Добавил:

ivanov666 Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.

Вуз:

Башкирский Государственный Аграрный Университет

Предмет:

[НЕСОРТИРОВАННОЕ]

Файл:

Балантидиоз свиней (совершенствование методов лечения и профилактики). Монография

.pdf

Скачиваний:

Добавлен:

07.09.2026

Размер:

2 Мб

Скачать

☆

<<< < Предыдущая 1 2 3 4 5 6 78 / 138 9 10 11 12 13 > Следующая >>>

водили вторичный посев на бактериологические чашки с твердой дифференциально-диагностической средой Левина и XLT4. Через 48 часов характерного роста не наблюдалось.

Для исследования на энтеропатогенные типы кишечной палоч-

ки готовили серии разведений порошка из личинок трутней в сте-

рильном физиологическом растворе от 1×10

– 1×106 Из каждого

разведения проводили посев на 1 мл в среду Кода. Через 24 часа термостатирования при 37 °С изменений цвета среды, характеризующего наличие кишечной палочки не наблюдалось.

Для исследования на токсинообразующие анаэробы готовили фильтрат из порошка из личинок трутней и физиологического раствора и проводили посев на среду Китта-Тароцци и ВильсонБлера. Через 24 часа почернения среды Вильсон-Блера и наличия газа в среде Китт-Тароцци, характеризующие наличие анаэробной микрофлоры не наблюдалось.

Для определения общего количества микробных клеток в стерильную пробирку помещали 1 г порошка из личинок трутней, добавляли 9 мл физиологического раствора и тщательно встряхивали. Из полученной взвеси готовили последующие разведения от 1×102 – 1×106. После оседания взвешенных частиц из верхнего слоя жидкости делали посевы. Для количественного учета микробного обсеменения в стерильные бактериологические чашки вносили по 1 мл каждого разведения и заливали 10–15 мл стерильного, расплавленного и охлажденного до температуры 44–45 °С мясопептонного агара. Осторожно покачивая чашки, засеянный материал равномерно распределяли в агаре. После застывания среды чашки помещали (вверх дном) в термостат при температуре 37 °С. После 24–48-часового термостатирования проводили подсчет выросших колоний, только в чашках, где содержатся не более 300 колоний. Результаты, полученные при подсчете колоний, умножали на разведения, суммировали и определяют количество микробов в 1 г корма. Общая бактериальная обсемененность составила 420000 микробных клеток.

Для исследования на энтерококки готовили серии разведений порошка из личинок трутней в стерильном физиологическом растворе от 1×102 – 1×106. Из каждого разведения проводили посев 1 мл в среду ЩПС. Через 24 часа термостатирования при 37 °С изменения цвета среды, характеризующего наличие энтерококков не наблюдалось.

Для исследования на энтеропатогенный протей готовили серии разведений порошка из личинок трутней в стерильном физиологическом растворе от 1×10

– 1×106. Из каждого разведения прово-

дили посев 1мл в МПА по методу Шукевича. Через 24 часа термостатирования при 37°С «ползучего» нежного роста, характеризующего наличия протея не наблюдалось (табл. 17).

Таблица 17

Микробиологические исследования порошка из личинок трутней

НД на методы испытаний

Правила бактериологического исследования кормов. Утв. ГУВ МСХ СССР 10.06.75 г.

Методика индикации бактерий рода «Протеус» от

21.05.81 г. Правила бактериологи-

ческого исследования кормов. Утв. ГУВ МСХ СССР 10.06.75 г.

Правила бактериологического исследования кормов. Утв. ГУВ МСХ СССР 10.06.75 г.

Исследуемый по-

казатель

Патогенные микроорганиз-

Допустимые

уровни

Не допу-

скается мы, в том числе сальмонеллы в 50 г продукта

Патогенная кишечная палочка

Не допу-

скается

Протей Не допу-

скается

Энтерококки Не допу-

скается

Анаэробы Не допу-

скается

Общая бактериальная обсемененность

Не более

500000

микробных

тел в 1 г.

