ГФ 11-1
.pdfПриладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
i,j
|
|
|
2 |
|
|
|
|
Таким |
образом, SUM d |
|
= |
14,00 |
+ 28,75 + |
5,00 + 8,75 = 56,50, |
|
|
i,j |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0 |
а так как |
в данном случае n = 4, |
k = 4, |
r = 2, r = 2, то по |
||||
формуле II.4.2 получаем: |
|
|
|
|
|
||
|
56,50 |
- |
4 |
x |
(5,125 |
+ 2,125) |
|
|
V = --------------------------- |
|
|
|
|
|
= 1,146. |
|
4 x |
(16 |
- |
8 - 2 |
- 2 + 2) |
|
|
Данное испытание относится к типу 2;2, так что использование соответствующего раздела табл. IV приложения вместе с формулами
II.3.4 - II.3.10 дает:
G = 219,0 - 230,75 - 221,50 + 232,75 = - 0,50;
|
|
|
|
--- |
|
|
V = 4 х 1,146 |
= 4,584; |
¦G¦ / |
/ V |
= 0,233 < 2,447 |
||
G |
|
|
\/ |
G |
|
|
(t(95%, f) для f = (4 |
- 1)(4 |
- |
2) = 6), |
поэтому |
одинаковость |
|
наклонов двух дозовых |
прямых |
не отвергается; далее: |
|
|||
Е = (- 219,0 + 230,75 - 221,50 + 232,75) / 2 = 11,50;
F = (- 219,0 - 230,75 + 221,50 + 232,75) / 2 = 2,25;
2
A = V = 1,146; I = lg 200 - lg 100 = 0,301; B = V/I = 12,65;
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
0
b = 11,50/0,301 = 38,2; M = 2,25/38,2 = 0,0589; D /D = 114,5%;
|
|
2 |
2 |
|
|
|
|
|
|
|
|
g = 12,65 х 2,447 /38,2 = 0,052; 1 - g = 0,948; |
|
|
|
|
|||||
|
|
0,0589 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
M |
= ------- |
+/- |
|
|
|
|
|
|
|
|
H, B |
0,948 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
-------------------------------- |
|
|
|
|||||
|
2,447 |
/ |
|
|
|
2 |
|
|
|
|
|
+/- ------------ \/ 1,146 х 0,948 + 12,65 х 0,0589 |
= |
|
|
|
|||||
|
38,2 х 0,948 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
= 0,062 +/- 0,0718 = [- 0,0097; 0,1340]; |
|
|
|
|
|
||||
|
0 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
(D /D) |
= |
97,8%; 136,1%. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
H, B |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
При проведении испытания по методу латинского квадрата потеря отдельных результатов |
|
||||||||
нарушает всю схему расчетов, поэтому необходимо "заместить" их надлежащими оценками. Проще |
|
|||||||||
всего это можно сделать, подставив на место выпавшего результата среднее из оставшихся |
|
|
||||||||
результатов для той же дозы того же препарата. Применяемый в дисперсионном анализе более |
|
|||||||||
сложный способ оценки выпавшего значения не дает в задаче определения эквивалентных доз |
|
|
||||||||
существенного повышения точности общих результатов испытания. |
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
Таблица II.4.1 |
