Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Приборы, системы и комплексы медико-биологического назначения. Часть 3. Лабораторное оборудование для биологии и медицины. Учебное пособие для студент.pdf
Фотометрический
метод
Электрический
импедансный
метод
Измерение оптической плотности раствора.
• Определяется гемоглобин.
Измерение электрического сопротивления клетки
при прохождении через апертуру.
• Подсчёт эритроцитов.
Таблица 10.2
• Подсчёт тромбоцитов.
• Подсчёт лейкоцитов.
• Дифференцировка лейкоцитов на 3 субпопу-
ляции
В работе гематологического анализатора используется два метода
(табл. 10.2).
Общие характеристики гематологических анализаторов:
• Полностью автоматический прибор.
• Принцип определения гемоглобина: фотометрический безциа-
нидный.
При цианидном методе утилизация отходов – это сложный процесс,
так как отходы содержат яд – соли цианистого калия.
• Принцип подсчёта и дифференциации лейкоцитов: электрический
импедансный (измерение электрического сопротивления проходящей
клетки).
на апертура, через которую осуществляется подсчёт одной клетки за одну
единицу времени.
апертуры.
нозной) и режим предилюции.
табл. 10.3.
неонтологии необходимо 20 мкл крови младенца. Кровь подносится к
пробоотборнику, происходит разбавление крови. Полученная смесь отправляется на исследования.
мочки уха, так как там хорошо развитая капиллярная сеть.
• Производительность: 30…60 тестов в час.
Если у прибора производительность 30 тестов в час, то у прибора од-
Если у прибора производительность 60 тестов в час, то у прибора две
• Дифференциация лейкоцитов на 3 субпопуляции.
• Режим работы с цельно
й кровью (как с капиллярной, так и с ве-
• Возможность подключения к ПК.
Автоматические гематологические анализаторы приведены в
Для использования гематологических анализаторов в педиатрии и
В случае нево
зможности взять кровь из пальца, кровь берётся из
41
Автоматические гематологические анализаторы. Примеры
Название
прибора
Возможность
определения
параметров
крови
Минимальный
ВС3000Plus,
Mindray/Китай
19 параметров.
Девятнадцатый параметр
целесообразен для научноисследовательских целей
13 мкл 10 мкл
Micros 60 OT 18
ABX/Франция
18 параметров
объём крови,
забираемый в
пробозаборник
Объём памяти
35 000 тестов вместе с гистограммами
Последний результат
или 60 тестов при
установке в прибор
карты памяти
Принтер
Встроенный термопринтер
Любой внешний
принтер с помощью
RS-232 подключается
опционально
Дисплей
Цветной 10,4'' ЖК
Двухстрочечный монохромный
Цена
11 330 долларов 12 900 евро
Изображение
Таблица 10.3
Оснащение гематологической лаборатории. Для того чтобы осна-
стить гематологическую лабораторию «под ключ», кроме гематологического анализатора, необходимы также приборы, представленные в
табл. 10.4.
42
Название прибора Описание
Таблица 10.4
Вортекс – перемешиватель крови
в пробирке
Rotamix RM1, Elmi,
Латвия
Микроскоп для подсчёта лейкоформулы
Eclipse E200F, Nikon,
Япония
Автоматический
анализатор СОЭ
Ves-Matic Easy, Diesse,
Италия
Через пять минут после сбора крови начинается оседание эритроцитов.
Нетщательное перемешивание крови приводит к искажению результатов анализа
Дифференцировка лейкоцитов на 3 субпопуляции – это показатель, необходимый для
скрининга.
Когда происходит измерение общего числа
лейкоцитов и изменение содержания лейкоцитов по трём субпопуляциям, то тогда необходимо произвести подсчёт эритроцитов и
лейкоформулы с помощью микроскопа.
Лейкоциты могут содержать различные
включения. Эти включения говорят о поражении
Кроме параметров, определяемых гематологическим анализатором, в общий анализ крови входит и скорость оседания эритроцитов.
Существуют разные приборы для лабораторий различного типа.
Например, в анализатор Ves-Matic Easy
можно установить 10 пробирок. Такой прибор предлагается для лаборатории небольшого типа: он позволяет определить СОЭ у
20 человек в час.
Существуют приборы, ко
торые позволяют
определить СОЭ до 100 проб в час. Такие приборы необходимы для крупной лаборатории
43
Расходные
материалы
Реагенты, Реамед (Россия).
