osn_san_mikr

43

Глава 5

5.1. Санитарная микробиология воды

5.1.1. Общие вопросы

Вода – естественная среда обитания разнообразных микроорганизмов. На качественный состав микрофлоры основное влияние оказывает происхождение воды.

По происхождению различают следующие типы вод:

1.пресные поверхностные воды, к которым относятся проточные (текучие) воды рек, ручьев и стоячие воды – озер, прудов, водохранилищ;

2.подземные – грунтовые, почвенные, артезианские;

3.атмосферные (включающие дождь, снег);

4.соленые (морские и озерные воды).

По характеру использования также различают несколько типов воды:

1.питьевая вода – централизованного и местного водоснабжения, при котором забор воды ведется из открытых водоемов (реки, водохранилища) или подземных источников (скважины, родники, колодцы);

2.вода плавательных бассейнов;

3.лед медицинский и лед хозяйственный.

Отдельно выделяют ввиду их особого санитарного значения сточные воды, поступающие в окружающую среду. Среди них различают:

1.хозяйственно-фекальные (бытовые);

2.промышленные;

3.смешанные (бытовые, поступающие в окружающую среду совместно с промышленными);

4.талые и ливневые воды, микрофлора которых приводит к загрязнению поверхностных вод.

Совокупность всех микроорганизмов, заселяющих водоемы, обозначается термином «микробный планктон», в состав которого входит автохтонная и аллохтонная микрофлора.

Автохтонная водная микрофлора – совокупность микроорганизмов, постоянно живущих и размножающихся в воде данного водоема.

Вее состав могут входить: Micrococcus candicans, Micrococcus roseus, Sarcina spp., Pseudomonas fluorescens, различные виды родов Proteus и Leptospira, Bacillus cereus, Bacillus cereus, Chromobacterium violaceum, Serratia marcescens, некоторые виды клостридий рода (Clostridium), фаги и др.

Аллохтонная водная микрофлора – совокупность микроорганизмов, находящихся в данном водоеме временно (периодически изменяющаяся микрофлора).

Восновном такие микроорганизмы находятся на дне или в прибрежной зоне поверхностных водоемов, что связано с постоянным попаданием

44

микроорганизмов, как из почвы берегов, так и с талыми, ливневыми и другими типами сточных вод.

Микрофлора хозяйственно-фекальных или смешанных сточных вод – основной путь загрязнения воды, поскольку помимо условно-патогенных бактерий – Escherichia spp, Enterococcus spp., Klebsiella spp., Clostridium, грибы рода Candida, входящих в состав нормальной микрофлоры животных или человека, может включать и возбудителей многих инфекционных болезней, чаще бактериальных (Salmonella, Shigella, Yersinia) и вирусных (энтеровирусы, ротавирусы, аденовирусы) кишечных инфекций.

Исходя из этого, именно аллохтонная флора любого поверхностного водоема может служить источником заболеваний, передающихся фекальнооральным, преимущественно водным путем (холера, брюшной тиф, лептоспироз, полиомиелит, гепатит А, Е, менингиты, вызываемые энтеровирусами – вирусы Коксаки и ЕСНО, и др.).

Процесс освобождения водоема от загрязняющих его органических субстратов и патогенных микроорганизмов называется процессом самоочищения водоема.

Способность к самоочищению обусловлена присутствием в воде постоянных видов микроорганизмов, входящих в конкретный биоценоз. Однако их количественные и качественные соотношения в биоценозах не стойки и изменяются в зависимости от содержания органических веществ, то есть меняется по сапробности.

Сапробность – комплекс особенностей водоема, в том числе состав и количество микроорганизмов в воде, содержащей органические и неорганические вещества в определенных концентрациях. По этому критерию водоемы подразделяются на:

–полисапробные зоны (зоны сильного загрязнения) – содержат большое количество легко разлагающихся органических веществ и почти полностью

лишены кислорода; количество микроорганизмов достаточно большое (общее число бактерий – 106 и более в 1 мл воды), но видовой состав микрофлоры весьма ограничен и представлен преимущественно анаэробами, грибами, актиномицетами;

–мезосапробные (зоны умеренного загрязнения) – характеризуются преобладанием окислительно-восстановительных и нитрификационных

процессов; количество микроорганизмов достаточно большое (общее число бактерий – 105 в 1 мл воды), видовой состав микрофлоры разнообразен, с преобладанием нитрифицирующих бактерий.

–олигосапробные зоны (зоны чистой воды) – характеризуются небольшим количеством органических соединений, окончанием процесса их

минерализации, соответственно, окончанием процесса самоочищения; количество микроорганизмов небольшое (общее число бактерий – 101-102 в 1 мл воды).

