- •С.Н.Федоткина
- •Тема «эпизоотологическое исследование рыбохозяйственных хозяйств и клиническое обследование стада рыб»
- •Ветеринарно-санитарный паспорт рыбоводного хозяйства
- •1.Характеристика хозяйства (рыбопромыслового водоема)
- •2.Сведения о завозе в хозяйство (рыбопромысловый водоем)
- •Ветеринарно-санитарное обследование рыбоводных хозяйств
- •Клиническое обследование стада рыб
- •Тема «лабораторные исследования»
- •Тема« патоморфологические исследования рыб»
- •Тема «паразитологические исследования рыб»
- •Порядок полного паразитологического исследования рыбы
- •Наружный осмотр рыбы
- •Исследование внутренних органов рыбы
- •К стенке скребнями Echinorhynchus salmonis в нижней половине участка скребни сняты и видны изъявления в местах прикрепления (по Догелю)
- •(По Догелю)
- •Ихтиопатология. Раздел. Инвазионные болезни рыб практикум
- •400002,Волгоград,пр.Университетский,26
Исследование внутренних органов рыбы
Кровь. При наружном осмотре рыбы местоположение сердца определяется положением узкого мыса брюшной стенки тела между жаберными крышками. Кровь «берут непосредственно из сердца пипеткой Пастера, предварительно очистив от чешуи место ее введения
Для изготовления мазка капля крови на совершенно чистое (обезжиренное) предметное утекло на расстоянии нескольких миллиметров от его узкого правого края. Другое предметное стекло, желательно шлифованное, ставится под острым углом на первое и подводится к капле до соприкосновения с ней. Когда в силу капиллярности кровь растечется по краю шлифованного стекла, последнее двигают влево от капли, и она тонким слоем равномерно распределяется по стеклу (рис. 7).
Рис.7.Изготовление сухого мазка крови.
Рис.
9. Изготовление сухого
мазка
крови. *
Мазок высушивается на воздухе (оберегать от пыли и от мух) и фиксируется в цилиндрическом стаканчике метиловым спиртом или равной смесью этилового спирта с эфиром в течение 5 мин. После фиксации стекло вновь высушивают и хранят в сухом месте, завернув в бумагу и снабдив соответствующей этикеткой. Номер исследованной рыбы дополнительно пишется восковым карандашом на обратной стороне стекла. В случае невозможности произвести фиксацию мазка тотчас же после его изготовления, ее можно отложить, но не более, чем на две недели. Окраску мазков рекомендуется производить не позже, чем через 2—2.5 месяца после фиксации.
В крови у рыб паразитируют простейшие — жгутиконосцы Trypanosotna и Trypatwplasma. Они встречаются главным образом в крови ложной жабры и сосудах почек и при сильном заражении вызывают злокачественную анемию.
Жабры. Жаберный аппарат рыб бывает особенно часто поражен различными паразитами. Для паразитологического исследования снимают жаберную т крышку и ножницами вырезывают жабры одной стороны головы. При этом рыбу следует держать вертикально, головой кверху, иначе кровь зальет жабры, что весьма затруднит дальнейшую обработку. Жаберные дуги с жаберными лепестками отрезают по очереди и рассматривают их в часовом стекле под лупой, перебирая лепестки препаровальными иглами и следя за тем, чтобы они были покрыты водой. Если жабры малы, их просматривают целиком, не разъединяя. Bo время осмотра можно обнаружить белые цисты слизистых споровиков, метацеркарий Bucephalus с просвечивающим изнутри черным выделительным пузырем, Neascus, Metorchis и Ascocotyle достигающих половозрелости в рыбоядных птицах, паразитических рачков.(рис.8).
Рис.8. Жабра судака с сидящими на ней
рачками Achteres pernarum. (По Маркевичу
паразитических личинок моллюсков—унионид, моногенетических сосальщиков и растительных паразитов (Saprolegnia и Branchiomyces). В основании жаберных дуг попадаются крупные темные цисты Clinostomum cotnplanatum, заканчивающие свое развитие в ротовой полости цапель. В основании жаберных лепестков располагаются цисты Echinostotnidae, хорошо отличимые по крупным светопреломляющим шипам на переднем конце личинки. Паразитов снимают с жабер иглами, тонким пинцетом, тонко оттянутой пипеткой или соскабливают скальпелем и раскладывают по солонкам. Моногенетических сосальщиков, отмыв от слизи, следует перенести пипеткой в солонку с водой, после чего осторожно заменить воду 4°/0-м формалином. Острыми ножницами отрезают от дуги лепестки у их основания и, разбирая их препаровальными иглами, выявляют паразитов, оставшихся незамеченными. Затем на разъединенные лепестки кладут предметное стекло, сдавливают их и рассматривают под малым увеличением микроскопа. Это дает возможность дополнительно обнаружить инфузорий, отдельные споры слизистых споровиков, треугольные яйца паразитов кровеносной системы Sanguinicola и личинок моногенетических сосальщиков.
