем в плазме. Весь глютатион крови входит в состав эритроцитов. В эритроцитах обнаружено много калия (470 мг%), железа ,(105 м г%), натрия (80 мг %). Медь в состав эритроцитов входит в виде сложного белка купреина, а цинк (1 мг %) находится в составе фермента карбоангидразы.

Лимфа — прозрачная жидкость, находится в лимфа­тических протоках. Относительная ее вязкость 1,0—1,5, удельная масса 1,012—1,026, поверхностное натяжение 1 — 1,02, коэффициент депрессии (А) —0,58, рН 7,6—7,7. По химическому составу лимфа близка к плазме, но в ней мало белков. Лимфа шейных протоков содержит примерно 3% белка, подкожная лимфа — 0,25%, а лим­фа печени — 6%. Отношение альбуминов к глобулинам (коэффициент А/Г) в лимфе значительно выше и колеб­лется от 3:1 до 5:1. Лимфа также содержит фибрино­ген и протромбин и поэтому способна медленно сверты­ваться. Электролитный состав лимфы отличается от та­кового плазмы. В лимфе всегда присутствуют формен­ные элементы крови — лимфоциты. Состав лимфы зна­чительно колеблется, и зависит это от уровня кормления животных. В основном по химическому составу лимфа мало отличается от плазмы крови.

7 Анализ биохимии крови

7.1 Минеральный обмен. Определение содержания неорганического фосфо ра в сыворотке крови. (по С. А. Ивановскому)

Минеральный обмен - совокупность процессов всасывания, распределения, усвоения и выделения минеральных веществ, нахо­дящихся в организме в виде неорганических соединений. Минераль­ные вещества играют важную роль в поддержании кислотно-основного равновесия, осмотического давления, системе свертывания крови, регуляции многочисленных ферментных систем и др., т.е. имеют решающее значение в создании и поддержании постоянства внутренней среды организма. По количественному содержанию в ор­ганизме элементы делятся на макро- (калий, кальций, натрий, магний, фосфор, хлор) и микроэлементы (цинк, хром, медь, железо, кобальт).

Минеральные вещества из желудочно-кишечного тракта всасы­ваются в кровь и лимфу, где связываются со специфическими транс­портными белками. Некоторые минеральные вещества соединяются с такими белками уже в эпителии слизистой оболочки кишечника (кальций). Основное количество выводимых из организма минераль­ных веществ обнаруживают в моче, кале, поте. Через почки выводят­ся ионы: натрия, калия, хлора, йода, 30% кальция и магния; через ки­шечник - ионы кальция (70%), железа, магния (70%) и др.

Минеральный обмен в организме с.-х. животных составляет важ­нейшую часть в процессах формирования продуктивных свойств. В качестве основных показателей минерального обмена используют со­держание в крови макроэлементов кальция и фосфора. В условиях РБ зачастую имеет место дефицит обеспеченности животных фосфором.

1.1 Цель работы. Освоить один из методов количественного определения фосфора в сыворотке крови, разобрать вопрос о значе­нии минеральных веществ для организма с.-х. животных .

1.2 Реактивы. 20% раствор трихлоруксусной кислоты (ТХУ), 1% раствор аскорбиновой кислоты на 0,1 н растворе НО, стандартный раствор фосфора, 5% раствор молибденовокислого аммония на 15% растворе серной кислоты, дистиллированная вода, сыворотка крови.

1.3 Оборудование. Штатив с обычными и мерными пробирка­ми, пипетки, обеззоленные фильтры, фотоэлектроколориметр.

