osn_san_mikr
.pdfЭ. Г.-А. Донецкая, В.И.Корженевич И.Г.Швиденко, Г.М.Шуб
Основы санитарной микробиологии
Учебное пособие
Саратов 2008
4
Государственное образовательное учреждение Высшего профессионального образования
«Саратовский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
Э. Г.-А. Донецкая, В.И.Корженевич И.Г.Швиденко, Г.М.Шуб
Основы санитарной микробиологии
Учебное пособие
Издательство Саратовского медицинского университета
2008
5
УДК 614.3.4:576.8.06(075.8) ББК 51.1(2)1 Я 73 Д 672
Э.Г.- А. Донецкая , В.И Корженевич, И.Г.Швиденко, Г.М.Шуб Основы санитарной микробиологии .Учебное пособие / Изд-во. СГМУ, 2008г, 219стр.
Вучебном пособии освещены основные вопросы курса санитарной микробиологии, включающих изучение микробиологии объектов окружающей среды, пищевых продуктов, косметико-парфюмерной продукции, аптечных учреждений и лекарственных средств в строгом соответствии с действующими методическими указаниями, государственными отраслевыми стандартами и санитарными правилами и нормами.
Каждая глава содержит краткую теоретическую и практическую части. После каждой главы представлены тесты для самоконтроля.
Вконце учебного пособия приводятся таблицы основных санитарно-микробиологических норм для различного рода материала и рекомендуемые схемы соответствующих санитарномикробиологических исследований.
Учебное пособие рекомендовано для студентов медико-профилактических факультетов медицинских вузов.
Рецензенты:
Зав.каф. микробиологии с вирусологией и иммунологией Воронежской медицинской академии, заслуженный деятель науки РФ, д.м.н, профессор А.М.Земсков Зав.каф. микробиологии Дагестанского медицинского университета , д.м.н., профессор,
М.М. Меджидов
Одобрено к изданию ЦКМС СГМУ
© Э.Г.-А. Донецкая В.И.Корженевич, И.Г.Швиденко Г.М.Шуб .2008 © Саратовский государственный медицинский университет, 2008
6
Список сокращений, условных обозначений и терминов
БГКП – бактерии группы кишечной палочки.
Кбактериям группы кишечных палочек (БГКП) относятся
грамотрицательные, не образующие спор палочки, сбраживающие глюкозу и лактозу с образованием кислоты и газа при температуре 37-440С в течение 24-48 часов, в основном являющиеся представителями родов Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Serratia.
ОКБ – общие колиформные бактерии.
Кобщим колиформным бактериям (ОКБ) относятся не образующие спор
грамотрицательные палочки, сбраживающие глюкозу и лактозу с образованием кислоты и газа при 370С в течение 24-48 часов;
ТКБ – термотолерантные колиформные бактерии.
Ктермотолерантным колиформным бактериям (ТКБ) относятся не
образующие спор грамотрицательные палочки, сбраживающие глюкозу и лактозу с образованием кислоты и газа при 440С в течение 24-48 часов.
КМАФАнМ – культура мезофильных аэробных и факультативно- анаэробных микроорганизмов;
МАФАнМ – мезофильные аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы.
Кмезофильным аэробным и факультативно-анаэробным микроорганизмам относятся культуры бактерий, дрожжей, плесневых грибов,
растущие в присутствии кислорода и имеющие температурный оптимум развития в пределах 25-370С.
ТАФАнМ – термофильные аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы.
Ктермофильным аэробным и факультативно-анаэробным микроорганизмам (термофилы) относятся культуры микроорганизмов
(бактерий и некоторых грибов), способных быстрее всего расти при температурах выше 400С, а верхний предел – 700С (чаще 440С-600С).
Мезофильные микроорганизмы (мезофилы) – группа
микроорганизмов, оптимальная температура роста которых лежит в пределах от 20 до 420С, преимущественно 350-380С – температура тела теплокровных животных.