||
---------------------------------------- |
|
|
T |
-------T |
------ |
T----- |
T |
------ |
¬ |
|
¦ |
|
_ |
|
¦ |
¦ |
|
¦ |
¦ |
2 |
¦ |
¦ |
Результаты испытания, у |
|
¦SUM у |
¦ |
у |
¦ d |
¦ |
d |
¦ |
|
¦ |
|
|
ij |
¦ j ij ¦ |
i ¦ i ¦ |
i ¦ |
||||
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
+--------------------------------------- |
|
|
|
|
|
|
|
|
+ |
------- |
+ |
------+----- |
|
+------ |
|
+ |
¦ |
0 |
|
0 |
|
|
|
|
|
|
¦ |
|
¦ |
¦ |
|
¦ |
¦ |
¦у |
|
= 222 у |
= 229 у1 |
= 222 у2 = 235 |
¦ |
908 |
¦ 227,00 ¦ |
1,00 |
¦1,0000 ¦ |
|||||||
¦ |
1 |
|
2 |
|
|
|
|
|
|
¦ |
|
¦ |
¦ |
|
¦ |
¦ |
+--------------------------------------- |
|
|
|
|
|
|
|
|
+------- |
|
+------ |
+----- |
|
+------ |
|
+ |
¦ |
|
|
0 |
|
0 |
|
|
|
|
¦ |
|
¦ |
¦ |
|
¦ |
¦ |
¦у2 |
= 231 у |
= 217 у |
= 231 у1 = 220 |
¦ |
899 |
¦ 224,75 ¦ |
-1,25 |
¦1,5625 ¦ |
||||||||
¦ |
|
|
1 |
|
2 |
|
|
|
|
¦ |
|
¦ |
¦ |
|
¦ |
¦ |
+--------------------------------------- |
|
|
|
|
|
|
|
|
+------- |
|
+------ |
+----- |
|
+------ |
|
+ |
¦ |
|
|
|
|
0 |
|
|
0 |
|
¦ |
|
¦ |
¦ |
|
¦ |
¦ |
¦у1 |
= 221 у2 = 233 у |
= 218 у |
= 228 |
¦ |
900 |
¦ 225,00 ¦ |
-1,00 |
¦1,0000 ¦ |
||||||||
¦ |
|
|
|
|
1 |
|
|
2 |
|
¦ |
|
¦ |
¦ |
|
¦ |
¦ |
¦ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
¦ |
|
¦ |
¦ |
|
¦ |
¦ |
+--------------------------------------- |
|
|
|
|
|
|
|
|
+------- |
|
+------ |
+----- |
|
+------ |
|
+ |
¦ |
0 |
|
|
|
|
|
|
0 |
|
¦ |
|
¦ |
¦ |
|
¦ |
¦ |
¦у |
|
= 235 у1 = 223 у2 |
= 232 у |
= 219 |
¦ |
909 |
¦ 227,25 ¦ |
1,25 |
¦1,5625 ¦ |
|||||||
¦ |
2 |
|
|
|
|
|
|
1 |
|
¦ |
|
¦ |
¦ |
|
¦ |
¦ |
+--------------------------------------- |
|
|
|
|
|
|
|
|
+------- |
|
+------ |
+----- |
|
+------ |
|
+ |
¦ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
¦ |
|
|
|
2 |
|
¦ |
¦SUM у |
909 |
|
902 |
|
903 |
|
902 |
¦ |
3616 |
|
SUM d = 5,12 ¦ |
|||||
¦ |
i |
|
i,j |
|
|
|
|
|
|
¦ |
|
|
i |
i |
|
¦ |
¦ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
¦ |
_ |
|
|
|
|
¦ |
¦у |
|
|
227,25 |
225,50 |
225,75 |
225,50 |
¦ |
у = 226,00 |
|
|
¦ |
|||||
¦ |
j |
|
|
|
|
|
|
|
|
¦ |
|
|
|
|
|
¦ |
¦d |
|
|
1,25 |
- 0,50 |
- 0,25 |
- 0,50 |
¦ |
|
|
|
|
|
¦ |
|||
¦ |
j |
|
|
|
|
|
|
|
|
¦ |
|
|
|
|
|
¦ |
¦ |
2 |
|
|
|
|
|
|
|
|
¦ |
|
|
2 |
|
|
¦ |
¦d |
|
|
1,5625 |
0,2500 |
0,0625 |
0,2500 |
¦ |
|
SUM d |
= 2,125 |
¦ |
|||||
¦ |
j |
|
|
|
|
|
|
|
|
¦ |
|
j |
j |
|
|
¦ |
L--------------------------------------- |
|
|
|
|
|
|
|
|
+---------------------------- |
|
|
|
|
|
|
|
Таблица II.4.2 Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
-------- |
|
T------ |
