Хроматография
.pdf31
В Е =Е Д . И з меря ютш иринупиканаполов ине в ы соты (μ0,5), использ уя лупу сд еления ми: μ0,5 = FG. Рассчиты ваютплощ ад ьпикапоформуле:
S,см= μ0,5 ·h
Т аким образ ом, пров од я т из мерения и рассчиты вают площ ад ь всех пя ти пиков на хроматограмме. Расчет сод ержания спиртов в смеси в % провод я тпоформуле:
С i |
= |
S i |
× 100 |
,% |
5 |
||||
|
|
å S n |
|
|
|
|
n = 1 |
|
|
Е сли при получении хроматограммы |
д ля каких-либо компонентов |
|||
из меня ем д иапаз онз аписи– э тод олжнобы тьучтеноприрасчетеплощ ад и
пика(ееумножаютнасоответствующ ий д иапаз он). |
|
||||
Рез ультаты |
оформля ютв вид етаблицы : |
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
В ы сотапика, |
Ш ирина пика |
П лощ ад ь |
Сод ержание |
|
К омпонент |
|
h, см |
на полов ине |
пика, S, см 2 |
компонентав |
|
|
|
в ы соты , μ0,5,см |
|
смеси, % |
М етанол |
|
|
|
|
|
Э танол |
|
|
|
|
|
ит.д . |
|
|
|
|
|
Ла б ора торна я ра б ота № 2. |
|
|
И де нти фи ка ц и я угле ки слот ы в п ри родномга зе и |
оп ре де ле ни е е е |
|
коли ч е ст ва ме т одомга зовой хрома тогра фи и |
||
Ц е ль ра бот ы : приобретение |
навы ков работы |
на газ овом |
хроматографе, овлад ение способами |
качественной и |
количественной |
обработкиполученны х хроматограмм. |
|
|
При боры и ре а кт и вы :
1.Х роматограф сд етектором потеплопровод ности.
2.Ш прицмед ицинский на5 мл.
3.Л упаиз мерительная сценой д еления 0,1 мм, линейка.
4.А нализ ируемая смесь.
У словия хроматографиров ания : колонка д линой 3 м, д иаметром –
3 мм; сорбент - носитель – д иатомитовы й кирпич; |
непод в ижная |
жид кая |
фаз а– э фир 3-э тиленгликоля и н-масля ной кислоты |
в количестве 20 % от |
|
в еса носителя ; газ -носитель – гелий; температура колонки – 20 |
о |
|
± 2 С; |
||
32 |
|
скорость газ а-носителя – 35 мл/мин; cкорость д иаграммной ленты |
– |
720 мм/час; токд етектора – 110 мА ; объем пробы – 3 мл. |
|
Вы полне ни е ра бот ы |
|
П од готавливают прибор к работе, как указ ано в инструкции. |
В |
ш приц отбирают 3 мл пробы и ввод я т ее в колонку, прокалы вая иглой ш прицапробкуд оз атора. П роиз вод я тз аписьхроматограммы . П ерв ы й пик основного компонента смеси з аписы вают в положении тумблера чувствительности 64. П ри вы ход е пера самописца на нулев ую линию
мгновенно переключают тумблер в |
положение 8. |
П ри прав ильном |
||
соблюд ении услов ий анализ а хроматограф вы писы вает 6 |
пиков, од ин из |
|||
них – пик углекислоты . |
|
|
|
|
Д ля ид ентификации углекислоты |
снимают вторую хроматограмму, |
|||
в вод я в |
колонку смесь 3,0 мл природ ного газ а и 0,1 |
мл углекислоты |
||
(чистой). |
П роисход ит увеличение третьего пика хроматограммы , что |
|||
указ ы ваетнаприсутств ие в природ ном газ еуглекислоты . |
|
|
||
В ы числение процентного сод ержания углекислоты |
произ вод я т по |
|||
первой хроматограмме. Д ля э тоговы числя ют площ ад ь пика кажд огоиз компонентов поформуле:
S = h ·μ 0,5 , гд е h – вы сотапика, μ0,5 – ш иринапиканаполов ине его
вы соты .
