Глава 3. Клинико-лабораторные алгоритмы оценки системы гемостаза в организме

В основе лабораторных методик лежит определение времени образования фибринововой нити в плазме пациента. Время определяется секундами, поэтому данные полученные с помощью анализатора, где луч фотометра улавливает помутнение образца и мануальными методиками (где нить фибрина определяется визуально) - могут существенно различаться.

Выполнение методики основано на создании в условиях лаборатории модели образования фибриновой нити. Используют исключительно плазму, в которой активны все плазменные факторы в т.ч. фибриноген. Для этого цельную кровь берут в пробирку с антикоагулянтом (цитрат натрия), натрий связывает кальций и коагуляционный каскад не запускается. В лаборатории в пробирку, находящуюся в рермостате с температурой 370С, добавляют активатор (Са++) и вещество, которое является материальным субстратом – инициатором каскада. В результате за определенное время образуется нить фибрина.

Особое внимание необходимо обратить на правильность взятия крови. Часто в пробе уже при взятии крови, активируются реакции коагуляции, и все факторы становятся неактивными. В этом случае, работа с моделью в лаборатории бессмысленна, т.к. фибрин уже не образовывается.

Учитывая большое разнообразие коагулометрических методик, обязательно перед тестом необходимо проконсультироваться в лаборатории (или в справочном пособии) об особенностях взятия крови.

Оценка сосудисто-тромбоцитарного гемостаза

При исследовании сосудисто-тромбоцитарного гемостаза используются следующие методы:

•Время свертывания по Ли-Уайту,

•количество тромбоцитов в капиллярной крови.

•длительность кровотечения по Айви

•оценка агрегационных свойства (на агрегометре) тромбоцитов, позволяющая определить: скорость наступления агрегации, максимальную ее величину, угол наклона, наличие или отсутствие второй волны и процесс дезагрегации.

Увеличение времени кровотечения при нормальном содержании тромбоцитов может свидетельствовать о нарушении функции тромбоцитов.

В основном проба длительности кровотечения по Айви используется для экспрессдиагностики наиболее тяжелых (грубых) нарушений свертываемости крови.

Подсчет количества тромбоцитов

В настоящее время все шире используются определение количества тромбоцитов и их распределение по величине (гистограмма) с помощью автоматических счетчиков крови, или гематологических анализаторов. Эти аппараты точны, и позволяют проводить экспрессдиагностику (определения выполняются за 1 мин).

Развернутый анализ тромбоцитов на анализаторе позволяет определить такие показатели:

РLТ – количество тромбоцитов. Норма от 180-320•109/л; При выходе за эти пределы необходима микроскопия мазка.

MPV – средний объем тромбоцитов. «Молодые» тромбоциты имеют больший объем. MPV увеличивается с возрастом. Норма: 8,6–8,9 фл у детей 1 - 5 лет; 9,5–10,6 фл у людей старше 70 лет.

PDV - ширина распределения тромбоцитов по объему отражает степень анизоцитоза тромбоцитов.

Норма = 14-18%.

РСТ – тромбокрит доля объема цельной крови, занимаемая тромбоцитами (аналогичен Hct). Норма = 0,15–0,40%.

Исследования функциональных свойств тромбоцитов

Нормальное количество тромбоцитов может не обеспечивать полноценный гемостаз при нарушении их функциональных свойств – тромбоцитопатиях.

Поэтому в обязательном порядке исследуют функциональные свойства тромбоцитов способность к спонтанной агрегации и индуцированной различными индукторами (агонистами) агрегации: АДФ, коллагеном, ристоцетином и т. д. Для исследования функциональных свойств тромбоцитов, используют плазму богатую тромбоцитами.

Большие преимущества имеет графическая регистрация процесса на агрегометре, однако выполнение исследований требует большого количества плазмы и затрат времени.

48