У акуловых рыб (акулы, скаты), у которых отсутствует жаберная крышка и имеются жаберные мешки, обследование на жаберных паразитов проводится несколько иначе, чем у костистых рыб. У небольших акул и скатов острым ножом следует вырезать ту область тела, где расположены жаберные мешки. После этого ножницами или острым скальпелем вскрывается каждый жаберный мешок, начиная от его наружного отверстия. Жаберные лепестки просматриваются под лупой и бинокуляром, каждый лепесток в отдельности. На жабрах акуловых рыб весьма обычны крупные моногенетические сосальщики из рода Rajonchocotyle и др., а также паразитические веслоногие рачки (род Ommatocoita и др.). У крупных акул вырезать всю область с жаберными мешками затруднительно. У них каждый жаберный мешок
вскрываетс в отдельности - ножницами, после чего просматриваются жаберные лепестки.
Жаберные паразиты весьма опасны для рыб, особенно для молоди, и часто вызывают смертельные эпизоотии не только в прудовых хозяйствах, но и в естественных водоемах. На изъязвленных местах обычно поселяется грибок Saprolegnia, и рыба быстро гибнет. Яйца сосальщика Sanguitiicola закупоривают просветы жаберных капилляров, нарушают правильный процесс кровообращения, ткани мертвеют и вслед за этим заражаются гнилостными бактериями. Сильное заражение паразитическими рачками, кроме разрушения жаберной ткани, вызывает у рыбы злокачественное малокровие. Возбудителем известного в рыбных хозяйствах заболевания—дактилогироза, при котором рыба погибает от удушья, является моногенетический сосальщик Dactylogyrus vastator (рис. 9).
Рис.9. Два жаберных лепестка
карпа сидящими на них Dactylogyrus vastator(1)
и Dactylogyrus anchoratus (2) (Из Догеля).
Обычно в полевых условиях, за недостатком времени, исследуется лишь одна половина жаберного аппарата. Вторая половина фиксируется 4%-м формалином и с этикеткой укладывается либо в пробирку, если позволяют ее размеры, либо заворачивается в марлевую салфеточку, обвязывается ниткой и опускается в материальную банку с 4%-м формалином.
В крайних случаях, при обнаружении очень большого числа паразитов того или иного вида и недостатке времени для сбора, учитывая, что вторая половина жабер будет исследована дополнительно, можно собрать не всех паразитов, а 2—3 десятка для фиксации, остальных же только - подсчитать.
Фиксированных моногенетических сосальщиков, ввиду их малых размеров, рекомендуется не сохранять в пробирках, а сразу же заделывать в глицерин-желатиновые препараты. Червя помещают на предметное стекло в маленькой капле формалина, затем сверху иглой или скальпелем кладут небольшой кусочек глицерин-желатина. Стекло слегка нагревается на спиртовке до расплавления глицерин-желатина и затем покрывается покровным стеклом. Края последнего впоследствии рекомендуется обвести канифольной замазкой (это можно сделать и через несколько месяцев). Препараты в глицерин-желатине сохраняются очень долго. Препарат снабжается двумя этикетками, которые приклеиваются на оба конца покровного стекла.На одной из них пишется название паразита, на другой номер вскрытия, название рыбы и орган, дата вскрытия, географическое место исследования и фамилия сборщика.
Ротовая полость. В ротовой полости, которую исследуют вслед за жабрами, (например Salmincola), моногенетические сосальщиками. (например Nitzschia sturionis, рис. 10), цисты Neascus cuticolau других сосальщиков. У щук и некоторых других хищных рыб иногда встречается выползающий из желудка в ротовую полость, после смерти рыбы, крупный сосальщик Azygia lucii. Рачков следует снимать осторожно, чтобы не оторвать орган прикрепления.
Рис. 10. Глотка аральского шипа
с прикрепленными Niizschia sturionis. (По Лутта
Полость тела. В полости тела рыб, на серозных покровах ее, на поверхности органов, в жировой ткани и брюшине встречаются главным образом личинки паразитических червей, достигающие половозрелости в кишечнике других рыб, птиц или млекопитающих.
