Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Основы частной микробиологии. Учебное пособие
.pdf
в кислой среде кишечника, продвигаются в тонкий кишечник – основное место своей локализации. Здесь они прикрепляются к микроворсинкам эпителия тонкой кишки. Инкубационный период составляет от 1 до 6 дней. Вибрионы накапливаются на слизистой оболочке тонкого кишечника, где за
счет выделяемого ими экзотоксина – холерогена секретируется большое количество изотонической жидкости, которое
не может всасывать толстая кишка. Развивается диарея, часто сопровождающаяся рвотой. Испражнения имеют вид «рисового отвара». Быстрая потеря жидкости, а вместе с ней и
электролитов приводят к обезвоживанию. У больных наблюдаются цианоз, слабый кожный тургор («руки прачки»), температура понижается, но возможно и ее повышение, сгущается кровь, нарушается сердечно-сосудистая деятельность.
При тяжелых формах холеры наблюдаются летальные исходы. Биовар Эль-тор вызывает заболевание в более легкой
форме, но с более длительным вибриононосительством. От
холеры дифференцируют диареи, вызванные вибрионами, не
агглютинирующимися холерной сывороткой О1 (НАГ – вибрионы или вибрионы не О1). В 1993 г. в Западной Бенгалии
при вспышке инфекции с клиническими признаками холеры
был выделен вибрион, получивший название Vibrio cholerae
О139 bengal , относящийся по структуре соматических антигенов к подгруппе 139.
После перенесенного заболевания формируется антимикробный и антитоксический гуморальный иммунитет. Повторные заболевания холерой наблюдаются крайне редко.
Микробиологическая диагностика
Основной метод диагностики холеры – бактериологический. Материалом для исследования от больных служат
испражнения и рвотные массы; от лиц, погибших от холеры, – содержимое тонкого кишечника и желчного пузыря; из
объектов внешней среды – вода, пищевые продукты, белье и
81
посуда больного. Посев материала производят на 1% пептонную воду и щелочной агар. Рост на жидкой среде наблюдается через 5–6 ч., а на плотной – через 10–12 ч. Выделенную чистую культуру окрашивают по Граму и фуксином,
проверяют подвижность и ставят реакцию агглютинации с
холерной сывороткой О1. В случае положительных результатов (обнаружен вибрион, грамотрицательный, подвижный,
агглютинирующийся холерной сывороткой О1) дают ответ :
«обнаружен холерный вибрион». Ответ является окончательным, но неполным. Затем необходимо определить биовар,
серовар, фаговар и биохимические свойства выделенного
штамма. При определении сахаролитических свойств в пестрый ряд Гисса включают арабинозу, мальтозу и сахарозу, и в
зависимости от их разложения определяют, к какой группе
по Хейбергу относится выделенный штамм.
Лечение и профилактика
Лечение больных холерой проводится комплексно с
одновременным применением растворов для регидратации с
целью восстановления водно-солевого обмена и антибиотиков. Выбор антибиотиков в связи с появлением резистентных
к используемому ранее для этой цели тетрациклину проводится после определения чувствительности штаммов, выделенных от больных, к антибиотикам. Для лечения больных и
санации вибриононосителей используют препараты группы
фторхинолонов, бисептол.
Профилактические препараты – холерная убитая вак-
цина и холерная комбинированная вакцина, включающая
О1 – антиген холерного вибриона и холероген-анатоксин, не
нашли широкого применения, так как длительность поствакцинального иммунитета после их введения не превышает 6
месяцев. В очаге холеры для профилактики используется
холерный бактериофаг.
82
Глава 5. ВОЗБУДИТЕЛИ АНАЭРОБНЫХ
ИНФЕКЦИЙ
5.1. ВОЗБУДИТЕЛИ ГАЗОВОЙ ГАНГРЕНЫ
Характеристика возбудителей
Газовая гангрена – полимикробная инфекция. Ее возбудители относятся к роду Clostridium, семейству
Bacillaceae. Наиболее часто возбудителями газовой гангрены
являются Clostridium perfringens, Clostridium novyi, Clostridium septicum и Clostridium hystoliticum.