Российские реагенты адаптированы к анали-
Продолжение табл. 10.4
затору ВС3000Plus. Их стоимость ниже китайских аналогов. Скорость поставки ниже.
Контрольная кровь, R&D Systems (США).
Контрольная кровь необходима для каждо-
дневной калибровки приборов. Контрольная
кровь R&D Systems адаптирована для
ВС3000Plus.
Минипробирки «Микровет» SARTEDT
AG&CO (Германия)
Принцип работы гематологического анализатора:
1. Реагент находится вне прибора. Специальная трубка соединяется
с реагентом.
2. Трубка опускается во флакон. Имеется датчик уровня жидкости,
который в нужную минуту, когда уровень жидкости снижается ниже определённого уровня, даёт знать о том, что реагент заканчивается. Лаборанты меняют реагенты.
3. Пробоотборник отсасывает в определённом объ
ёме кровь.
4. Происходит передача крови и смешивание с дилюентом.
5. После смешивания с дилюентом происходит подсчёт эритроци-
тов. Содержание лейкоцитов подсчитать невозможно, так как количество
лейкоцитов мало (количество эритроцитов 4,0…4,5 млн в 1 мкл, число
лейкоцитов 4…9 тыс. в 1 мкл).
6. После подсчёта эритроцитов происходит подсчёт оставшихся
клеток. Эритроциты как безъядерные клетки разру
шаются. Определяется
количество гемоглобина. Через апертуру подсчитывается количество лейкоцитов (ядерные клетки).
В случае наслоения белковых отложений по краям апертуры прибор
выдает ошибку. Промыв металлических частей пробоотборника производится гипохлоридом натрия. Промыв трубок и других полиэтиленовых
частей осуществляется специальным растровом. Помимо промывания
реагентами осуществляется электрический прожиг. Очистка апертуры
происходит не каждый ра
з, а только в случае засора.
11. ПРИНЦИП РАБОТЫ БИОХИМИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ
Биохимические анализаторы выполняют исследование различных
биологических жидкостей – сыворотки, плазмы крови, спинно-мозговой
жидкости, мочи.
44
Для исследования определённого вида биологической жидкости необходимо выбрать корректный режим работы анализатора – программу
для исследования крови, мочи и т.д.
В работе биохимических анализаторов реализовано несколько методов исследования (табл. 11.1).
Фотометрический
метод
Позволяет оценить концентрацию определяемого вещества по измерению оптической плотности реакционной
смеси.
Таблица 11.1
Определяются:
• субстраты – общий белок, криатинин, глюкоза крови,
холестерин, билирубин и пр.
• ферменты – АСТ и пр.
• электролиты – калий, натрий, магний, литий
Турбидиметрический метод
Метод анализа мутных сред, основанный на измерении
интенсивности поглощённого ими света.
• Иммунотурбидиметрические тесты
Биохимические анализаторы делятся на автоматические и полуавто-
матические (табл. 11.2).
Характеристика
Производительность
Автоматические
анализаторы
От 100 тестов в час и
выше
Полуавтоматические
Зависит от опыта лаборанта и от длительно-
Таблица 11.2
анализаторы
сти постановки теста
Предварительное
разведение,
перемешивание,
инкубация, про-
Выполняется автоматически
Проводятся вручную,
автоматически выполняется только измерение и расчёт
мывка, измерение,
расчёт результатов
Возможность
работы
без оператора
Полностью автономная
работа во время заданного цикла
Постоянное участие
оператора
45
Тип реакционных
ёмкостей
Реакционные кюветы
(одноразовые или мно-
Продолжение табл. 11.2
Проточная или налив-
ная кювета
горазовые). Если кюветы многоразовые, то у
анализатора имеется
моющая станция. Качество промывки должно
быть высоким
Минимальный объём реакционной
смеси
180 мкл
250 мкл – с проточной
кюветой,
1000 мкл – с наливной
кюветой.
При большом объёме
используется больше
реагентов. Неэкономно
Количество
светофильтров
9 встроенных.
Более точный выбор
6–7 встроенных
длины волны при измерениях
После того как лаборант вводит пробы в прибор и устанавливает необходимую программу, автоматический анализатор проводит все действия автоматически. В полуавтоматических анализаторах автоматически
проводятся только измерение и расчёт. Производительность автоматических анализаторов значительно выше.