Психрофильные микроорганизмы (психрофилы) – микроорганизмы, рост которых достигает максимума при температурах ниже 200С.
Галофильные микроорганизмы (галофилы) – микроорганизмы, развивающиеся в средах с повышенными концентрациями хлорида натрия.
Сульфитредуцирующие клостридии – спорообразующие облигатные
анаэробные палочки, представители рода Clostridium, редуцирующие сульфит натрия на железосульфитном агаре при 44±10С в течение 16-18-ти часов.
СПМ – санитарно-показательные микроорганизмы.
ОМЧ – общее микробное число (ОМЧ) – общее содержание микроорганизмов в единице объема исследуемого материала – в 1,0м3 воздуха,
в1,0л воды, в 1,0г почвы, пищевых продуктов.
7
БОЕ – бляшкообразующая единица (фаговая частица, способная образовать негативную колонию при определении фагов методом агаровых слоев по Грациа).
КОЕ – колониеобразующая единица – жизнеспособный микроорганизм, способный в результате размножения на твердой питательной среде сформировать колонию.
КПП – консервированные пищевые продукты.
ЖСА – желточно-солевой агар – твердая элективная (селективная) среда для выделения (культивирования) стафилококков.
МПА – мясопептонный агар – твердая универсальная питательная среда для культивирования большинства микроорганизмов нетребовательных к питательным средам.
МПБ – мясопептонный бульон – жидкая универсальная питательная среда для культивирования большинства микроорганизмов нетребовательных к питательным средам.
ГФ ХI – Государственная фармакопея СССР, ХI издание. ЛПУ – лечебно-профилактическое(ие) учреждение(я).
ПДК – предельно-допустимая концентрация – концентрация, указывающая на предельно возможное содержание данного химического соединения (вещества) в единице объема.
ПТИ – пищевая токсикоинфекция.
ЦСО – центральное стерилизационное отделение.
Сульфитредуцирующие клостридии – спорообразующие облигатные анаэробные палочки, представители рода Clostridium, редуцирующие сульфит натрия на железосульфитном агаре при 44±10С в течение 16-18-ти часов.
Колифаги – бактериофаги (вирусы), способные к лизису клеток культуры кишечной палочки (E.coli).
Выборка – определение количества исследуемого объекта, отбираемого за один прием от каждой единицы упаковки.
Исходный образец – совокупность отдельных выборок, отобранных из одной партии.
Средний образец – часть исходного образца, выделенная для проведения лабораторных испытаний.
Навеска – часть пробы, выделенная для определения показателей качества.
8
Глава 1
1.1. История развития санитарной микробиологии
Санитарная микробиология изучает бактерии и вирусы, содержащиеся в окружающей среде, в продуктах питания, лекарственных, косметикопарфюмерных продуктах, которые непосредственно или косвенно могут оказывать неблагоприятное воздействие на здоровье людей.
Задачи, решаемые санитарной микробиологией, заключаются в следующем:
–разработка и оценка методов микробиологических и вирусологических исследований воздуха, воды, почвы, пищевых продуктов, предметов обихода, лекарственных препаратов;
–детальный анализ материалов, собираемых при массовых обследованиях однотипных объектов в разных условиях и выработка на этой основе нормативов, определяющих соответствие микрофлоры исследуемых субстратов санитарно–микробиологическим требованиям;
–оценка путей воздействий человека и животных на окружающую среду, которые приводят к загрязнению ее опасными для здоровья бактериями и вирусами;
–разработка рекомендаций по оздоровлению объектов внешней среды путем воздействия на их микрофлору и оценка эффективности проводимых мероприятий.
Санитарная микробиология сформировалась как раздел гигиены, а затем она отделилась и стала самостоятельной отраслью. Ее возникновение связано с именами А.А.Миллера, И.Е.Минкевича, В.И.Тэца, которые впервые создали учебники по этому предмету.