Результаты

исследования

Не обнаружены

420000

микробных тел

Как видно из таблицы, порошок из личинок трутней доброкачественен в бактериальном отношении и может быть использован для скармливания.

9.2.5. Оценка общей токсичности порошка из личинок трутней

Токсичность – один из важнейших факторов, определяющих качество препаратов, достаточно информативный, дающий представление о безопасности и безвредности препаратов при их применении. Биологический критерий токсичности является одним из основных в токсикологии. К числу наиболее объективных методов определения токсичности относят биотестирование при помощи чувствительных тест-организмов. Мы применили методику для определения токсичности

порошка из личинок трутней, где в качестве тест-объекта выступали инфузории Paramecian caudatum. У этих инфузорий биохимические параметры близки к высшим животным, что позволяет экстраполяцию результатов, полученных при биотестировании с ними.

Этот метод определения общей токсичности растворов и водных вытяжек основан на способности инфузорий реагировать на присутствие в водных вытяжках

веществ, представляющих опасность для их существования, и направленно передвигаться по градиенту уменьшения концентраций этих веществ (хемотаксис), избегая их негативного воздействия. В данном случае критерием токсического действия будет значительное различие в числе клеток инфузорий, находящихся в верхней зоне кюветы в контрольной пробе (не содержащей токсических веществ), по сравнению с этим

показате-

лем, наблюдаемым в опытной пробе.

Мы определяли степень опасности биологически активного препарата из преимагинальных фаз трутней. Сухой порошок из личинок трутней перед исследованием разводили дистиллированной водой. Отбор проб проводили в соответствии с ГОСТ 17.4.3.01–83 (14). Параметры поведенческой реакции инфузорий определяли с помощью прибора «Биотестер».

В кювету аппарата «Биотестер» вносили 2,0 см в рабочей концентрации, к ней добавляли 0,35 см

взвеси инфузорий

5 %-ного раствора

ПВС, тщательно перемешивали, увлажняя стенки кюветы. Затем в кювету 1 наслаивали 1,6 см

раствора порошка из преимагинальных

фаз трутней на дистил лированной воде (1x10), не допуская перемешивания с нижним слоем. В кон трольную кювету вместо исследуемой жидкости вносили 1,6 см

дистиллированной воды.

Через 30 минут последовательно производили определение концентрации инфузорий в верхней зоне кюветы в контрольной и

опытной пробе. Подготовленные кюветы последовательно помещали в кюветный модуль аппарата «Биотестер» и снимали показания прибора.

Оценку общей токсичности пробы порошка из пре имагинальных фаз трутней производили по относительной разнице количества клеток в верхних зонах кювет в контрольной и анализируемой пробе. Индекс токсичности определяли по формуле:

ср.контроль

~ I

ср.опыт

ср. контроль

_______________

Т =

где I проб соответственно; Т – индекс токсичности.

ср.контроль

, I

– средние показания прибора для контрольных и ана лизируемых

ср.опыт

Полученные результаты представлены в таблице 18.

Таблица 18

Результаты определения общей токсичности порошка

из преимагинальных фаз трутней

№ пробы Тип пробы Средний показатель Токсичность

1 Контроль 89,25 Не токсична 2 С водным экстрактом 87,5 Не токсична

Из данных таблицы видно, что пробы содержат безопасные для инфузорий вещества, а значит, могут быть использованы для скармливания животным.

9.2.6. Испытание порошка из личинок трутней на лабораторных крысах

Порошок из личинок трутней, полученный в опыте 2, был испытан на лабораторных крысах семнадцати недельного возраста, подобранных по принципу аналогов в дозе 0,75 г/кг массы тела. Препарат задавали крысам внутрь 2 раза в день в течение 12 суток. Животных взвешивали до и после опыта (табл. 19). Исследовали гематологические показатели крыс после начала опыта

на 14 день (табл. 20). В качестве контроля использовали группу животных, не получавших препарат. В крови определяли количество эритроцитов, гемоглобин, тромбоцитов, лейкоцитов, средний объем эритроцита.