Существуют биологические анализаторы, которые работают с первич-
ной пробой. Первичная проба – сыворотка, которая образовалась после об-
азования сгустка и оседания его на дно пробирки. В пробоотборнике име-
р
ется датчик уровня. Пробоотборник на определённой глубине обеспечивает
забор сыворотки. Как правило, забирается стандартное количество крови из
вены, поэтому приборы могут работать с первичной пробой.
Для облегчения работы прибора и уменьшения вероятности засасы-
вания сгустка из сыворотки лучше проводить центр
ифугирование крови.
Внесение жидкости во вторичную пробирку – это вторичная проба.
Использование вторичной пробы предпочтительнее.
Реагенты хранятся при определённой температуре – от 2 до 10 °С.
При такой температуре они сохранятся в открытом виде до двух недель.
Срок хранения реагентов при комнатной температуре – 3 дня.
Примеры полуавтоматических биохимических анализаторов приведены в табл. 11.3.
46
Полуавтоматические биохимические анализаторы
StatFax1904
с блоком проточной
кюветы Mosquito
Awareness
Technology (США)
Таблица 11.3
• Колесо светофильтров 340, 405, 450, 505, 545,
600 нм
• Реакционная ёмкость – наливная кювета, про-
точная кювета – при подключении Mosquito (опция). Стоимость проточной кюветы – 500 долларов
• Светодиодный 16-строчный ЖК-дисплей
• Объём памяти на 50 результатов
• StatFax1904 без блока проточной кюветы – са-
мый недорогой прибор из представленной линейки
StatFax3300
Awareness
Technology (США)
BA88
Автоматические биохимические анализаторы
BS 120, Mindray
(Китай)
• Колесо светофильтров 340, 405, 505, 545, 580,
630 нм
• Реакционные ёмкости – встроенная проточная
кювета, наливная кювета
• Большой ЖК-дисплей
• Объём памяти 500 результатов
• Колесо светофильтров 340, 405, 492, 510, 546,
578, 630 нм (7 светофильтров)
• Реакционная ёмкость – встроенная проточная кю-
вета. Кювета полностью закрыта в ёмкости прибора
• Сенсорный LCD-дисплей
• Память на 3200 результатов
• Цена 3770 долларов.
Цена ВА88 ниже, чем у StatFax3300 и StatFax1904,
но его точность выше
• Производительность 120 тестов/ч
• 340, 405, 450, 510, 546, 578, 630, 670 нм
• 8 позиций для проб
• 26 позиций для реагентов
• Вес 75 кг
• Имеется встроенный блок охлаждения реа-
гентов
47
BS 200, Mindray
(Китай)
Продолжение табл. 11.3
• Производительность 200 тестов/ч
• 340, 405, 450, 510, 546, 578, 630, 670 нм
• 40 позиций для проб
• 40 позиция для реагентов
• Вес 100 кг
• Имеется встроенный блок охлаждения реа-
гентов
ChemWell,
Awareness
Technology (США)
• Производительность 200 тестов/ч
• 96 позиций для проб, 44 – для реагентов
• 340, 405, 450, 505, 545, 600, 630, 700 нм
• ChemWell и BS 200 оптимальны для лаборато-
рий со средней проходимостью: медсанчастей
(до 6 отделений), клиник до 8 отделений и пр.
• Блок охлаждения реагентов опционален
В анализаторе с проточной кюветой к пробоотборнику подносится
кювета и забирается реакционная смесь. Проточная кювета промывается
раствором, который с помощью трубок доставляется к прибору.
В Mosquito помпа находится вне прибора. Она не встроена внутрь. Проточная кювета в анализаторе предпочтительнее наливной.
Объём памяти анализатора важен при пересмотре результатов анализов. Пациенту отдаётся не чек, выдан
справка с результатами анализов, выданная специалистом. Специалист
может ошибиться в написании справки. В этом случае можно в памяти
анализатора проверить корректные результаты анализа.
Для работы автоматических анализаторов необходим блок управления – монитор, системный блок и принтер. Результаты исследований выводятся на компьютер. К каждому прибору п
обеспечение.
Производитель гарантирует 5 лет работы анализатора. Но стоит отметить, что оборудование быстро устаревает, так как появляются новые
методы исследования и пр.