Все они – грамположительные палочки, образующие
споры, расположенные центрально или субтерминально и
превышающие по диаметру ширину клетки. Клостридии газовой гангрены отличаются по подвижности и способности
образовывать капсулу. Так, Clostridium perfringens неподвижна, но образует капсулу, а остальные возбудители – подвижные перетрихи, не способные к капсулообразованию.
Возбудители газовой гангрены – анаэробы, растущие
в диапазоне температур 20–50˚С. Следует отметить, что
Clostridium perfringens и Clostridium hystoliticum могут существовать в присутствии небольшого количества свободного молекулярного кислорода. Клостридии газовой гангрены
биохимически активны и разлагают многие
ки, однако эта активность неодинакова у каждого из видов.
Самая низкая – у C. hystoliticum, а самая высокая – у
C. perfringens. Она опережает других возбудителей и по скорости роста. Так, на жидких питательных средах она уже через 1–3 ч дает интенсивный рост с помутнением среды и
бурным газообразованием. Другие же виды
24 ч образуют сначала придонный рост, который затем распределяется по всему объему с выделением пузырьков газа.
углеводы и бел-
только через 18–
83
Аналогично различается скорость роста клостридий и в
плотных средах.
Клостридии газовой гангрены обладают большим арсеналом факторов патогенности, основными из которых являются токсины. Типы токсинов и их набор у каждого возбудителя индивидуален и служит важным дифференциальнодиагностическим признаком. Наиболее часто клостридии
ародуцируют альфа-токсин, обладающий множественным
биологическим действием: летальным, некротическим и гемолитическим. Он способствует также отеку ткани, гидролизует фосфолипиды. Бета-токсин вызывает некроз ткани, обладает гемолитической и лецитиназной активностью. Выделены и другие токсины, обладающие некротическими и летальными свойствами, продуцируемые клостридиями газовой гангрены. Некоторые штаммы продуцируют энтеротоксин. Возбудители заболевания выделяют и ряд ферментов
агрессии – коллагеназу, гиалуронидазу, дезоксирибонуклеазу, разрушающие соединительные ткани.
Разнообразна и антигенная структура клостридий. Она
представлена соматическими О-антигенами. Жгутиковые Нантигены имеют подвижные клостридии, а К-антигены –
капсулообразующие. Однако перечисленные антигены бактериальных клеток не имеют диагностической значимости.
При идентификации возбудителей газовой гангрены определяют антигенную структуру продуцируемых ими токсинов и
на этом основании у каждого вида клостридий выделяют серотипы. Так, C. perfringens представлена 6 серотипами, а C.
novyi – 4.
Вегетативные формы клостридий газовой гангрены
малоустойчивы к воздействию факторов внешней среды и
быстро погибают в присутствии свободного кислорода, при
воздействии высокой температуры, солнечного света, дезинфицирующих веществ. В отличие от них споры обладают
большей устойчивостью
, но у различных видов она неодина-
84
кова. Например, споры C. perfringens при кипячении гибнут
через 15–30 мин, C. septicum – через несколько минут, а C.
novyi – через 1–2 ч.
Эпидемиология, патогенез, клинические проявления,
иммунитет
Газовая гангрена – раневая анаэробная токсикоинфекция, вызываемая несколькими возбудителями. При этом не
только каждый из возбудителей может вызвать заболевание,
но и в любом сочетании с другими. Естественная среда
обитания клостридий газовой гангрены – кишечник теплокровных животных, особенно травоядных, и свиней, а также
человека. Выделяясь с испражнениями, бациллы попадают в
почву и в виде спор сохраняются в ней длительное время.
Входными воротами для возбудителей газовой гангрены
служат раны (особенно глубокие, полученные при осколочных ранениях, открытых переломах и др.). Благоприятной
средой для клостридий являются некротизированные или поврежденные ткани. Вот почему больший процент заболеваний газовой гангреной отмечается на тех территориях, где
ведутся военные действия. Газовая гангрена встречается и в
мирное время при стихийных бедствиях, обрушениях зданий,
автокатастрофах. Газовая гангрена отмечается и как осложнение после операций или абортов (обычно внебольничных).
Вместе с почвой споры попадают в раны.