Процентноесод ержание углекислоты рассчиты ваютпоформуле:
|
С О 2 = |
SСО 2 |
× |
, 100 |
) |
,%( |
|
|
|||||
|
|
å S |
|
|
|
|
гд е Σ S – суммаплощ ад ей всех пиков, SСО 2 – площ ад ьпикауглекислоты . |
||||||
|
И О НО О БМ ЕННА Я Х РО М АТО ГРАФ И Я |
|
||||
М |
етод ионообменной |
хроматографии основан на использ овании |
||||
я в ления |
ионного обмена |
межд у непод в ижной |
тверд ой фаз ой – |
|||
ионообменником (сорбентом) и под вижной жид кой фаз ой |
– раствором, |
|||||
сод ержащ им ионы , обмениваемы есионамисорбента. |
|
|
||||
И онны й обмен – э тогетерогенны й процесс, при котором сорбент и |
||||||
наход я щ ийся с ним в контакте раствор обратимо и стехиометрически обменивается од ноименно(од ногоитогожез нака) з аря женны миионами.
|
С орб е нт ы |
В ещ еств а, |
применя емы е в качестве ионообменны х сорбентов, |
под раз д еля ются |
на д в а основ ны х класса: неорганические и органические |
сорбенты , которы е могут бы ть естественного и искусственного происхожд ения .
33
И онообменны есорбенты д олжны отв ечатьслед ующ им требования м:
• облад атьмаксимальновоз можной поглотительной способностью;
• облад ать из бирательной сорбцией по отнош ению к вещ еств ам раз д еля емой смеси;
• бы тьод нород ны ми, иметьстепеньд исперсности, д остаточную д ля обеспечения необход имой скоростисорбцииирав номерногопрохожд ения
растворачерез колонкустребуемой скоростью; |
|
|
||
• иметь ограниченную набухаемость, |
облад ать |
механической |
||
прочностью. |
|
|
|
|
Н аиболее |
важны м |
пред ставителем |
группы |
минеральны х |
ионообменников |
я в ля ются |
це оли т ы , способны е к обмену катионов. |
||
Ц еолиты облад аютправ ильной пространственной сетчатой структурой со сравнительнобольш ими расстоя ния ми межд ууз лами реш етки. О ни мало набухают и под в ижность противоионов в их порах очень мала. У многих цеолитов ограниченаспособностьпоглощ атьря д крупны х неорганических
ионов. В се |
неорганические катионообменники, |
в |
том числе и |
||
синтетические, |
раз лагаются кислотами, |
щ елочами |
и |
поэ тому могут |
|
применя ться тольков нейтральны х раств орах. |
|
|
|
||
Синтетические ионообменны е |
смолы |
пред став ля ют собой |
|||
искусственнополученны е органические вы сокомолекуля рны е соед инения , ограниченнонабухающ ие в вод ны х растворах э лектролитов иоблад ающ ие ионообменны ми св ойствами. И онообменники получают путем полимериз ации или конд енсации мономеров, причем в процессе синтез а
или путем обработки готового полимера им |
прид ают ионообменны е |
свойств а. И онообменники состоя т из матицы , |
в которой распред елены |
ионогенны е группы , включающ ие фиксиров анны е, прочно св я з анны е в матрице ионы и менее прочно свя з анны е противоионы (т.е. ионы противоположногоз нака), способны е к отщ еплению отионообменникаик переход ув раствор.