Таблица 19

Масса тела крыс при скармливании порошка из личинок трутней

Средние показатели массы

тела животных (г)

до опыта после опыта

№ группы

Кол-во

животных

в группе

Препарат

Доза,

(мг/кг)

Порошок

1 опыт 3

из личинок

750 266,7±5,774 300±10,000

трутней

2 контроль 3 – – 273,3±5,773 276,7±5,774

Таблица 20

Гематологические показатели у крыс при скармливании порошка

из личинок трутней

Гематологические показатели

Группа

опыт контроль

Гемоглобин g/l 139,3±3,055 85,33±30,89 Эритроциты m/ul 7,19±0,5092 4,973±1,686 Гематокрит, % 41,77±2,098 38,45±0,7094 Лейкоциты k/ul 3,723±1,104 6,707±2,128 Среднее содержание гемоглобина

в эритроците

19,4±1,217 17,07±0,4041

Средний объем эритроцита 58,2±3,451 55,2±1,706

Тромбоциты 961,1±235,9 691,7±117,9

Анализируя результаты исследований, следует отметить, что в опытной группе масса тела увеличилась на 13,7 %, а в контрольной лишь на 2,5%. Также в опытной группе по сравнению с контрольной возросло: количество гемоглобина на 37,5 %, количество эритроцитов на 30,9 %, гематокрит на 9 %, среднее содержание гемоглобина в эритрфоците на 9,6 %, средний объем эритроцита на 5,2 %, количество тромбоцитов на 28,1 %.

Таким

образом, порошок, полученный по разработанному нами способу, способствует увеличению живой массы и улучшению гематологических показателей у крыс.

9.2.7. Испытания препарата на основе порошка из личинок трутней и антибиотиков для лечения свиней с ассоциативным течением балантидиоза и пастереллеза на лабораторных крысах

Порошок из личинок трутней и антимикробных компонентов, полученный в опыте 2.2, был испытан на лабораторных крысах семнадцати недельного возраста, подобранных по принципу аналогов, в дозе 1 г/кг массы тела. Препарат задавали крысам внутрь 2 раза в день в течение 12 суток. Животных взвешивали до и после опыта (табл. 21). Исследовали гематологические показатели

крыс после начала опыта на 14-й день. В качестве контроля использовали группу животных, получавших только тилозин и диметридазол в дозе 0,09 г и 0,2 г. В крови определяли количество эритроцитов, гемоглобин, тромбоцитов, лейкоцитов, средний объем эритроцита (табл. 22).

Таблица 21

Масса тела крыс при скармливании порошка

из личинок трутней и антибиотиков

№

группы

Кол-во жи-

вотных в

группе (гол.)

Препарат, доза

(мг/кг)

Доза

(мг/кг)

Средние показатели массы

тела животных (г)

до опыта после опыта

Препарат из ли-

1 опыт 3

чинок трутней,

тилозина и ди-

1000 297,7±10,02 300±9,165

метридазола

2 контроль

Тилозин и ди-

метридазол

90 и

200

350±16,37 313±13,00

Таблица 22

Гематологические показатели у крыс при скармливании порошка

из личинок трутней и антибиотиков

Гематологические показатели

контроль опыт

Группа

Гемоглобин g/l 149,3±20,23 154±5 Эритроциты m/ul 4,927±1,605 4 Гематокрит, % 38,1±0,954 37,93±0,4731

Продолжение

Гематологические показатели

Лейкоциты k\ul 4,68±0,3304 4,373±2,052 Среднее содержание гемоглобина

в эритроците Средний объем эритроцита 54,63±2,743 55,3±1,323

контроль опыт

33,03±12,5 38,5±1,25

Группа

Анализируя полученные данные, следует отметить, что масса в опытной группе осталась в тех же пределах, а в контроле снизилась на 10 %. При сравнении данных гематологии в опытной группе уровень гемоглобина на 3,3 % больше, чем в контроле; остальные параметры можно считать непоказательными. Руководствуясь этими данными, мы сделали вывод, что препарат из личинок трутней снижает негативное действие антибиотиков, что позволяет избежать снижения массы тела животных.

