Занятие № 5. «Роль витаминов в метаболизме»

Цель занятия: изучить химические свойства некоторых витаминов, лежащих в основе их биологического действия.

Вопросы к контрольной работе:

1. Витамины: классификация и номенклатура. Гипо-, апо- и гипервитаминозы. Причины недостаточности витаминов в организме.

2. Коферменты, образующиеся из витаминов В₁, Н. Механизм действия ферментов карбоксилирования и декарбоксилирования.

3. Коферменты, образующиеся из витаминов В₂, В₅, липоевая кислота и их биохимическая роль. Механизм действия окислительно-восстановительных ферментов (оксидоредуктаз).

4. Коферменты, образующиеся из витаминов В₃, В₁₂, В₆, Вс и их биохимическая роль. Механизм действия ферментов трансфераз.

5. Биохимические функции витаминов А и Е.

6. Биохимические функции витаминов Д и К.

Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________

Экспериментальная работа.

Опыт 1. Качественная реакция на витамин А.

Приборы. 1. Штатив с пробирками.

2. Набор пипеток.

Реактивы. 1. Масляный раствор витамина А.

2. Концентрированная серная кислота.

1. В пробирку налейте 3 капли масляного раствора витамина А.

2. Добавьте 1 каплю концентрированной серной кислоты.

Какими клиническими признаками выражается недостаток витамина А в организме? Как это связано с его биохимическими функциями?

Опыт 2. Обнаружение каротиноидов в моркови.

Приборы. 1. Штатив с пробирками.

2. Набор пипеток.

3. Стеклянная палочка.

Реактивы. 1. Морковь измельченная.

2. Серная кислота концентрированная.

3. Ацетон.

4. Перманганат калия, 2% раствор.

1. Небольшой кусочек моркови измельчите на мелкой терке и поместите полученную массу в пробирку.

2. Добавьте 2-3 мл любого неполярного растворителя (ацетон, гексан) и содержимое перемешайте стеклянной палочкой.

3. Отметьте изменение окраски растворителя.

4. Полученный экстракт желтого цвета перелейте в две пробирки.

5. В первую добавьте 1 каплю 2%-ного раствора перманганата калия, во вторую  1 каплю концентрированной серной кислоты.

Объясните, почему экстракт моркови имеет желтую окраску? Чем вызвано постепенное обесцвечивание раствора перманганата калия? Получили ли Вы сине-фиолетовое окрашивание экстракта с серной кислотой? Обоснуйте свой ответ.

Опыт 3. Окислительно-востановительные свойства рибофлавина.

Приборы. 1. Штатив с пробирками.

2. Набор пипеток.

Реактивы. 1. Рибофлавин, 0,025% раствор.

2. Соляная кислота концентрированная.

3. Цинк металлический.

1. К 0,5 мл 0,025%-ного раствора рибофлавина добавьте 5 капель концентрированной соляной кислоты и кусочек металлического цинка. Под влиянием выделяющегося водорода окраска раствора постепенно розовеет, затем обесцвечивается.

2. Бесцветный раствор перелейте в другую пробирку и через некоторое время наблюдайте вновь появление желтого окрашивания.

Объясните наблюдаемые явления. Как данные процессы связаны с биохимическими функциями витамина В₂?

Опыт 4. Качественная реакция на пиридоксин.

Приборы. 1. Штатив с пробирками.

2. Набор пипеток.

Реактивы. 1. Пиридоксин, 0,5% раствор.

2. Хлорное железо, 1% раствор.

1. К 0,5 мл 0,5% раствора пиридоксина добавьте 5 капель 1% раствора хлорного железа и перемешайте. Развивается красная окраска.

2. В одну пробирку поместите 1 мл водной вытяжки из серого хлеба, во вторую – 1 мл водной вытяжки из белого хлеба.

3. В обе пробирки добавьте по 1-2 капли 5% раствора хлорного железа. Встряхните.

Запишите результаты эксперимента. В вытяжке какого хлеба содержится больше витамина В₆? Какие биохимические функции выполняет витамин В₆ в организме человека и животных?

Опыт 5. Количественное определение витамина С.

Приборы. 1. Колба, 100 мл.

2. Колбы, 150 мл.

3. Набор пипеток.

Реактивы. 1. Аскорбиновая кислота.

2. Уксусная кислота, 0,6 М раствор.

3. Крахмал, 1% раствор.

4. Йод, стандартизированный раствор.

5. Дистиллированная вода.

6. Апельсиновый сок, свежий.

7. Апельсиновый сок, консервированный.

1. Внесите в колбу 25 мл свежеприготовленного раствора аскорбиновой кислоты (50 мг/100 мл дистиллированной воды)

2. Добавьте 2 мл 0,6 М уксусной кислоты и 3 мл 1%-ного раствора крахмала.

3. Оттитруйте этот раствор стандартизированным раствором йода, считая количество капель до появления синей окраски.

4. Возьмите еще 2 колбы. В первую из них, вместо аскорбиновой кислоты, добавьте 25 мл свежего апельсинового сока,

5. Во вторую – такой же объем сока консервированного (вместо сока можно использовать также мочу, разведенную 1:1 водой).

6. Оттитруйте оба раствора раствором йода до появления синей окраски.

Сравните полученные результаты и сделайте выводы. Из чего синтезируется в организме животных витамин С? Какова биологическая роль витамина С в организме?

Задание 1. Заполните таблицу, обобщающую сведения об основных коферментах.

Название кофермента	Витамин-предшественник	Биохимическая роль кофермента в катализе
1. НАД+, НАДФ+
2. ФМН, ФАД+
3. ТПФ
4. Биоцеталь
5. Ко-А
6. ПФ
7. ТГФК

Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________