Здесь можно найти мелкие овальные цисты с личинками сосальщика Tetracotyle (например Т. variegata, вызывающий массовую гибель рыб, Т. регсае и др.). Весьма интересным паразитом является цестодария Amphilina из полости тела осетровых рыб, достигающая там половозре-лости. Это широкие листовидные черви длиной от 3 до 50 мм, желтоватого цвета. Особенно часты они у молодых рыб.
Рис. 11. Лещ, пораженный ремнецами. (По Маркевичу).
В карповых и некоторых других рыбах встречаются различные ремнецы (Ligula, Digrammd), достигающие больших размеров. В случае сильного заражения брюхо рыбы сильно вздувается и даже прорывается (рис. 11). Ремнецы часто вызывают воспаление брюшины, водянку и являются причиной массовой гибели рыб. В колюшках обычен Schisto-cephalus. Плероцеркоиды широкого лентеца Diphyllobothriam Шит, паразита человека и домашних животных, живут в полости, на поверхности органов и в мышцах различных хищных рыб (щука, окунь, ерш и др.). Это личинки молочно-белого цвета, 1—3 см длины, 2—3 мм ширины. В лососевых рыбах встречаются личинки Eubothrium, n полости многих морских рыб — Scolex polymorphtis и личинки рода Tetrarkynchus, легко отличающиеся по наличию четырех шиповатых длинных хоботков, покрытых крючками и ввернутых внутрь тела. В полости тела и на
мезентерии некоторых карповых рыб встречаются грушевидные ци-сты Cysticercus dilepidis и Triaeno- nophoms noduiosus. в соединительнотканных цистах (рис. 12).
Рис.12.Печень форели, пораженная
личинками Triaenonophoms noduiosus.
(По Маркевичу).
На внутренней стороне стенок тела и наружной поверхности кишечника, на брыжейке налима, бычков, миног, сельдей и других рыб капсулируются личинки скребней Согупоsoma. Часты в полости тела личинки круглых червей Rhaphidascaris и Contracoecam, например С. siluri gla-nidis у хищных рыб. У сомов, стерлядей, осетров и сазанов в полости тела встречаются темные дисковидные капсулы Agamospirura. Во взрослом состоянии в полости тела живут Philometra sanguineum. Встречаясь иногда сотнями у различных рыб (карась, лещ, сырть, плотва, густера, колюшка), они образуют клубки кроваво-красного цвета и вызывают воспаление стенок полости тела. У морских рыб очень обычен Anisakis.
Внутренние органы. Сердце вынимают вместе с крупными сосудами и кладут в глубокое часовое стекло или солонку с физиологическим раствором. Если сердце исследуется сразу после наружного осмотра, перед вскрытием жабер, что желательно, то острыми ножницами вскрывают околосердечную полость и вырезают сердце. Затем осматри вают его снаружи и вскрывают, стенки сердца, как и другие органы, исследуются компрессорным способом. Образующийся в физиологическом растворе осадок исследуется под микроскопом. Здесь можно обнаружить половозрелую стадию кровяных сосальщиков Sanguinicola и Janickia, которые встречаются* главным образом в артериальной луковице, брюшной аорте и приносящих жаберных артериях. Яйца этих червей закупоривают капилляры жаберных лепестков и нарушают кровообращение.
Известно нахождение в артериальной системе щуки круглых червей Filaria obturans. Воспаление околосердечной сумки, сильную деформацию частей сердца и обесцвечивание его вызывают слизистый споровик Myxobolus cardis у усачей и Myxobolus dogieli у карпа (рис. 13).
Рис. 13. Сердце карпа, пораженное цистами Myxobolus Жидкость ИЗ пузыря иссле-dogieli. (По Быховским).
При сильном заражении из желудка ео все стороны выступают беловатые колбасовидные мешки —• цисты этого паразита.
Мочевой пузырь вырезается у самого основания, разрывается иглами на стекле и исследуется отдельно. Здесь встречаются инфузории Tricliodina, слизистые споровики Myxidium (обычны у щуки), пронизывающие ткань бесформенными желтоватыми массами, сосальщики рода Phyllodistomum, вызывающие воспаление стенок органа. В мочевом пузыре зубатки обычен сосальщик Lepidophyllum.
После вскрытия мочевого пузыря отпрепаровывается комплекс органов пищеварительной системы (задняя кишка захватывается пинцетом и обрезается у заднего прохода): кишечник, печень, селезенка, а также жировое тело с панкреатическими железами и брюшина. Эти органы осторожно отделяют друг от друга и исследуют в установленном порядке.