И онообменники, |
обменивающ иеся катионами раствора, наз ы ваются |
||
ка т и онообме нни ка ми , |
а ионообменники, обменивающ иеся |
анионами |
|
раствора, - а ни онообме нни ка ми . |
Амф от е рны е и онообме нни ки (а мф оли т ы ) |
||
способны обмениваться сраствором как катионами, так ианионами. |
|||
О т степени д иссоциации |
ионогенны х групп з ависит, |
насколько |
|
сильно вы ражены основ ны е |
или кислотны е свойств а ионитов. В |
||
соответствии с э тим |
раз личают след ующ ие группы ионообменников |
||
(табл.):
34
|
|
Н екоторы етипы ионообменны х смол |
|
Т аблица |
||||
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|||
Т ип сорбента |
И оногенная |
П од в ижны е |
И нтервал |
М |
арка |
|||
|
|
группа |
ионы |
H+ |
рН обмена |
сорбента* |
||
Сильнокислотны й |
|
-SO3H |
|
0-14 |
|
К У -1, |
||
катионит |
|
|
|
H+ |
|
К У -2, СД В |
||
Сред некислотны й |
-PO(OH)2 |
|
4-14 |
|
К Ф |
|||
катионит |
|
|
|
H+ |
|
|
|
|
Слабокислотны й |
-COOH, -OH |
|
7-14 |
К Б-2, К Б-4 |
||||
катионит |
-CH2N(CH3)3+ |
|
Cl- |
|
|
|
||
Сильнооснов ны й |
|
0-14 |
|
А В -17, |
||||
анионит |
-NH3+OH - |
OH- |
|
|
А В -18 |
|||
Слабооснов ны й |
0-7 |
|
А Н -23, |
|||||
анионит |
|
|
|
|
|
|
А Н -2Ф |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
* |
К У -катионообменник |
унив ерсальны й, |
СД В |
– стиролд ив инилбенз ол, |
||||
К Ф |
– катионообменник |
фосфонов окислы й, |
К Б – |
катионообменник |
буферны й, |
|||
А В – анионообменникв ы сокооснов ны й, А Н – анионообменник низкооснов ны й.
О бменная емкость характериз ует способность ионообменников к ионномуобмену. О на опред еля ется числом ммоль обмениваемы х ионов, приход я щ ихся на1 гсухогоилина1 мл(1 см3) набухш егоионообменника.
О бменная емкость з ав исит от природ ы |
и числа ионогенны х групп, |
их |
|||||||||||
способностик иониз ации, температуры |
и некоторы х д ругих факторов . Д ля |
||||||||||||
наиболее распространенны х |
ионообменников обменная |
емкость равна |
|||||||||||
2-10 ммоль/г. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
Ла б ора т орна я ра б ота № 1. |
|
|
|
|
||||
|
|
О п ре де ле ни е соде рж а ни я суль фа та на т ри я |
|
|
|
||||||||
|
Ц е ль |
р а бот ы : |
опред еление |
сод ержания |
сульфата |
натрия |
в |
||||||
анализ ируемом растворе |
метод ом кислотно-основ ного титров ания |
с |
|||||||||||
применением ионногообмена. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
|
Сущ ност ь ра бот ы . |
|
Через слой |
катионообменника в |
вод ород ной |
||||||||
форме |
(RН ) или анионообменника |
в гид роксильной |
форме |
(RО Н ) |
|||||||||
пропускают |
анализ ируемы й |
раствор |
сульфата |
натрия . |
П ри |
э том |
|||||||
происход итреакция обменамежд ураствором иионообменником: |
|
|
|||||||||||
|
накатионообменнике 2RН + Na2SO4 = 2RNa + H2SO4; |
|
|
|
|
||||||||
|
наанионообменнике 2ROH + Na2SO4 = R2SO4 + 2NaOH |
|
|
|
|||||||||
|
О браз овав ш уюся |
в |
рез ультате |
реакции кислоту или щ елочь в |
|||||||||
количестве, э кв ивалентном в з я той соли, |
оттитровы ваютсоответств ующ им |
||||||||||||
35 |
|
|
|
||
станд артны м раствором с инд икатором |
метиловы м |
оранжевы м |
или |
||
фенолфталеином. |
|
|
|
||
|
О боруд ов ание иреактив ы : |
|
К У -2 (в |
Н -форме) |
или |
|
1. К олонка с катионообменником |
||||
анионообменником А В -17 (в О Н -форме).
