Занятие № 13. «Липиды и биологические свойства клеточных мембран»
Цель занятия: рассмотреть вопросы строения и целостности клеточных мембран и роли липидов в этих процессах.
ВОПРОСЫ К КОНТРОЛЬНОЙ РАБОТЕ:
Строение и функции мембран.
Механизмы переноса веществ через мембраны.
Строение и биологическая роль фосфолипидов. Обмен фосфолипидов: распад, биосинтез.
Строение и основные этапы биосинтеза холестерина. Биологическая роль холестерина.
Строение, место синтеза и биохимическая роль биологически активных производных холестерина.
Свободнорадикальное и перекисное окисление липидов; их роль в образовании повреждений клеток, органелл и молекул. Антиоксидантные системы клеток.
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________
Экспериментальная работа.
Опыт 1. Искусственные полупроницаемые мембраны.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Стеклянные палочки.
Реактивы. 1. Силикатный клей.
2. Дистиллированная вода.
3. Безводный хлористый кобальт.
4. Безводная хлористая медь.
Для приготовления раствора силикатного клея налейте в пробирку 1 мл клея и 3 мл воды. Тщательно перемешайте содержимое стеклянной палочкой.
В пробирку бросьте кристаллики безводного хлористого кобальта или хлористой меди и хорошо встряхните (не перемешивать!), для того, чтобы кристаллы опустились на дно пробирки.
Объясните причину наблюдаемого роста дендроидных образований.
__________________________________________________________________Опыт 2. Количественное определение концентрации общего холестерина в сыворотке крови по методу Илька.
В основу метода положена модифицированная Ильком реакция Либермана-Бурхарда, реактив которого дает изумрудное окрашивание с холестерином.
В три пробирки внесите реактивы согласно следующей таблице:
|
Раствор |
Опытная проба, мл |
Калибровочная проба, мл |
Контрольная проба, мл |
|
Исследуемый образец |
0,5
|
- |
- |
|
Калибровочный раствор холестерина |
- |
0,5 |
- |
|
Дистиллированная вода |
- |
- |
0,5 |
|
Рабочий реактив |
2,0 |
2,0 |
2,0 |
Содержимое пробирок перемешайте и на 20 минут поместите в термостат при температуре 37°С.
Измерьте оптическую плотность при длине волны 650 им (красный светофильтр) опытной пробы против контрольной (D1) и калибровочной пробы против контрольной (D2).
Расчет ведут по следующей формуле:
,
где С – концентрация холестерина;
X - содержание холестерина в калибровочном растворе, ммоль/л
Сравните полученное значение с физиологическими нормами и сделайте вывод.
Опыт 3. Действие каталазы крови.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Ступка с пестиком.
4. Весы.
Реактивы. 1. Кровь.
2. Печень.
3. Перекись водорода, 2%-ный раствор.
4. Дистиллированная вода.
В пробирку налейте 2 мл дистиллированной воды. Добавьте 2 капли крови и 1 каплю 1%-ного раствора перекиси водорода.
В другую пробирку налейте 2-3 мл свежего молока. Добавьте 2 мл перекиси водорода.
В третью пробирку поместите 0,3-0,5 г растертой печени. Добавьте 10 мл дистиллированной воды. Перемешайте содержимое. Добавьте перекись водорода.
Объясните наблюдаемые явления. Почему каталаза широко распространена и содержится в большем или меньшем количестве во всех тканях и жидкостях организма?
Опыт 4. Восстанавливающая способность витамина С.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
Реактивы. 1. Витамин С, 0,01%-ный раствор.
2. Метиленовая синь, 0,02%-ный раствор.
В пробирку налейте 5 мл свежеприготовленного 0,01%-ного раствора витамина С.
Добавьте 0,5 мл 0,02%-ного раствора метиленовой сини.
Содержимое пробирки энергично встряхивайте при сильном освещении.
Через 2-3 минуты раствор становится бесцветным.
Объясните результаты опыта. Какова биохимическая роль витамина С? Каким образом клетки животных используют восстанавливающую способность витамина С?
Дата выполнения________Балл_______Подпись преподавателя____________