Полученный порошок по сравнению с другими известными примерами имеет следующие преимущества:

– способствует повышению резистентности организма,

– имеет невысокую стоимость,

– прост в изготовлении,

– снижает потери живой массы.

9.2.8. Изучение эффективности препарата из личинок трутней и антибиотиков при балантидиозе свиней в ассоциации с пастереллезом

При получении доброкачественной животноводческой продукции одной из проблем успешной работы животноводческой отрасли является наличие инфекционных и инвазионных заболеваний продуктивных животных, связанных с понижением иммунного статуса их организма. Одними из таких заболеваний являются балантидиоз и пастереллез свиней, которые повсеместно распространены в нашей стране. Разработанный нами порошок содержит в своем

составе природные иммуномодуляторы, повышающие устойчивость организма к различным воздействиям, в том числе могут способствовать повышению сопротивляемости к заболеваниям инвазионной этиологии и нивелировать отрицательное влияние антибиотиков (тилозин и диметридазол), которые входят в состав порошка. Мы испытали его эффективность при балантидиозе свиней.

Для лечения свиней при балантидиозе в смешанной инвазии в ветеринарной практике используют сульфаниламиды, а также препараты, содержащие мышьяк и метронидазол и др. Однако эффективность этих препаратов невысока, так как в организме животных при данном заболевании происходят глубокие морфобиологические изменения, требующие применения патогенетической терапии. Поэтому в своих опытах мы

использовали специально созданный нами препарат на основе порошка из личинок трутней, тилозина и диметридазола.

Опыты проводили на свиньях крупной белой породы, больных

балантидиозом при смешанном течении с пастереллезом.

В опыте использовали 10 поросят 1,5–2-месячного возраста, живой массой 15–18 кг, у которых наблюдали следующие клинические признаки: угнетение, отсутствие аппетита и исхудание,

понос, кровоизлияния и цианоз видимых слизистых оболочек, посинение кожи. При исследовании нативных мазков из свежих теплых фекалий от больных поросят в поле зрения микроскопа были обнаружены от двух до пяти движущихся балантидий. В сыворотке крови больных поросят обнаружены антитела к пастереллезу. Больных поросят разделили на две группы по 5

голов.

Пяти животным первой группы препарат из личинок трутней и антибиотиков задавали внутрь 2 раза в день в течение 12 суток в дозе 1г на кг массы тела групповым методом в смеси с кормом.

Поросятам контрольной группы (второй) задавали только тилозин и диметридазол в дозе 0,09 г и 0,2 г соответственно в течение

дней.

Все время опыта животные находились в одном помещении, в одинаковых условиях содержания, но в разных станках, получали один и тот же рацион кормления.

Учет результатов проводили до начала дачи препаратов и на 3, 6, 9, 12 день после начала опыта: исследовали живую массу поросят, нативные мазки фекалий и клиническое состояние животных обеих

групп. Результаты представлены в таблице 23.

Анализ полученных данных показал, что у поросят первой группы с 12-го дня применения препарата из личинок трутней и антибиотиков – балантидий в мазках фекалий не обнаруживали. У животных контрольной группы балантидий обнаруживали на протяжении всего опыта. Средняя масса поросят первой группы увеличилась к окончанию опыта в среднем

на 1,3 кг, а в контроль-

ной группе снизилась на 0,9 кг.