Инкубационный период составляет от нескольких часов до 5 и более дней. Споры превращаются в вегетативные
клетки, которые размножаются и начинают продуцировать
токсины. Затем они проникают в здоровые ткани и вызывают характерные для газовой гангрены поражения. Клинические признаки заболевания: отеки, некроз мышечной и со
единительной ткани, газообразование за счет ферментативной деятельности возбудителей. Общая интоксикация обу-
-
85
словлена действием микробных токсинов и продуктов тканевого распада, всасывающихся в кровь. В тяжелых случаях
развивается сепсис.
Постинфекционный иммунитет изучен недостаточно.
Полагают, что основную защитную роль играют антитоксины.
Микробиологическая диагностика
Основные методы диагностики газовой гангрены –
бактериоскопический, бактериологический и биологический.
Материалом для исследования служат отечная жидкость,
некротизированные ткани, экссудат из раны, кровь. Бактериоскопическое исследование проводят в мазках, окрашенных по Граму, и в реакции иммунофлюоресценции (РИФ).
Выделение чистой культуры при бактериологическом исследовании осуществляют путем посева исследуемого материала на питательные среды: Китта–Тароцци, кровяной агар,
среду Вильсона–Блера (железо-сульфитный агар.). Чашки с
посевами помещают в анаэростат, который затем ставят в
термостат. Выделенные чистые культуры клостридий идентифицируют по морфологии, культуральным, биохимическим и биологическим свойствам. Тип продуцируемого ими
токсина определяют методом биопробы на животных с использованием антитоксических сывороток. Ускоренными
методами диагностики также является биопроба на животных с нативным материалом и антитоксическими антивидовыми сыворотками, газо-жидкостная хроматография, позволяющая обнаружить продукты жизнедеятельности клостридии газовой гангрены в исследуемом материале. Параллельно с этим проводят экспресс-диагностику: микроскопируют
материал, ставят РИФ и делают посевы в среды Китта–
Тароцци, Вильсона–Блера и молоко.
86
Лечение и профилактика
Для лечения газовой гангрены используют лошадиные
поливалентные антитоксические сыворотки, содержащие антитела к токсинам, вырабатываемым различными возбудителями заболевания. После идентификации возбудителя лечение продолжают, вводя сыворотку против токсина данного
вида клостридий. Одновременно используют антибиотики и
сульфаниламидные препараты.
Профилактика газовой гангрены при ранениях также
осуществляется введением поливалентной антитоксической
сыворотки.
5.2. ВОЗБУДИТЕЛЬ СТОЛБНЯКА
Характеристика возбудителя
Clostridium tetani – возбудитель столбняка – грамположительная палочка, подвижная (перитрих), не образует
капсулы, но формирует терминально расположенную спору.
Диаметр споры превышает ширину вегетативной клетки и
делает микроб похожим на барабанную палочку.
Тип дыхания – облигатно анаэробный. Клостридии
столбняка культивируются на среде Китта–Тароцци, сахарном или кровяном агаре. Оптимальные условия роста: температура 37˚С, рН 7,0–7,9. При этом на среде Китта–Тароцци
наблюдается легкое помутнение, на кровяном агаре – зоны
гемолиза, а в столбике с сахарным агаром образуются
хлопьевидные колонии. Возбудитель столбняка не ферментирует углеводы, не образует индола, но восстанавливает
нитраты, разжижает желатину и медленно свертывает моло-
87
ко. C. tetani имеет типоспецифические Н-антигены, на основании которых выделяют 10 сероваров, и видоспецифические О-антигены. Антигенными свойствами обладает и экзотоксин, который определяет патогенез и клинику столбняка.
Экзотоксин представляет собой белок и состоит из двух
фракций – тетаноспазмина, поражающего нервные ткани и
провоцирующего спазм поперечнополосатых мышц, и тетанолизина, разрушающего эритроциты и подавляющего фагоцитоз.
Вегетативные формы неустойчивы во внешней среде.
При кипячении они погибают через 5 мин. Устойчивость
спор очень велика. Они выдерживают действие дезинфектантов в обычных концентрациях свыше 12 ч, при кипячении
погибают только через 1 ч. При автоклавировании при 120˚С
в течение 40 мин споры сохраняют жизнеспособность.