Патогенные микроорганизмы, попадающие в водоемы, достаточно обильны в полисапробных зонах, постепенно отмирают в мезосапробных и практически не обнаруживаются в олигосапробных.

45

Кроме того, на примере инфекционной активности вирусов было показано, что кроме степени загрязненности воды и наличия сопутствующей микрофлоры, на сроки их сохранения в воде влияют такие факторы, как температура и химический состав воды. Установлено, что пределы выживаемости полиовирусов при температуре 4-60С в сточной воде составляют 180 дней, в прудовой – 130, в морской – 96, в водопроводной – 100 дней; выживаемость аденовирусов в прудовой воде при температуре 4-100С составляет 130 дней, а в водопроводной – 125 дней (для сравнения вирусы Коксаки А – 80 дней). Для морской воды уменьшение сроков выживания объясняется присутствием йода, обладающего сильным противовирусным действием.

Еще Гиппократ впервые высказал предположение, что вода является путем передачи «водных болезней», а Луи Пастер сумел научно обосновать ее эпидемиологическую роль, связав присутствие в загрязненной воде разнообразных микроорганизмов с возникновением инфекционных болезней у людей и животных, пользующихся этой загрязненной водой.

В настоящее время водный путь передачи характерен для таких инфекций как холера, брюшной тиф и паратифы, дизентерия, гепатит А и В, полиомиелит, лептоспироз, сибирская язва, туляремия, туберкулез, сап, Ку лихорадка, грибковые заболевания, а также для серозного менингита, вызываемого энтеровирусами (Коксаки, ЕСНО), и керато-коньюнктивальной лихорадки, вызываемой аденовирусами.

Проведенный эпидемиологический анализ заболеваемости показал, что источником возбудителя может служить не только питьевая вода, загрязненная фекальными сточными водами, но и вода открытых водоемов, используемая для мытья пищевых продуктов (в первую очередь, фруктов и овощей) или для купания. Например, распространение заболеваний брюшным тифом, дизентерией, гепатитом А и Е, лептоспирозом в Средней Азии (Казахстан, Узбекистан, Туркмения) связано не только с потреблением воды из малых водоемов – каналов, арыков, но и купанием в них детского населения, использованием этой воды для промывания ран и царапин.

5.1.2. Санитарно-микробиологическое исследование воды

Отбор проб осуществляют согласно ГОСТ р 51592-2000, исследуют по МУК 4.2. 1018-01, нормируют по СанПиНу 2.1.4. 1074-01.

Основной целью санитарно-микробиологического исследования является обеспечение населения доброкачественной водой.

Задачей санитарно-микробиологического исследования является текущий санитарный надзор за качественной питьевой водой (централизованного и нецентрализованного водоснабжения), государственный санитарный контроль за качеством воды в водоемах (особенно в местах водозабора), на очистных сооружениях. Особое внимание уделяется санитарно-микробиологическому исследованию воды плавательных бассейнов, которое необходимо проводить в

46

порядке текущего контроля и по эпидемиологическим показаниям, а также выявление водных вспышек инфекционных заболеваний и предупреждение их возникновения.

В соответствии с действующими нормативными документами текущий надзор осуществляют:

–при оценке качества питьевого водоснабжения населенных мест;

–при оценке санитарного состояния поверхностных вод для установления степени влияния биологической контаминации на способность воды к самоочищению;

–при контроле над обезвреживанием сточных вод;

–по эпидемиологическим показаниям для выяснения источника заболевания.

Предупредительный надзор осуществляется при:

–решении вопросов водоснабжения и канализации населенных территорий;

–санитарной оценке бассейнов, пляжей, мест коллективного пользования.

Санитарно-микробиологическое исследование проводят при:

–выборе источника централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения и периодическом контроле этого источника;

–контроле эффективности обеззараживания питьевой воды централизованного водоснабжения;

–наблюдении за подземными источниками централизованного водоснабжения – артезианские скважины, почвенные воды;

–определении состояния и степени пригодности использования водных источников индивидуального водопользования (колодцев, родников);

–наблюдении за санитарно-микробиологическим состоянием воды открытых водоемов, водохранилищ, прудов, озер, рек;

–контроле эффективности обеззараживания воды плавательных бассейнов;

–проверке качества и степени очистки сточных вод;

–расследовании водных вспышек инфекционных болезней. Особенностью санитарно-микробиологических исследований воды

является необходимость количественной оценки получаемого результата. Однако специфика микробиологических исследований – изучение живого микроорганизма, обладающего индивидуальными свойствами и особенностями жизнедеятельности в условиях водной среды, создает проблемы в оценке точности количественного результата. К наиболее значимым объективным причинам, влияющим на результат анализа, относятся следующие:

–неравномерность распределения микроорганизмов, обуславливающая разброс данных при анализе двух одинаковых объемов одной пробы воды.