Таблица 23

Эффективность препарата из личинок трутней и антибиотиков

при ассоциированном балантидиозе свиней

Показатели

Кол-во балантидий в фекалиях

Пало, гол Средняя

масса, кг

Кол-во балантидий в фекалиях

Пало, гол Средняя

масса, кг

До опыта 36912

5,4±1,817 3,2±1,483 1,4±1,14 1,4±1,342 0,2±0,4472

16,6±0,3391 16,6±0,3362 17±0,3161 17,4±0,3675 17,9±0,2916

4,4±1,817 3,25±1,258 2,75±0,9574 1,5±0,7071 1±1,414

17,1±0,3741 16,98±0,4349 16,68±0,1707 16,5±0,2829 16,2±0,1403

Результаты исследований через..., дней

Первая группа (n = 5)

00 000

Контрольная группа (n = 5)

01 020

Таким образом, можно сделать вывод, что скармливание препарата на основе порошка из личинок трутней и антибиотиков (тилозин и диметридазол), поросятам 1,5–2-месячного возраста в дозе 1 г/кг живой массы тела, в течение 12 дней эффективно при ассоциативном течении балантидиоза и пастереллеза, и способствует увеличению живой массы на 2,2 кг по

сравнению с контролем.

9.3. Технология производства кормовой добавки из побочных продуктов: личинок трутней и подмора пчел

Другой задачей нашей работы являлось создание безопасной кормовой добавки, в качестве основы в которых мы использовали продукты пчеловодства: подмор и личинки трутней.

Описание свойств личинок трутней пчел было дано в предыдущем разделе. Подмор пчёл содержит: белок, хитин, меланины, воск, тяжелые углеводороды, эфиры, спирты, витамины. Самым ценным

веществом подмора является хитозан – фракция хитина, которая способствует снижению высоких уровней холестерина в крови, предотвращает атеросклероз и его грозные последствия; механически очищает кишечник, нормализует его функцию, уменьшает всасывание токсинов, что делает возможной профилактику заболеваний желудочно-кишечного тракта; действует как профилактическое средство при риске развития диабета. Хитозан способен связывать

и выводить радионуклиды и соли тяжелых металлов; он активизирует заживление ожоговой и раневой поверхности без образования рубцов, при нанесении на рану обладает кровоостанавливающим и обезболивающим эффектом (Немцов С. В., Хисматуллин Р. Г., Хисматуллин М. Р., Лариков В. В., Варламов В. П., Смирнова В. В., 2007).

Но прежде чем приступить

к разработке кормовой добавки, мы испытали различные способы получения и сохранения личинок пчел в условиях пасеки, а также сбора и сохранения «подмора» пчел, отработали приемы предварительной подготовки биологичес кого материала к дальнейшей работе.

9.3.1. Способы получения и сохранения физических свойств личинок трутней и подмора пчёл в условиях пасеки

Перед началом работы все инструменты, кюветы и емкости для сбора материала предварительно мыли в воде с добавлением нейтрального моющего средства для мытья посуды и обрабатывали в течение 15 минут водными растворами КМп0

в разведении

1:1000.

С целью получения биологического материала соты с трутневым расплодом извлекали из семьи, стряхивали с них пчел. Затем с помощью ножа для распечатки сотов с них срезали выпуклые крышечки и различными способами собирали личинки пчел.

I способ. С помощью пчеловодческой вилки поддевали личин- ки пчел и вытаскивали их

из ячеек. Затем снимали их с вилки, проводя по краю приготовленного заранее кювета. При этом для сбора 100 личинок расходовали 20 секунд и 25–30 личинок оставались на месте. Кроме того, часть личинок разрывались, так как приходилось несколько раз задевать вилку из-за того, что не все личинки сразу выходили из ячеек

II способ. Рамку с раскрытым трутневым расплодом слегка

постукивали в течение 2–3 секунд о край кювета или специаль-

<<< < Предыдущая 1 2 3 4 5 6 78 / 138 9 10 11 12 13 > Следующая >>>

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]