Эпидемиология, патогенез, клинические проявления,
иммунитет
Столбняк – тяжелая раневая анаэробная токсикоинфекция с поражением двигательных клеток головного и
спинного мозга с нервно-судорожным синдромом. Возбудитель столбняка обитает в кишечнике всех теплокровных животных, не причиняя им никакого вреда. Он выделяется с испражнениями, попадает в почву, где может сохраняться в
виде спор десятилетиями и более, а при благоприятных условиях прорастать в ней и даже размножаться. Столбняком болеют люди и животные (особенно воспримчивы лошади и
мелкий рогатый скот). От человека к человеку столбняк не
передается. Возбудитель попадает в организм через поврежденные кожные покровы и слизистые оболочки. Входные ворота – раны (полученные часто
практически незаметные и поэтому не требующие обращения за медицинской помощью), занозы, потертости, ожоги,
в результате бытовых травм,
88
обморожения и более глубокие раны, полученные в результате серьезных ранений. Возможно инфицирование во время
операций и родов, проведенных с нарушением асептики.
Так, столбняк у новорожденных может развиться при
обработке пуповины с использованием нестерильных материалов. Отмечены случаи, когда при приеме родов вне медицинских учреждений, в антисанитарных условиях, невежест
венными людьми столбняк возникал при обработке пуповины золой, почвой, глиной и даже навозом, в которых содержались споры C. tetani. Летальность при этом составляла от
85 до 90%.
Инкубационный период составляет 6–14 дней, реже –
1–2 дня и иногда до 1 мес. и более. Возбудитель, попавший в
рану в виде споры, превращается в вегетативную клетку, адгезируется и колонизируется в месте входных ворот и начинает продуцировать токсин. У человека столбняк протекает
по нисходящему типу. Тетаноспазмин сначала вызывает
спазмы жевательных мышц, затем развиваются спазмы мимических мышц (сардонический смех), а затем в процесс вовлекаются скелетные мышцы, что вызывает судороги всего
тела. Больной лежит в «позе моста», опираясь на затылок и
пятки с выгнутым дугой позвоночником (опистотонус). Сознание при этом остается ясным. Смерть наступает в результате асфиксии вследствие судорожного синдрома или паралича сердца. Столбняк относится к заболеваниям с высокой
летальностью, и прогноз определяется выраженностью судорожного синдрома, быстротой его нарастания и общим
состоянием организма.
Постинфекционный иммунитет изучен недостаточно,
но считают, что он не вырабатывается. Возможны повторные
случаи заболевания.
-
89
Микробиологическая диагностика
Диагностику проводят обычно для подтверждения посмертного диагноза или в неясных случаях, а также при исследовании материалов, взятых из объектов внешней среды
(перевязочный и шовный материал, почва и др.). Материал
для исследования – раневое отделяемое, кусочки ткани, экс-
судаты, отделяемое пупочного канатика. От умерших исследуют кусочки органов и кровь. Используют бактериоскопический, бактериологический и биологический методы. При
микроскопии обращают внимание на характерную морфологию возбудителя – в виде теннисной ракетки. Бактериологи-
ческий метод включает посев материала для выделения чистой культуры анаэробных микроорганизмов с использованием жидких и плотных питательных сред (по методу Вейнберга или Цейсслера). Идентификацию проводят, определяя
морфологические, культуральные, биохимические и токсигенные свойства микроорганизма. Для определения токсина
используется биологический метод. Исследуемый материал
делят на 2 части и к одной опытной добавляют антитоксическую противостолбнячную сыворотку, нейтрализующую
токсин. Опытному животному вводят материал, обработанный антисывороткой, а контрольному – только исследуемый
материал. При содержании в нем токсина контрольное животное погибает, а опытное остается живым.
Лечение и профилактика
Лечение столбняка проводят противостолбнячной антитоксической сывороткой или противостолбнячным иммуноглобулином человека с одновременным использованием
антибиотиков.
Специфическая профилактика осуществляется планово. Для этого детям в возрасте 3–5 мес. вводят АКДС – адсорбированную коклюшно-дифтерийно-столбнячную вакци-
90
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]