Первым отделяется от внутренней стороны печени, прилегающей к кишечнику, желчный пузырь. Стенки его просматриваются между стеклами под лупой, желчь исследуется отдельно. Обычными паразитами этого органа являются слизистые споровики Chloromyxum и Myxidium. В желчном пузыре зуоатки встречаются сосальщики reiwuiscumum, вызывающие воспалительные процессы. В полости желчного пузыря многих рыб бывают мелкие цистицерки Cysticer-cus gryporhynchus, достигающие окончательного развития в цаплях.
При наружном осмотре печени простым глазом можно заметить цисты сосальщиков Tetracotyle, крупные цисты ленточных Triaenophorus, а также самих червей, лежащих свободно вне цист (массовое заражение этим паразитом вызывает полное перерождение тканей печени и нарушение правильного ее функционирования), плероцеркоиды широкого лентеца Diphyllobotkrium и маленькие белые узелки — цисты слизистых споровиков Myxobolus. Иногда попадаются личинки круглых червей Роггосоесит и Contracoecum. Далее ткань печени отрывается небольшими кусочками и просматривается между стеклами иод луной.
Тем же способом исследуется селезенка, в которой можно встретить цисты слизистого споровика Myxobolus.
В жировой ткани и брюшине, равно как на поверхности полостных органов, паразитируют слизистые споровики, личинки сосальщиков Tetracotyle, личинки ленточных и круглых червей и скребней.
После просмотра всех связанных с кишечником органов исследуется сам кишечник. Его удобнее рассматривать по частям, начиная от заднего конца к переднему. От кишечника отрезаются небольшие участки (в зависимости от толщины и степени наполнения содержимым), которые предварительно разрезаются вдоль с осторожностью, чтобы не перерезать могущего находиться внутри паразита.1 Всех паразитов, видимых простым глазом, вынимают пинцетом или иглой и помещают в физиологический раствор или просто в воду. Особенно осторожно нужно извлекать ленточных червей и скребней, которые глубоко внедряются передним концом в стенки кишечника и легко могут быть порваны. Затем на стеклах и между ними, под лупой, просматривается содержимое кишечника, в котором могут быть найдены сосальщики и мелкие ленточные черви, а также круглые черви и скребни. Наконец скальпелем делается соскоб со слизистой оболочки. В зависимости от густоты содержимого кишечника приходится разбавлять его водой на препаровальном стекле. Компрессорно исследуется и сама стенка кишечника. Следует очень осторожно вскрывать пилорические придатки, так как к их стенкам часто прикрепляются своими головками ленточные черви, и соскооах из пило-рических придатков нередки мелкие нематоды (Camallanus, Agamonema и др.).
В желудке обитают сосальщики Azygialucii (у хищных рыб), после смерти хозяина выползающие в жаберную полость, а также Hemiurus и Bunocotyle (у сельдевых). Впилорических придатках желудка лососевых часто паразитируют ленточные черви Cyatkocephattis и Eubothrimm и круглые черви Camallanus. В кишечнике хищных рыб часты Gas-terostomum fimbriatum, Bunodera lu-ciopercae; у карповых — Allocreadiam isoporum, Sphaerostomum bramae, представители родов Asymphylodora, Aspidogaster и др.
Кишечник населен множеством разнообразных паразитов, главным образом червей: сосальщиков, ленточных, круглых червей и скребней. Из простейших здесь встречаются кишечные жгутиконосцы (Octomitus), оказывающие серьезное болезнетворное действие на молодь форели, амёбы в задней кишке некоторых морских рыб, кокцидии в стенке кишечника карповых, в случае массовых заражений уничтожающие всю слизистую кишечника и вызывающие этим гибель рыб.
Личинки Eustrongylides excisus в стенках кишечника хищных рыб образуют крупные нарывы. Они же пронизывают насквозь стенки желудка, вызывая воспалительные явления и гиперемию (расширение) кровеносных сосудов. Для обнаружения и определения простейших из содержимого кишечника (в передней, средней и задней части его) делается на покровных стеклах три фиксированных мазка (см. изготовление мазков).
Весьма полезно собрать из желудка остатки пищи рыбы. Такой материал очень важен при решении, вопроса о промежуточных хозяевах тех или иных паразитов.
Патогенными формами кишечных паразитов являются Azygia lucii, вызывающая язвы в местах своего прикрепления, Bunodera luciopercae и Crepidostomum farionis, вызывающие весьма болезненные и даже смертельные воспаления кишечника. Массовые заражения Triaenopkorus, Cyatoce-phalus и Etibothrium вызывают местные изъязвления и закупорку кишечника и истощают рыбу, отнимая большую часть питательных веществ пищи. Сребни чаще других, паразитов вызывают повреждения и воспаления кишечника, внедряясь вооруженными хоботками глубоко в его стенки (рис. 14).
Рис.14.Участок вырезанной кишки сига с прикрепившимися