
- •1. Условия проведения испытания
- •2. Определение антимикробного действия
- •2.1. Устранение антимикробного действия
- •3. Испытание на стерильность
- •3.1. Отбор образцов для анализа
- •3.3. Метод мембранной фильтрации
- •3.3.1. Пробоподготовка водных растворов
- •3.3.2. Пробоподготовка жидкостей, не смешивающихся с водой
- •3.3.3. Пробоподготовка лекарственных средств, растворимых в изопропилмиристате (ипм) (и12)
- •3.3.4. Пробоподготовка препаратов в шприц-тюбиках
- •3.3.5. Пробоподготовка твердых лекарственных форм для инъекций
- •3.3.6. Пробоподготовка стерильных аэрозольных препаратов
- •3.4. Жидкости для промывания мембранных фильтров при контроле лекарственных средств, обладающих антимикробным действием
- •3.5. Валидация метода мембранной фильтрации при контроле лекарственных средств, обладающих антимикробным действием
- •3.6. Метод прямого посева
- •3.6.1. Пробоподготовка нефильтрующихся жидкостей
- •3.6.2. Пробоподготовка лекарственных средств, нерастворимых в изопропилмиристате (ипм) (и12)
- •3.6.3. Пробоподготовка твердых лекарственных форм
- •3.7. Условия инкубации посевов
- •3.8. Интерпретация результатов испытания
- •4. Питательные среды
- •4.1. Состав и приготовление питательных сред
- •4.2. Стерильность питательных сред
- •4.3. Определение ростовых свойств питательных сред
- •4.4. Хранение питательных сред
4.3. Определение ростовых свойств питательных сред
Ростовые свойства питательных сред определяют для каждой серии питательной среды, выпущенной промышленностью и имеющей номер серии, и для каждой партии среды, приготовленной в лаборатории.
В 2 пробирки со средой вносят культуру тест-штамма, каждого отдельно, в количестве 10-100 КОЕ (табл. 31.4). Инкубируют в соответствии с условиями, описанными в табл. 31.4. Если в течение времени инкубации в инокулированных средах визуально отмечают рост микроорганизмов, среду считают пригодной для использования.
Таблица 31.4
Тест-микроорганизмы для определения ростовых свойств питательных сред и определения антимикробного действия
-
Питательные среды
Тест-микроорганизмы
Условия инкубации
Вид
Штамм
Температура
Время инкубации
Жидкая тиог- ликолевая среда
Аэробные бактерии:
Bacillus subtilis АТСС 6633
Staphylococcus ATCC 6538-Р
aureus
Pseudomonas АTCC 9027
aeruginosa
32,5 ± 2,5 ºС
3 сут
Анаэробные бактерии: Clostridium ГИСК 272 sporogenes
32,5 ± 2,5 ºС
3 сут
Жидкая
соево-казеино- вая среда
Жидкая среда
Сабуро
Грибы:
Candida albicans NCTC 885-653
Aspergillus niger АТСС 9642
22,5 ± 2,5 ºС
5 сут
АТСС – Американская коллекция типовых культур, США.
ГИСК – Государственная коллекция патогенных микроорганизмов ГИСК им. Л.А.Тарасевича, Россия.
NCTC – Национальная коллекция типовых культур.
4.4. Хранение питательных сред
Питательные среды, приготовленные в лаборатории, хранят при температуре от 2 до 25 ºС в защищенном от света месте в течение не более 1 мес. Если при хранении тиогликолевой среды, содержащей резазурин, верхний слой среды (более 1/3 объема) окрасится в розовый цвет, то среду можно регенерировать нагреванием на кипящей водяной бане в течение 10-15 мин до исчезновения розовой окраски, с последующим быстрым охлаждением. Если окраска не исчезает после нагревания, то среду считают не пригодной к употреблению. Регенерацию среды можно проводить только один раз.
Питательные среды промышленного производства, готовые к употреблению, хранят в плотно укупоренных сосудах при условии сохранения их стерильности и ростовых свойств в течение срока годности.
Сухие питательные среды промышленного производства хранят в соответствии с инструкцией по использованию и уничтожают по истечении срока годности, указанного производителем.