|
T--- |
T |
--T------ |
T |
------ |
|
T------- |
T------ |
|
T----- |
|
T---- |
T------ |
|
|
T------ |
|
T------ |
|
¬ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
¦ |
|
¦ |
0 ¦ |
|
¦ 2¦ |
0 ¦ |
|
¦ |
2 |
¦ |
|
¦ |
|
¦ 2 ¦ |
|
|||
¦ |
|
¦ |
2 |
¦ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
¦ |
|
¦ y |
¦ d ¦d ¦ y |
¦ d |
¦ d |
¦ y1 ¦ d ¦ d ¦ y |
||||||||||||
¦ |
d |
¦ |
d |
¦ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
¦ |
|
¦ |
1 ¦ |
|
¦ ¦ |
2 ¦ |
|
¦ |
|
¦ |
|
¦ |
|
¦ |
¦ |
2 |
||
¦ |
|
¦ |
|
¦ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
+------- |
|
+------ |
|
+---+--+------ |
+------ |
|
|
+------- |
+------ |
|
+----- |
|
+---- |
+------ |
|
|
||
+------ |
|
+------ |
|
+ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
¦ |
|
¦ |
222 |
¦ 3 ¦9 ¦ |
229 |
¦ - 1,75 ¦ |
3,0625 ¦ |
222 |
¦ |
0,5 |
¦0,25 ¦ |
235 |
||||||
¦ |
2,25 |
¦5,0625 ¦ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
¦ |
|
¦ |
217 |
¦- 2 ¦4 ¦ |
231 |
¦ |
0,25 ¦ |
0,0625 ¦ |
220 |
¦- 1,5 ¦2,25 ¦ |
231 |
|||||||
¦- 1,75 ¦3,0626 ¦ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
¦ |
|
¦ |
218 |
¦- 1 ¦1 ¦ |
228 |
¦ - 2,75 ¦ |
7,5625 ¦ |
221 |
¦- 0,5 ¦0,25 ¦ |
233 |
||||||||
¦ |
0,25 |
¦0,0625 ¦ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
¦ |
|
¦ |
219 |
¦ 0 ¦0 ¦ |
235 |
¦ |
4,25 ¦18,0625 ¦ |
233 |
¦ |
1,5 |
¦2,25 ¦ |
232 |
||||||
¦- 0,75 ¦0,5625 ¦ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
+------- |
|
+------ |
|
+---+--+------ |
+------ |
|
|
+------- |
+------ |
|
+----- |
|
+---- |
+------ |
|
|
||
+------ |
|
+------ |
|
+ |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
¦Сумма |
¦ |
876 |
¦ |
0 |
¦ 14¦ |
923 |
¦ |
0 |
¦ |
28,75 |
¦ |
886 |
¦ |
0 |
¦ 5 |
¦ |
931 |
|
¦0 ¦ 8,75 ¦
¦Среднее ¦219,00 ¦ |
¦ |
¦230,75 ¦ |
|
¦ |
|
¦221,50 ¦ |
¦ |
||
¦232,75 ¦ |
¦ |
¦ |
|
|
|
|
|
|
|
L |
-------+------ |
+--- |
+--+------ |
+------ |
+ |
-------+------ |
+ |
-----+---- |
+------ |
+------ |
+------- |
|
|
|
|
|
|
|
|
II.5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ АНТИБИОТИКОВ МЕТОДОМ
ДИФФУЗИИ В АГАР НА ЧАШКАХ ПЕТРИ
Описанная в предыдущем параграфе методика определения активности антибиотиков по схеме латинского квадрата предполагает использование лотков. Возможен и другой способ определения этой активности - по диффузии в агар на чашках Петри. Ниже описан трехдозный вариант этого метода <*>.
--------------------------------
<*> Этот раздел основан на разработке Всесоюзного НИИ антибиотиков и Государственного НИИ по стандартизации и контролю лекарственных средств Министерства здравоохранения СССР.