2.М ерны еколбы емкостью 100,00 и200,00 мл.
3.К оническиеколбы д ля титрования емкостью 100,00 мл.
4.П ипеткиемкостью 10,00 и20.00 мл.
5.Сульфатнатрия , Na2SО 4, 0,25 М раствор.
6. |
Соля ная кислота, Н Сl, 0,05 М раствор(или NаО Н ). |
|
7. |
И нд икаторы метиловы й оранжев ы й илифенолфталеин. |
|
В ы полнениеработы |
|
|
К олонку с ионообменной смолой |
промы вают перед работой |
|
небольш им количеством д истиллированной |
в од ы . У ровень жид кости в |
|
колонке, |
готов ой к работе, д олжен бы ть на 0,3-0,5 см в ы ш е слоя |
|
ионообменника. Н еобход имо помнить, что в слой ионообменника не
долженпопад атьвоз д ух!
Вмерную колбуемкостью 100,00 мл пипеткой отмеря ют 20,00 мл исход ного0,25 моль/лрастворасульфатанатрия . Д истиллированной вод ой
довод я тобъем жид костид ометкииперемеш ив ают.
П риготовленны й раствор Na2SO4 |
пропускают через слой |
ионообменника, приливая небольш ими |
порция ми. В ы текающ ий из |
колонки э люат собирают в мерную колбуемкостью 200,00 мл. Скорость пропускания раствора д олжна бы ть около 2 мл/мин. М ерную колбу, в
которой наход ился |
анализ ируемы й раствор, |
несколькораз ополаскив ают |
||
небольш ими порция ми д истиллированной |
вод ы |
и промы в ны е в од ы |
||
пропускают через |
ионообменник. Затем сорбент промы вают 50-80 |
мл |
||
в од ы , объем в колбесфильтратом д ов од я тд ометкииперемеш ивают. |
|
|||
В колбу д ля |
титров ания отбирают пипеткой |
емкостью 10,00 |
мл |
|
аликвотураствора, прибавля ют2-3 капли инд икатораи титруют(Н Сl или NaOH) д оиз менения окраски. Т итрование пров од я т 5-7 раз . П олученны е д анны е под в ергают статистической обработке и в ы числя ют количеств о сульфатанатрия поформуле:
( |
2 SO4m), мгNa= |
Э ( |
2 SO4 ) МNaS VS× ×V |
, |
× |
|
V1 |
|
|||
|
|
|
|
|
гд е М S, VS – моля рность и объем (мл) титранта; V1 – объем аликвоты , в з я той д ля титрования (мл); V – объем э люента(мл).
36
Ла б ора т орна я ра б ота № 2.
Ра зде ле ни е и онов ци нка и ни ке ля на а ни онооб ме нни ке
Ц е льра бот ы : раз д еление смеси катионов цинка Zn2+ иникеля Ni2+ наанионообменнике А В -17-8 в хлорид ной форме метод ом ионообменной хроматографии с послед ующ им опред елением комплексонометрическим титрованием.
Сущ ност ь ра бот ы . В д анном метод е раз д еление катионов цинка и никеля основ анонаспособностиионов цинкаZn2+ образовы ватьв растворе
хлористовод ород ной кислоты |
комплексы |
состава[ZnCl3]-. И оны |
никеля |
||||
Ni2+ в э тих |
же услов ия х |
под обны х |
комплексов |
не образ уют. П ри |
|||
пропускании через колонку с анионообменником в |
хлорид ной |
форме |
|||||
соля нокислого раствора, |
сод ержащ его комплексны е анионы [ZnCl3]- и |
||||||
катионы |
никеля Ni2+, перв ы е поглощ аются сорбентом, а катионы |
никеля |
|||||
остаются |
в |
растворе. |
П оглощ ение |
хлорид ного |
комплекса |
цинка |
|
анионообменником в хлорид ной формеможнопред став итьурав нением: RCl + [ZnCl3]- R[ZnCl3] + Cl-
Н е поглощ енны е анионообменником катионы никеля , не з ад ерживая сь, в ы ход я тиз колонки. П ослед ующ ее из в лечение ионов цинка из анионообменника осущ еств ля ют, промы вая его д истиллированной в од ой. П риэ том хлорид ны й комплексцинкараз руш ается икатионы цинка д есорбируются (переход я тв фильтрат).