–способность микроорганизмов адсорбироваться на взвешенных частицах с образованием трудноразделимых в процессе взбалтывания комплексов, которые могут регистрироваться как один микроорганизм.

47

–влияние сопутствующих микроорганизмов-антагонистов, ингибирующих развитие искомых микроорганизмов при их наличии в анализируемой воде;

–возможное присутствие в исследуемой воде посторонних химических веществ, либо образование их соединений с компонентами питательной среды, которые могут угнетать или стимулировать рост исследуемых микроорганизмов;

–нахождение микроорганизмов в некультивируемом («стрессовом») состоянии под воздействием неблагоприятных условий внешней среды, в результате которого ингибируется их способность к развитию.

Забор проб.

(ГОСТ р 51592-2000 «Методы отбора, хранения и транспортировки проб») Для отбора проб воды используют специально предназначенную для этих

целей одноразовую посуду или емкости многократного применения, изготовленные из материала, не влияющего на жизнедеятельность микроорганизмов.

При отборе воды из распределительных систем пробы берут из крана, после предварительной его стерилизации (обжигания) и спуска воды в течение 10-ти минут при полностью открытом кране.

Для взятия глубинных проб из открытых водоемов и колодцев или бассейнов используют приборы: батометры, прибор Исаченко. При отсутствии батометров пробу воды можно отбирать с помощью бутыли или колбы, в крышку которых вмонтированы две стеклянные трубки, соединенные резиновым шлангом. Посуда обязательно должна быть стерильной. Для взятия проб питьевой воды используют стерильные стеклянные емкости (0,5л-1,0л).

Воду наливают в бутыли с соблюдением стерильности, не смачивая горла и пробки.

Родниковую воду берут непосредственно из струи или из середины текущего родника на расстоянии 10,0-15,0см от поверхности дна.

Артезианскую или колодезную воду забирают на глубине 10,0-15,0см. Из открытых водоемов, как правило, берут серию проб на разном

удалении от берега и на различной глубине.

Для санитарно-гигиенического анализа льда берут кусок весом не менее 2,0кг. В лаборатории его обмывают стерильной водой и стерильным инструментом из глубины вырубают несколько кусочков так, чтобы общая масса была около 500,0г.

Пробы сточных вод также забирают в стерильные бутыли. В некоторых случаях для выяснения источника распространения инфекции приходится исследовать сточные воды из больничных отделений или жилых домов.

В соответствии с санитарными правилами и нормативами «Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованной системы питьевого водоснабжения» питьевая вода должна быть безопасна в

48

эпидемиологическом отношении, что определяется соответствующими нормативами (таблица 2):

1.общее число микроорганизмов (ОМЧ) (КОЕ/мл);

2.общие колиформные бактерии (ОКБ) (КОЕ/100,0мл);

3.термотолерантные колиформные бактерии (ТКБ) (КОЕ/100,0мл);

4.споры сульфитредуцирующих клостридий (КОЕ/20,0мл);

5.колифаги (БОЕ/100,0мл).

Таблица 2 Санитарно-гигиенические показатели и нормативы качества питьевой воды

в соответствии с СанПиН 2.1.4.1074-01

Примечание:

–при обнаружении в пробе питьевой воды термотолерантных колиформных бактерий или общих колиформных бактерий, или колифагов проводится их определение в повторно взятых пробах;

–при обнаружении в повторно взятых пробах воды общих колиформных бактерий в количестве 2 в 100,0мл и колифагов проводится исследование проб воды для определения патогенных бактерий кишечной группы и энтеровирусов.

Микробиологический контроль питьевой воды должен проводиться для поверхностных источников ежемесячно (12 раз в год), в то время как для подземных источников – 4 раза в год по сезонам;

51

Глава 6

6.1. Санитарная микробиология воздуха

6.1.1. Общие вопросы

Воздух является средой, в которой микроорганизмы не способны размножаться, что обусловлено отсутствием в воздухе питательных веществ, недостатком влаги, губительным действием солнечных лучей. Жизнеспособность микроорганизмов в воздухе обеспечивается нахождением их в частицах воды, слизи, пыли, кусочках почвы.

Микрофлору воздуха условно разделяют на постоянную или резидентную (автохтонную) и транзиторную или временную (аллохтонную).