1.4 Ход работы. В пробирку налить 3 мл дистиллированной воды, 1 мл исследуемой сыворотки крови, 2 мл раствора ТХУ и отфильтровать в мерную пробирку. Набрав 2 мл фильтра, добавить 1 мл молибдата аммония, 1 мл аскорбиновой кислоты и довести водой до 10 мл. Одновременно в другой пробирке поставить контрольный опыт, для чего внести в нее 3 мл стандартного раствора фосфора, 1 мл молибдата аммония, 1 мл аскорбиновой кислоты и 5 мл дистиллиро­ванной воды. Общий объем содержимого, как и в опытной пробирке - 10 мл. Через 10 мин опытную и контрольную пробы проколориметрировать против дистиллированной воды на ФЭКе с зеленым свето­фильтром в сантиметровой кювете.

Расчет провести по формуле: Р,мг%=Дх*10/Дк

где Д_х — оптическая плотность пробы,

Д_к — оптическая плотность контроля. Данные занесите в таблицу 1.

Таблица 1. Показатели оптической плотности исследуемых растворов и содержания неорганического фосфора в крови.

Показание оптической плотности		Содержание фосфора в пробе, мг %	Физиологическая норма, мг %
Опыт	Контроль
349 356 340	777 775 780	4.504 4.593 4.359	5

Р=(349*10)/777=4.504 мг % .

Р=(356*10)/775=4.593 мг %.

Р=(340*10)/780=4.359 мг %.

Ср. значение фосфора в пробе 4.504+4.593+4.359=4.485 мг %

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Освоили один из методов количественного определения фосфора в сыворотке крови. Сравнили физиологические нормы неорганического фосфора в крови с показателями содержания фосфора в пробе . Среднее значение в пробе неорганического фосфора в крови КРС является нормой . Если же показатели у животных пониженные у животного может быть : гиповитаминоз D, рахит, хроническая форма остео­дис­трофии, прогрессирующий остеопороз, избыток кальция, дефицит витамина D, го­лодание, анемия, диспепсия телят, родильный парез, явно выраженное заболевание кур желточным перитонитом, генерализованная форма ящура, гипофункция щитовидной железы, гипер­функция околощитовидной железы.

При повышенных показателях: почечная недостаточность, гипервитаминоз D, нефрит, острая дистрофия печени, поносы, метаболический ацидоз, заживление переломов, ак­тив­ное формирование костной мозоли, период синдрома колик (возбуждение), хемо­стаз под­вздошной кишки, тяжелая форма миогемоглобинурии, атонии преджелудков, лейкоз, ги­перфункция щитовидной железы, гипофункция паращитовидных желез, ост­рая форма остеодистрофии.

Библиографический список

1. Чечеткин А.В. Биохимия животных: - М.: Высш. школа, 1982.-511 с.

2.Михайлов А.Г. Биохимия сельскохозяйственных животных. – М.: колос , 1984.- 336 с.

3. Ганиев СБ. Методические указания к выполнению лабораторных работ по направлению подготовки дипломированного специалиста технологии сырья и продуктов животного происхождения 260300. - Уфа, 2006.

4. Кольман Я., Рем К.-Г. Наглядная биохимия: Пер.с нем. - М.: Мир, 2000. -

С.469.

5. Ленинджер А.П. Основы биохимии: Т.2. – М.: Мир, 1985. - С.368.

6. Рогожин В.В. Биохимия животных. - СПб: Гиорд, 2009. - С.552.

7. Чечеткин А.В. Практикум по биохимии сельскохозяйственных животных. М.: Высшая школа, 1980. - С.304.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ……………………………………………………………………………………………………………….

1 Биохимия крови………………………………………………………………………………………………….

2 Физико-химические свойства крови………………………………………………………………….

3 Буферные системы крови…………………………………………………………………………………..

4 Плазма крови и ее химический состав………………………………………………………..……

5 Белки плазмы и сыворотки крови…………………………………………………………………..

6 Химический состав эритроцитов……………………………………………………………………...

7 Анализ биохимии крови

7.1 Минеральный обмен. Определение содержания неорганического фосфора в сыворотке крови (по С. А. Ивановскому)……...………………………………… ЗАКЛЮЧЕНИЕ…………………………………………………………………..……………………………………

Библиографический список …………………………………………………………………………………