О борудова ни е и ре а кт и вы :
1. |
Х роматографическая колонка в ы сотой не менее 30 см, |
|
д иаметр1 см. |
2. |
М ерны еколбы емкостью 25,00 мл(12 ш т.). |
3.Стаканемкостью 100 мл.
4.А нионообменник А В -17-8 в хлорид ной форме.
5. |
Соля ная кислота, Н Сl, 2 М (300 мл) и4 М (50 мл) растворы . |
|
6. |
Сульфатцинка, ZnSO4, 0,25 М |
раствор. |
7. |
Сульфатникеля , NiSO4, 0,25 М |
раств ор. |
8.Т рилонБ, 0,25 М раствор.
9.Д иметилглиоксим, (СН 3)2C2N2(OH)2.
10.А ммиак NH3, 5%-ны й раств ор.
11.Гексацианоферрат(II) калия , К 4[Fe(CN)6].
12.А ммонийная буферная смесь.
13.А цетатная буферная смесь.
14. М урексид (сухой инд икатор – смесь с хлорид ом натрия в отнош ении1:100).
15.К силенолов ы й оранжев ы й (сухой инд икатор – смесьс хлорид ом натрия в отнош ении1:100).
|
|
|
37 |
|
|
Вы полне ни е ра бот ы |
|
|
|
|
|
В |
стакан емкостью 100 мл помещ аютпо10,0 мл (пипеткой) 0,25 М |
||||
растворов ZnSО 4 и NiSО 4 |
и приливают50 мл (цилинд ром) 4 М раствора |
||||
Н Сl. П олученны й раствор я вля ется |
2 М |
похлористовод ород ной кислоте. |
|||
И оны |
цинка наход я тся |
в нем |
в |
в ид е отрицательно |
з аря женны х |
комплексны х анионов . |
|
|
|
|
|
В |
колонку з агружают 15 |
мл анионообменника в |
Cl-форме и |
||
промы в аютего50 мл 2 М |
раствора хлористовод ород ной кислоты , чтобы |
||||
концентрация ее в колонке бы ла не менее 2 моль/л. У ров ень жид кости в
колонке, готовой |
к работе, д олжен |
бы ть |
на 0,3 см в ы ш е слоя |
ионообменника. ( |
Н еобход имо помнить, |
что в |
слой ионообменника не |
д олженпопад атьвоз д ух!). Затем через слой сорбентапропускаютраствор, сод ержащ ий ионы цинка и никеля , приливая егонебольш ими порция ми. Скоростьпропускания раств орад олжнабы ть1 мл/мин (1-2 капли в сек.).