Первая санитарно-эпидемиологическая станция (СЭС) в нашей стране была организована в 1873г., а уже в 1881г. – первая Московская санитарная станция, в состав которой входили три основных отдела: санитарногигиенический, эпидемиологический и дезинфекционный. С сентября 1922г. в нашей стране началось создание сети специализированных санитарнопрофилактических учреждений – санитарно-эпидемиологических станций (СЭС).
Значение санитарной микробиологии в этот период существенно расширяется, поскольку появляются новые потребности общества: освоение целины, пустынь и Заполярья, новые пути преобразования природы, развитие раннее неизвестных производств, штурм космоса, что отражается на микрофлоре среды и изменяет ее свойства. В этих новых условиях существования санитарная микробиология фиксирует и исследует процессы взаимодействия человека с микрофлорой среды, и в первую очередь, методы оценки степени загрязненности и контроля состояния окружающей среды в лечебно-профилактических учреждениях и аптеках.
В соответствии с новыми потребностями общества в 1963г. было утверждено «Положение о государственном санитарном надзоре», в котором
9
были определены пути дальнейшего совершенствования санитарно-правового законодательства, указаны основные задачи по организации работы санитарноэпидемиологической службы, структуры его органов и учреждений, повышение уровня и специализации государственного санитарного надзора. В это же время была создана секция санитарных врачей – микробиологов при Московском городском отделении Всесоюзного научного общества гигиенистов и санитарных врачей.
В80-90 годах 20-го века в недрах санитарной микробиологии сформировалась новая отрасль медицинской науки – санитарная вирусология. Это объясняется интенсивным ростом числа инфекционных заболеваний вирусной этиологии, приведшим к появлению насущной проблемы изучения распространения вирусов – возбудителей тех или иных заболеваний, в объектах окружающей среды, пищевых продуктах, а также совершенствования методов их обнаружения и идентификации.
Результаты исследований, проводимых в специализированных научноисследовательских институтах – Московский НИИ гигиены им. Ф.Ф.Эрисмана, институт общей и коммунальной гигиены им. А.Н.Сысина, Институт питания АМН СССР, Ордена Трудового Красного Знамени Институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи, Институт вирусологии им. Д.И.Ивановского
–вносят большой вклад в развитие санитарной микробиологии и вирусологии. Полученные результаты используют в профилактической и лечебной медицине, а также в сельском хозяйстве и промышленности
Каждый год при московском городском отделении Всесоюзного научного общества гигиенистов и санитарных врачей-микробиологов проводились всесоюзные и республиканские совещания и конференции по санитарной микробиологии.
Только в 1991г. в связи с принятием закона «О санитарноэпидемиологическом благополучии населения» начался новый этап развития санитарно-эпидемиологической службы. Впервые на законодательном уровне было введено правовое регулирование деятельности в сфере обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия населения.
Следующим этапом стал принятый в 1999г. новый федеральный закон «О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения». В этот закон были внесены уточнения основных положений 1991г. и добавлен ряд новых принципиальных положений, которые становятся основным средством для улучшения санитарно-эпидемиологического надзора во многих направлениях.
В1993г. образовалась государственная инспекция по торговле, качеству товара и защите прав потребителей, которая в 2000г. стала структурным подразделением Министерства экологического развития и торговли Российской Федерации.
В2004г. образована федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека – Роспотребнадзор, которой была передана часть функций Министерства здравоохранения Российской Федерации. Согласно постановлению правительства Российской Федерации №154 от 6 апреля 2004г. «Вопросы федеральной службы по надзору в сфере
10
защиты прав потребителей и благополучия человека» федеральная служба, являясь органом исполнительной власти, осуществляет свою деятельность по контролю и надзору в сфере обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия населения (санитарно-гигиенический контроль) через территориальные органы исполнительной власти
Кроме этого постановления правовые основы деятельности федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека установлены федеральными законами «О санитарноэпидемиологическом благополучии населения» и другими нормативными актами Российской Федерации. В соответствии с ними в состав данной федеральной службы входят 89 территориальных управлений и 90 Центров гигиены и экологии (эпидемиологии) в субъектах Российской федерации, помимо этого федеральной службе подчинены 28 научно-исследовательских институтов, 14 противочумных станций и более 100 организаций дезинфекционного профиля.