К представителям резидентной (автохтонной) микрофлоры, которая в основном формируется за счет микроорганизмов почвы, относятся пигментообразующие кокки (Micrococcus roseus, Micrococcus flavus, Sarcina flava, Sarcina alba), бациллы (Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Bacillus macerans), актиномицеты (Actinomyces spp.), грибы (Penicillum spp., Aspergillus spp.), дрожжеподобные грибы рода Candida.

Транзиторная (аллохтонная) микрофлора воздуха формируется преимущественно за счет микроорганизмов почвы, а также за счет видов, поступающих с поверхности водоемов и из организма людей и животных. При этом каждый человек или животное при обычном дыхании, разговоре, кашле, выделяют так называемый аэрозоль, который представляет собой коллоидную систему, состоящую из воздуха, капелек жидкости или частиц твердого вещества, включающих большое количество микроорганизмов. В процессе акта чихания при сильной экспирации образуется до 40 000 капель. В зависимости от размера капель, их электрического заряда, скорости движения в воздухе аэрозоль может иметь капельную и пылевую фазы, а также капельные ядрышки.

Капельная фаза представлена мелкими каплями, длительно сохраняющимися в воздухе и высыхающими прежде, чем они успевают осесть.

Пылевая фаза представлена крупными, быстро оседающими и испаряющимися каплями, в результате образуется пыль, способная подниматься в воздушную среду. В бактериальной пыли могут выживать только особо устойчивые виды микроорганизмов: микобактерии туберкулеза (до месяца), спорообразующие бактерии, некоторые виды грибов.

Капельные ядрышки – это мелкие капельки аэрозоля, которые, высыхая, остаются в воздухе во взвешенном состоянии и образуют устойчивую аэродисперсную систему. В них частично сохраняется влага (слизь мокроты), которая обволакивает клетку возбудителя, поддерживая жизнедеятельность микроорганизмов длительное время (Corynebacterium diphteriae – в течение суток, а микобактерии туберкулеза – до 18-ти дней). В составе капельных ядрышек бактерии могут переноситься на значительные расстояния.

52

В соответствии с тремя фазами бактериального аэрозоля различают три вида аэрогенного пути передачи инфекционного агента: воздушно-капельный, капельно-ядерный, пылевой.

Возможно также попадание микробов в воздух со слущивающимся эпидермисом кожных покровов, с пылью загрязненного постельного белья и зараженной почвы.

Через воздух передается целый ряд респираторных заболеваний, которые так и называются – инфекции дыхательных путей с воздушно-капельным и воздушно-пылевым механизмами передачи.

Контаминация воздуха закрытых помещений патогенными микроорганизмами происходит в основном воздушно-капельным путем – при разговоре, кашле, чихании от больных людей или носителей возбудителей инфекционных болезней, поражающих верхние дыхательные пути.

К таким инфекциям относятся легочная форма чумы, сибирской язвы и бруцеллеза, коклюш, скарлатина, дифтерия, менингит, туберкулез, риносклерома, озена, грипп, корь, ветряная оспа, эпидемический паротит, вирусные инфекции дыхательных путей, называемые ОРВИ – острые респираторные вирусные инфекции (вирусы размножаются и накапливаются в эпителии слизистой оболочки дыхательных путей), Ку-риккетсиоз.

Помимо температуры и влажности на выживаемость и распространение микроорганизмов в воздухе значительное влияние оказывает такой фактор как направление воздушных потоков в помещении. Горизонтальные конвекционные токи воздуха способствуют распространению микробов в пределах помещения или этажа при наличии общего коридора, поэтому микробиологические лаборатории в многоэтажных инфекционных больницах следует располагать в верхних этажах.

В воздухе закрытых помещений накапливается микрофлора, выделяемая через дыхательные пути человека. Наличие в воздухе гемолитических стафилококков указывает на загрязнение воздуха микроорганизмами, выделяемыми из носоглотки людей. В воздухе нежилых помещений стафилококки, как правило, отсутствуют. Количество микробов в рабочих и жилых помещениях находится в тесной связи с санитарно-гигиеническим режимом помещения

Общее количество микроорганизмов в 1,0м3 воздуха операционных не должно превышать 500 КОЕ, а после операции – 1000 КОЕ, патогенные стафилококки не должны обнаруживаться в 250,0л воздуха. В 1,0м3 воздуха операционных, родильных домах до начала работы допускается содержание не более 20 КОЕ сапрофитов, образующихся при осаждении микробов на чашку с мясопептонным агаром в течение 30 минут.

Бактериологическая обсемененность воздуха возрастает в присутствии людей, что имеет особое значение для больничных помещений. Если в воздухе операционной содержится около 10 бактерий в 1,0м3 воздуха, в перевязочных около 100, то в коридоре отделения – до 200 и более в 1,0м3.