Обязательно проводится калибровка приборов. Для каждой партии
реагентов строятся калибровочные кривые. Для построения калибровочных кривых готовят 8 разведений. Воспроизводимость (разброс результатов) закрытых систем лучше открытых. Если в закры
зуются реагенты, не предусмотренные фирмой-производителем, точность
анализов снижается.
48
ный анализатором, а рукописная
оставляется программное
той системе исполь-
Компания Awareness давно присутствует на российском рынке. Врачи доверяют качеству приборов Awareness. Фирма Mindray производит
качественное оборудование на заводах Китая. Оборудование Mindray поставляется на американский и испанский рынки. Оборудование Mindray
востребовано на рынке за счёт соотношение цена/качество. Кроме того,
Mindray имеет развитую дилерскую сеть. В настоящее время в России
фирма Mindray имеет девять дилеров. Из-за бо
льшого количества дилеров
резко возросла конкуренция на конкурсах и тендерах. В поисках более
низкой цены прибора клиент обращается к различным компаниям, продающим одинаковое оборудование.
Оснащение биохимической лаборатории. Помимо прибора, в ко-
тором в качестве пробы используется плазма, сыворотка, моча, спинномозговая жидкость, в лаборатории должна быть установлена центрифуга.
ентрифуга позволит получить вторичную пробу.
Ц
Для того чтобы отобрать вторичную пробу, в лаборатории необходимы дозаторы и наконечники. Проба помещается
в боросиликатные пробирки. Боросиликатные пробирки устанавливаются в штативы.
Примеры оборудования для оснащения биохимической лаборатории и фирмы-производители:
• Центрифуги Sygma 2-6, sigma Laborzentri-
fugen (Германия) (рис. 11.1).
• Боросиликатные пробирки, DunnLabotech
(Германия).
• Штативы для бор
осиликатных пробирок.
• Комплект дозаторов и наконечников, Тер-
моЛабсистемс (Россия).
• Реагенты Diasys, Diasys (Германия).
12. ЛАБОРАТОРИЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА
Рис. 11.1
Иммуноферментная лаборатория позволяет определить иммунологические тесты:
• гормоны в крови;
• инфекции в крови;
• аллергологический статус;
• воспалительные компоненты;
• состояние иммунной системы.
Метод, лежащий в основе работы иммуноферментных анализаторов, – метод твердотельного иммуноферментного анализа. Анализаторы
используют микропланшеты. На стенках (в лунках) микропланшетов находится сорбированное вещество (антиген или антитело).
49
1. Добавляя к веществу на стенках микропланшета исследуемую
пробу, происходит распознавание: антиген взаимодействует с антителом
(если антитело присутствует в плазме).
2. Образуется иммунный комплекс.
3. Далее происходит промывание – удаление избытка пробы.
4. Инкубирование комплекса с реагентом.
5. Промывание.
6. Окрашивание раствора.
7. Фотометрирование окрашенного раствора в анализаторах.
8. Расчёт концентрации по оп
тической плотности.
Чем больше иммунокомплекса, тем больше реагент, который позволяет идентифицировать комплексы, окрасит раствор. Более интенсивная
окраска раствора указывает на то, что содержание вещества превышает
норму. Примеры полуавтоматических иммуноферментных анализаторов
приведены в табл. 12.1.
Таблица 12.1
Полуавтоматические иммуноферментные анализаторы
позволяют провести измерение и расчёт исследуемой реакционной смеси по калибровочным кривым, построить калибровочную кривую и сохранить её в памяти
StatFax2100
• Для микропланшетов и стрипов.
Стрип – это однолуночная стрипованная часть
микропланшета. Стрипы оптимальны для лаборатории небольшой проходимости. Микропланшет не используется полностью, если это не
необходимо
• ЖК-дисплей, 2 строки по 24 знака
• Память более чем на 50 методик
• 29-клавишная клавиатура
• Внешний принтер типа Epson LX300
• Автоматический обсчёт данных
• Для небо
льших участковых поликлиник,
дневного стационара, медсанчастей
StatFax3200
• Для микропланшетов и стрипов
• Встроенный LCD-дисплей
• Память более чем на 50 методик
• 29-клавишная клавиатура
• Встроенный или внешний принтер (опция)
• Для небольших участковых поликлиник,
дневного стационара, медсанчастей
50