11
1.2. Тесты для самоконтроля
(один ответ правильный)
1. Санитарная микробиология – а) наука о бактериях и вирусах, которые содержатся в окружающей среде, в
продуктах питания и других объектах б) наука, изучающая пути передачи инфекционных заболеваний и их
механизмы в) наука, изучающая влияние различных биологических и абиотических
факторов на жизнедеятельность человека
2. Санитарная микробиология решает следующие задачи:
а) взаимодействие между растительным и животным миром б) разработки рекомендаций по оздоровлению объектов внешней среды
путем воздействия на их микрофлору в) изучение вопросов персистенции вирусов в организме человека
3.С именами, каких ученых связано развитие санитарной микробиологии: а) Л.Пастер, Жакоб и Моне б) А.А.Миллер, И.Е.Минкевич в) Э.Краузе, Р.Кох
4.Укажите, какие научно-исследовательские институты занимаются вопросами развития санитарной микробиологии:
а) НИИ сельской гигиены б) НИИ гигиены им. Ф.Ф.Эрисмана
в) НИИ биохимии и физиологии микроорганизмов
5.Санитарная микробиология возникла на стыке наук:
а) гистологии, гигиены, микробиологии б) микробиологии, гигиены, эпидемиологии в) геронтологии, гигиены, микробиологии
6. В какой период в практику санитарных исследований внедрились вирусологические исследования:
а) в 1980-1990 годах б) в 1930-х годах в) в 1950-х годах
Глава 2
2.1. Санитарно-показательные микроорганизмы
Санитарно-микробиологические исследования решают вопрос о наличии или степени вероятности присутствия микробов или их токсинов в объектах окружающей среды.
Их основными задачами является определение прямых показателей – обнаружение патогенных и условно-патогенных микроорганизмов или их токсинов в объекте.
Принципы проведения санитарно-микробиологических исследований при выделении санитарно-показательных микроорганизмов:
–забор проб регламентирован для каждого исследуемого объекта и проводят его с соблюдением правил стерильности;
–исследование материала необходимо проводить быстро, а при невозможности немедленного проведения анализа – материал помещают в холодильник и сохраняют в течение 6-8часов;
–для получения адекватных результатов проводят забор серии проб из разных участков объекта; в лаборатории образцы смешивают, затем отмеряют необходимое количество материала, с которым проводят дальнейшее исследование;
–интерпретацию результатов следует проводить с учетом других органолептических показателей.
Одним из важнейших аспектов санитарно-микробиологического исследования окружающей среды является решение вопроса о наличии или отсутствии санитарно-показательных микроорганизмов как индикаторов загрязнения (таблица 1).
На основании многочисленных исследований были сформулированы требования, которым должны отвечать санитарно-показательные микроорганизмы (СПМ):
–постоянно содержаться в выделениях человека и теплокровных животных и постоянно поступать в окружающую среду в большом количестве;
–не иметь другого природного резервуара, кроме организма человека и животных (исключая пищевые продукты);
–после выделения в окружающую среду – сохранять жизнеспособность в течение сроков, близких к срокам выживания патогенных микроорганизмов, выводимых из организма теми же путями;
–не размножаться интенсивно в окружающей среде;
–незначительно изменять свои биологические свойства в окружающей
среде;
–быть достаточно типичными для своего вида (рода), с тем, чтобы их идентификация осуществлялась без особого труда;
–индикация, идентификация и количественный учет могут проводиться современными, простыми, легко доступными и экономичными методами.