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
|
Стандартный (S) и испытуемый (U) образцы растворяют из расчета |
|||||||||
1 мг в 1 мл (основной раствор), |
затем готовят по три концентрации |
|||||||||
|
|
|
|
|
|
S |
S |
S |
|
|
рабочих |
растворов |
стандарта (D1, |
D2, |
D3) и испытуемого образца |
||||||
U |
U |
U |
|
|
|
|
|
|
|
|
(D1, D2, D3), |
относящиеся друг |
к |
другу как 1:2:4. Все 6 |
|||||||
растворов |
закапывают |
на |
одну |
чашку |
Петри, |
причем |
||||
последовательность внесения |
растворов |
в цилиндры или |
в лунки |
|||||||
должна быть случайной |
(возможные |
последовательности |
внесения |
|||||||
растворов приведены в табл. |
II.5.1). Число чашек n должно быть не |
|||||||||
меньше 6. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Для уменьшения |
влияния |
колебаний |
во времени между внесением |
||||||
различных |
растворов |
рекомендуется |
после |
внесения |
растворов |
|||||
выдерживать чашки в течение 1-2 ч при комнатной температуре. После
|
|
|
|
|
|
|
|
|
S |
|
U |
измерения зон |
угнетения |
роста |
результаты опыта у |
, |
и |
у |
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
i,j |
|
i,j |
(i = 1, 2, 3 - |
номера |
|
доз, |
j = 1, |
2, |
..., |
n - номера чашек) |
||||
записывают в таблицу (как показано в |
приведенном |
ниже |
численном |
||||||||
примере). |
Там |
же |
записывают получаемые |
расчетом |
следующие |
||||||
вспомогательные величины: |
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
S |
|
|
U |
|
|
|
|
|
|
Si = SUM у |
и Ui = SUM у |
|
|
|
|
(II.5.1) |
|||
|
|
j |
|
i,j |
|
j |
i,j |
|
|
|
|
- суммы по чашкам для каждой дозы стандарта и испытуемого образца;
S |
|
U |
|
Tj = SUM у |
+ SUM у |
, |
(II.5.2) |
i i,j |
i |
i,j |
|
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
- |
суммы по всем дозам для |
каждой чашки; |
|
|
|
|
у |
= SUM у |
= (S1 + S2 + |
S3) +(U1 + U2 |
+ U3) = SUM |
Tj |
(II.5.3) |
|
i,j |
i,j |
|
j |
|
|
- суммы всех диаметров зон задержки роста по всем дозам и чашкам.
Далее вычисляют:
S = S1 + S2 + S3 и U = U1 + U2 + U3 |
(II.5.4) |
- суммы всех диаметров зон задержки роста отдельно для стандарта и для испытуемого образца;
L = |
S3 - |
S1 |
и L |
|
= U3 |
- U1 |
(II.5.5) |
|
S |
|
|
|
|
U |
|
|
|
- "линейные контрасты" |
для стандарта и для испытуемого образца; |
|||||||
Q = S1 - 2S2 |
+ |
S3 |
|
и Q |
= |
U1 - |
2U2 + U3 |
(II.5.6) |
S |
|
|
|
U |
|
|
|
|
"квадратичные контрасты" для стандарта и для испытуемого образца.
Для проверки законности дальнейших расчетов следует провести дисперсионный анализ результатов опыта в соответствии с табл. II.5.2, а именно должно получиться F < F(95%; f, fост) для строк 2, 3, 4 и F > F (95%) для строки 1.
Выполнение первого условия одновременно означает, что вариации в этих строках 2, 3, 4 должны рассматриваться как случайные, и поэтому их следует включить в остаточную вариацию, произведя также перерасчет значимости линейной регрессии (кстати, это относится и к вариациям в строках 5 и 6, если они окажутся незначимыми). Разумеется, при указанном перерасчете степени свободы вариаций, включаемых в остаточную вариацию, должны прибавляться к числу степеней свободы последней (fост).
Таблица II.5.1
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.