Стакан, |
в |
котором |
наход ился анализ ируемы й |
раствор, |
несколько раз |
||||||||||
ополаскивают |
небольш ими |
порция ми |
2 М |
раствора |
Н Сl |
и тоже |
|||||||||
пропускаютчерез ионообменник. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
В ы текающ ий из колонкираств орсобираютв мерны еколбы |
на25 мл |
||||||||||||||
и в |
кажд ой |
из |
них |
опред еля ют |
|
концентрацию |
ионов |
никеля |
|||||||
комплексонометрическим |
метод ом. Д ля |
полного в ы мы в ания |
Ni2+ из |
||||||||||||
анионообменника через |
колонкупропускают 2 |
М раствор Н Сl, |
которы й |
||||||||||||
тоже собирают в мерны е колбы . |
П ромы вку кислотой прекращ ают, как |
||||||||||||||
только в |
в ы текающ ем |
из |
колонки растворе |
ионов |
никеля |
не буд ет |
|||||||||
обнаружено. П олноту в ы мы вания |
из |
анионообменника ионов |
никеля |
||||||||||||
проверя ют по реакции с д иметилглиоксимом. |
Д ля |
э того отбирают на |
|||||||||||||
часовое стекло или в |
пробирку 1-2 |
капли в ы текающ его из |
колонки |
||||||||||||
раствора, |
добавля ют 2-3 |
капли раствора аммиака и каплю |
раствора |
||||||||||||
д иметилглиоксима. В |
присутств ии ионов никеля вы пад аеткрасны й осад ок |
||||||||||||||
д иметилглиоксиматаникеля . |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||
Д ля |
из в лечения |
|
ионов |
цинка |
анионообменник |
промы в ают |
|||||||||
д истиллированной вод ой. Ф ильтраттакже собираютв мерны е колбы на25 мл и в них опред еля ют концентрацию ионов цинка метод ом комплексонометрии. П ромы вкувод ой слоя сорбентапровод я тд ополного уд аления из него ионов цинка. П олноту из в лечения ионов цинка из анионообменника проверя ют реакцией с гексацианоферратом(II) калия К 4[Fe(CN)6]. В присутств ииZn2+ вы пад аетбелы й осад ок Zn2[Fe(CN)6].
К омплексонометрическоеопред елениекатионов никеля ицинка
О пред еление ионов никеля Ni2+. К 10,0 млфильтратаприбавля ют50 мл д истиллиров анной вод ы , 5 мл 5%-ного раств ора аммиака (д ля нейтрализ ации кислоты ), 10 мл аммиачногобуферногораствора(рН 10), немногосухогоинд икаторамурексид аи титруютраствором трилонаБ д о переход ажелто-оранжевой окраскирастворав я рко-сиренев ую.
О пред еление ионов цинка Zn2+. К 5,0 мл фильтратаприбав ля ют 50 мл д истиллированной в од ы , 10 мл ацетатной буферной смеси (рН 5),
38
немного сухого инд икатора ксиленолов ого оранжев ого и титруют д о переход амалиновой окраскирастворав желтую.
Расчет концентрации ионов никеля и цинка в растворе (ммоль/мл) провод я тпоформуле:
Сх = Vт Ст / Vх ,
гд е Vт – объем титранта (мл); Ст – концентрация титранта; Vх – объем титруемогораствора.
Рез ультаты титрования ионов никеля и цинка пред став ля ют в вид е таблицы :
О бъем раств ора, прош ед ш егочерез колонку, мл
О бъем раств ора |
К онцентрация ионов |
трилонаБ, пош ед ш его |
Ni2+ илиZn2+ в растворе, |
натитрование |
ммоль/мл |
аликв оты , мл |
|
|
|
П о полученны м э кспериментальны м д анны м |
строя т в ы ход ную |
крив ую в коорд инатах Сф – V, гд е Сф – концентрация опред еля емы х ионов |
|
в фильтрате, V– объем раствора, пропущ енны й через |
колонку. В ы ход ная |
кривая д олжнаиметьд вапика, принад лежащ иеинд ивид уальны м ионам.
О б э ффекте раз д еления ионов никеля и цинка наанионообменнике А В -17-8 в хлорид ной форме можносуд ить, сопостав ив общ ие количеств а раз д еля емы х ионов, опред еленны е в фильтрате QZn и QNi с их
количествами, вз я ты мид ля раз д еления QoZn иQoNi (ммоль), т.е. рассчитать массовы й коэ ффициентраспред еления Dm=Q/Qo д ля ионов цинкаиникеля .
