Классификация в хроматографии

I.По механизмам

1)Адсорбционная хроматография: в основе лежит различная способность компонентов адсорбироваться на поверхности активного твердого вещества (адсорбента), являющегося неподвижной фазой. Подвижная фаза может быть газом или жидкостью. И соответственно виды хроматографии: газо-твердая, жидко-твердая. Вещества, обладающие малым сродством к адсорбенту, быстро продвигаются по хроматографическому слою. Вещества с большим сродством к адсорбенту движутся медленнее (коллоидная химия рассматривает механизмы адсорбции). В результате имеет место деление смесей на индивидуальные вещества, которые находятся в различных зонах хроматографического слоя неподвижной фазы.

2)Распределительная хроматография: разделение обусловлено разной способностью веществ между двумя фазами – неподвижной и подвижной (жидкость-жидкость или жидкость-газ). При контакте фаз наступает концентрационное равновесие. При движении одной фазы относительно другой равновесие нарушается и вещество начинает переходить:

а)из неподвижной фазы в свободную от вещества зону подвижной фазы;

б)из подвижной фазы в свободную от вещества зону неподвижной фазы. Вследствие разной растворимости в фазах смесь веществ при этом разделяется на отдельные вещества. Например в экстракционной жидкостной хроматографии неподвижной фазой служит органический экстрагент, нанесенный на твердый носитель, а подвижной фазой- водный раствор разделяемых соединений. Экстрагенты: диалкилфосфорные и алкилсульфоновые кислоты, фенолы, триалкилфосфаты, амины, четвертичные аммониевые основания, серосодержащие фосфорорганические соединения и др.

3)Ионообменная хроматография: применяются специальные адсорбенты, способные к обмену с подвижной фазой. Разделяемые ионы имеют различное сродство к ионообменному сорбенту и поэтому из подвижной фазы адсорбируются ионы с большим сродством к ионообменному сорбенту.

4)Проникающая (эксклюзионная) хроматография, «молекулярные сита»: используют адсорбенты с различными порами, которые отличаются размером и формой. Например жидкость-гелевая хроматография; гель-проникающая; гелевая хроматография.

5)Электрохроматография (электрофорез): движение под действием электрического поля.

6)Аффинная жидкостная хроматография: основана на образовании прочной связи со специфическими группами неподвижной фазы (лигандами, аффинантами). Взаимодействие лигандов в разделяемыми веществами основано на биологической функции этих веществ. Так, а) при разделении ферментов лигандами служат их субстраты, ингибиторы или коферменты; б)при разделении токсинов в качестве лигандов берут рецепторы; в)при разделении белков – антитела и т.д. Этот вид хроматографии особенно эффективен в биотехнологии и биомедицине для выделения ферментов, белков, гормонов.

II.По технике

1)Колоночная (в трубке).

2)Бумажная (специальная бумага для хроматографирования, или

фильтровальная).

3)Тонкослойная (пластинка - подложка).

4)Капиллярная (жидкая неподвижная фаза закреплена на стенках

капилляров, через которые пропускают подвижную фазу, обычно

газовую).

III.По cпособам хроматографического разделения

1)Фронтальная: растворенная смесь фронтом проходит через хроматографический слой последовательно в соответствии со своей степенью сродства к неподвижной фазе.

2)Элюэнтная хроматография: на стартовую линию неподвижного слоя вводят разделяемую пробу, затем пропускают подвижную фазу (элюэнт) и получают фракции элюата, содержащие индивидуальные вещества.

3)Вытеснительная хроматография: одни вещества вытесняются из хроматографического слоя другими, более прочно сорбируемыми.

4)Метод РРР (разделение – реакция – разделение) – используется довольно часто: химическая реакция проводится поле первого разделения.

Занятие 2 - Лекция 2.

Тонкослойная хроматография (ТСХ).

Метод был предложен в 1938 г. Измайловым и Шрайбером. Разделение веществ проводят в тонком слое сорбента, нанесенном на пластинку. Используется: а)для разделения сложных смесей в фармацевтическом и токсикологическом анализах;

б)для определения и идентифакации различных лекарственных веществ (аналептиков, снотворных, противосудорожных, психотропных, антибиотиков, диуретиков, анастетиков, противоопухолевых и др.);

в)его используют в клинической, теоретической биохимии, фармакологии и др. дисциплинах;

г)используют при контроле степени чистоты в производстве химических веществ и фармацевтических препаратов.