Степень раз д еления д в ух компонентов можно количественно оценитькритерием раз д еления К разд :
К ра зд = |
V2 −V1 |
= |
V2 −V1 |
|
|
, |
W +W |
μ + μ |
)52( |
||||
1 2 |
|
|
, 0 5(1) 0, |
|||
гд е W – ш ирина пика; μ0,5 – ш ирина пика на полов ине егов ы соты . Д ля успеш ногораз д еления ионов критерий раз д еления д олжен бы ть больш е
ед иницы .
39
БУ М АЖ НАЯ И ТО НКО С ЛО Й НАЯ Х РО М АТО ГРАФ И Я
|
К |
плоскостны м |
вид ам |
хроматографии относя т бумажную (БХ ) |
и |
|||||||
тонкослойную (Т СХ ). Э тид вав ид ажид костной хроматографиипросты |
по |
|||||||||||
технике |
в ы полнения , |
э кспрессны , |
не |
требуют |
д орогостоя щ его |
|||||||
оборуд ования . |
Х роматографическое |
раз д еление в |
плоскостны х в ид ах |
|||||||||
хроматографии, как и в |
колонке, обусловлено переносом компонентов |
|||||||||||
под вижной фаз ы |
вд ольслоя непод вижной фаз ы |
сраз личны мискоростя ми |
||||||||||
в соответствии с |
коэ ффициентами распред еления |
раз д еля емы х |
||||||||||
компонентов. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
Носи те ли , ра створи те ли |
|
|
|
||||
|
Н осители. |
|
В |
|
распред елительной |
хроматографии д олжны |
||||||
применя |
ться такие носители, |
которы е хорош оуд ерживают непод в ижны й |
||||||||||
растворитель |
и |
инертны |
к |
под в ижному |
растворителю |
и |
||||||
хроматографируемы м |
вещ ествам. И д еальны х |
носителей |
не сущ еств ует. |
|||||||||
Более или менее уд овлетворя ютэ тим требования м особопод готовленны е
силикагель, крахмал, |
тальк, целлюлоз а и д р. В |
бумажном |
в арианте |
||||||
носителем я в ля ется |
фильтровальная |
бумага. |
П ри |
вы боре |
сорбентов- |
||||
носителей напрактикеисход я тиз свойств раз д еля емы х вещ еств . |
|
||||||||
Си ли ка ге льобраз уетпрочноприлипающ ий в ы сокоактивны й кислы й |
|||||||||
слой носителя . |
Е гополучают д ействием минеральны х кислот, |
например |
|||||||
HCL, наконцентриров анны ерастворы силикатанатрия . |
|
|
|||||||
О кси д а люми ни я образ уетпрочноуд ерживающ ийся слабооснов ной |
|||||||||
слой носителя , |
пригод ны й д ля |
раз д еления |
нейтральны х и |
основ ны х |
|||||
соед инений. Св ойства э того |
сорбента |
можно из менить |
|
под бором |
|||||
растворителя , суш кой ид обавкой примесей. |
|
|
|
|
|
||||
Ки зе льгур |
д ает практически неактив ны й, прочноуд ержив ающ ийся |
||||||||
слой носителя , |
пред наз наченны й д ля |
четкогораз д еления гид рофильны х |
|||||||
соед инений, атакжеамфотерны х ионов. |
|
|
|
|
|
||||
Кра х ма л. |
Д ля |
распред елительной |
хроматографии |
применя ют |
|||||
очищ енны й крахмал. Сы рой картофельны й крахмалотмы в аютна воронке д оотрицательной реакции с нингид рином, вы суш ивают при комнатной температуре, з атем промы ваютн-бутилов ы м спиртом, насы щ енны м вод ой. О чистку крахмала от з ольны х примесей провод я т с помощ ью
электрод иализ а.
Це ллюлоза . В лабораторны х условия х целлюлоз ную массу можно приготов итьиз фильтров альной бумагимарки«без з ольны й фильтр».
Б ума га . Д ля |
распред елительной |
хроматографии применя ют |
специальную бумагу, |
приготовленную из |
в ы сокосортного хлопка. О на |
должнаотвечатьслед ующ им требования м:
•бы ть химически чистой. С э той целью бумагу пред варительно
обрабаты в ают раз личны ми реагентами (трилоном Б, 8-оксихинолином, аминоуксусной кислотой), которы е образ уют растворимы е комплексны е
40
соед инения с неорганическими примеся ми бумаги, которы е в ы мы ваются в од ой;
• бы ть по воз можности химически и ад сорбционно инертной по отнош ению к хроматографируемому раствору и под в ижному растворителю;
•бы тьод нород ной поплотности;
•д аватьчеткоераз д елениестанд артногонаборааминокислот;
•обеспечив атьопред еленную скоростьд вижения растворителя при
нисход я щ ей хроматограмме.
Растворители. П ри в ы боре растворителя необход имо учиты вать
след ующ ие прав ила. В ы бираюттакой под вижны й растворитель, в котором
компоненты , |
под вергающ иеся |
|
раз д елению, |
имеют |
небольш ую |
|||||||
растворимость. |
В |
качестве |
|
|
под в ижны х |
растворителей |
д ля |
|||||
в од орастворимы х в ещ еств |
использ уются |
органические растворители или |
||||||||||
их смеси, насы щ енны е вод ой. Д ля |
вещ еств, растворимы х в органических |
|||||||||||
растворителя х, |
но нераств оримы х |
|
в |
вод е, использ уют насы щ енны е |
||||||||
растворы |
органических растворителей. |
Состав |
раствора д олжен бы ть |
|||||||||
постоя нны м при д в ижении растворителя по бумаге. Раств оритель не |
||||||||||||
д олжен бы ть в ред ны м |
вещ еством. |
П ри под боре растворителей след ует |
||||||||||
учиты ватьслед ующ иетребования : |
|
|
|
|
|
|
|
|||||
• |
растворитель д олжен полностью раз д еля ть в ещ ества близ кого |
|||||||||||
строения , причем раз личие в в еличине Rf д олжнобы тьне менее 0,05; |
|
|||||||||||
• |
из отерма распред еления |
в ещ ества в в ы бранном раств орителе |
||||||||||
д олжна бы ть линейной, пя тна д олжны |
иметь круглую форму и после |
|||||||||||
раз д еления з аниматьтуже площ ад ь, |
|
чтои принанесении. Ф ормапя тенне |
||||||||||
д олжнаиз меня ться сконцентрацией; |
|
|
|
|
|
|
||||||
• |
растворитель |
не |
д олжен |
в ы з ы вать |
химических |
из менений |
||||||
анализ ируемы х в ещ еств; |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
• |
растворитель |
не |
д олжен |
вз аимод ейств овать с |
реактивом, |
|||||||
применя емы м д ля проя в ления , |
или понижать чувствительность реакции |
|||||||||||
проя в ления ; |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
• |
состав |
растворителя |
д олжен |
бы ть |
постоя нны м |
и |
легко |
|||||
в оспроиз вод имы м; |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
• |
анализ ируемы е вещ ествад олжны иметьраз личны е з начения Rf и |
|||||||||||
распред еля ться повсей д лине хроматограммы . |
|
|
|
|||||||||
|
|
|
Ка ч е стве нны й |
а на ли з |
|
|
|
|||||
П рощ е всегоид ентификация |
вещ ества в Т СХ может бы ть сд елана, |
|||||||||||
если пя тноопред еля емогов ещ ества имеет характерную окраску. О д нако
числотаких вещ еств , особенноорганических, невелико. |
Н аиболее общ ий |
||
под ход к качественному анализ у |
основ ан на |
з начения х Rf. |
|
Х роматографическая |
под вижность |
я в ля ется |
чувств ительной |
характеристикой вещ ества, од нако она сущ ественноз ав исит от услов ий опред еления . Э та труд ность преод олевается путем провед ения опы та в строго фиксированны х станд артны х условия х, которы е регламентируют