Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Основы частной микробиологии. Учебное пособие
.pdf
шая часть населения переносит болезнь в легкой или бессимптомной форме, что способствует широкой циркуляции
возбудителей и высокой заболеваемости. Действительное
число больных всегда значительно выше, чем официально
регистрируемых («феномен айсберга»). Подъемы заболеваемости отмечаются в летне-осеннее время года, что связано с
употреблением загрязненных ягод, фруктов, овощей.
Шигеллы попадают в организм человека через рот. В
толстом кишечнике (сигмовидная и прямая кишки) они проникают в клетки эпителия слизистой оболочки, вызывая воспаление и образование язв и эрозий. В кровь поступают эндо- и экзотоксины бактерий, что вызывает поражение ЦНС,
изменение гемодинамики, нарушения обмена веществ.
Инкубационный период 1–4 дня. Внезапно появляются
озноб, боли внизу живота, рвота, нарушение стула, частота
которого может достигать до 10 и более раз в сутки. При тяжелой интоксикации могут быть судороги, потеря сознания,
гемодинамические расстройства. Стул скудный («ректальный плевок»), в нем содержатся слизь с прожилками крови и
примесью гноя. Дефекация сопровождается схваткообразными болями в области прямой кишки и ложными позывами на дефекацию (тенезмами). Возможно обезвоживание.
Наиболее тяжелые формы болезни вызывает S. dysenteriae.
Постинфекционный иммунитет видо- и серовароспецифический, нестойкий. В защите макроорганизма от заболевания важное значение имеет секреторный IgA, обеспечивающий элиминацию шигелл из кишечника.
Микробиологическая диагностика
Основным методом диагностики является бактериологический. Он основывается на выделении
пражнений (копрокультуры), их идентификации и имеет в
подавляющем большинстве случаев абсолютное значение.
71
шигелл из ис-
Для целей эпиданализа, имеющего исключительно
важное значение для установления источников и путей передачи инфекции, проводится определение фаготипа выделенных штаммов шигелл. Типовые фаги обнаружены у S. flex-
neri, S. boydii, S. sonnei.
Среди шигелл широко распространена устойчивость к
антибиотикам и сульфаниламидам. В связи с этим обязательным является определение чувствительности выделенных
штаммов к антибактериальным препаратам. Для этой цели
применяют метод «бумажных дисков».
Для выявления антигенов шигелл в материалах от
больных (кровь, испражнения, моча) используют серологические тесты – РИФ, РПГА, РСК, ИФА, КО-агглютинация.
Они пригодны для ранней диагностики болезни.
Для обнаружения антител в сыворотке крови больных применяют РПГА, РНИФ.
Лечение и профилактика
В качестве этиотропной терапии используют анти-
биотики (осторожно в связи с возможностью развития дисбактериоза) и фторхинолоны. Широко применяют поливалентный дизентерийный бактериофаг. Для лечения затянувшихся форм шигеллеза вне периода обострения применяют
дизентерийную спиртовую вакцину с целью специфической
стимуляции иммунитета.
В настоящее время нет эффективных вакцин для профилактики болезни
против шигеллеза Зоне у взрослых и детей старше 3 лет рекомендована вакцина «Шигеллвак», приготовленная из очищенного липополисахарида (ЛПС) S.sonnei. Разрабатываются живые энтеральные вакцины из стрептомицинзависимых
мутантов шигелл.
. Для формирования иммунной защиты
72
В сезон подъема заболеваемости рекомендуется ис-
пользовать поливалентный дизентерийный бактериофаг в
детских дошкольных учреждениях и среди работников пищевых предприятий.
4.3. ВОЗБУДИТЕЛИ ЭШЕРИХИОЗОВ
(КОЛИЭНТЕРИТОВ)
Общая характеристика эшерихий
Ecsherichia coli семейства Enterobacteriaceae является
резидентным обитателем толстого кишечника человека. Находясь здесь, кишечные палочки выполняют весьма важные
функции: препятствуют заселению кишечника патогенными
бактериями, грибами рода Candida и др., участвуют в процессах расщепления клетчатки и синтезе витаминов групп В,
Е, К2, в обмене холестерина и желчных кислот, стимулируют
развитие лимфоидной ткани и функций иммунной системы
и др. E. coli выделяется с испражениями, постоянно обнаруживается во внешней среде (почва, вода, предметы) и используется как показатель степени фекального загрязнения
этих объектов.
Название рода дано в честь австрийского врача
T. Ecsherich, выделившего эту бактерию из кишечника детей
с диареей (1885 г.).
Резидентные штаммы E. coli относятся к условнопатогенным бактериям. Они могут вызывать генерализованные эндогенные инфекции (сепсис, септикопиемию, токсикоаллергические заболевания и др.) или местные гнойновоспалительные процессы в коже (инфицированные ожоговые, травматические, послеоперационные раны, абцессы,
73
флегмоны и др.) и внутренних органах (отиты, инфекции мочеполовых органов, дыхательной системы и др.).
Облигатно патогенные E. coli (диареегенные по классификации ВОЗ) являются возбудителями экзогенных инфекций. Они ответственны за развитие кишечных эшерихиозов (диарей) со спорадическим или эпидемическим распространением.
Характеристика диареегенных E. coli
E. coli – короткие палочки с закругленными концами
размером 0,5–0,8х1,5–3,0 мкм, перитрихи. Некоторые представители неподвижны. Ряд штаммов имеют капсулу. Спор
не образуют. Грамотрицательны. E. coli – факультативные
анаэробы, хорошо растут на простых питательных средах.
Оптимальная температура роста 37˚С. В МПБ выявляется
диффузное помутнение. На МПА образуются колонии круглые, выпуклые, с гладкой блестящей поверхностью, полупрозрачные. На дифференциально-диагностических средах
(Эндо, Левина, Плоскирева) колонии, ферментирующие лактозу, окрашены в цвет индикатора.
Ферментативная активность кишечной палочки довольно высока. Она разлагает углеводы (лактозу, глюкозу,
мальтозу, маннит, арабинозу, иногда сахарозу и др.) с образованием кислоты и газа. Однако встречаются штаммы, медленно сбраживающие лактозу или не обладающие этим свойством. Образует индол,
каталазаположительна.
Устойчивость к факторам внешней среды. В воде и
почве эшерихии выживают относительно долго – от нескольких недель до 1 мес. Это позволяет использовать кишечную
палочку в качестве показателя фекального загрязнения воды
и почвы. Они высокочувствительны к различным дезинфицирующим веществам в обычных концентрациях.
восстанавливает нитраты в нитриты,
74
Антигенная структура представлена:
– соматическим липополисахаридным термостабильным
антигеном (О-АГ). На основании его различий выделено
164 серовара E. coli;
– жгутиковым термолабильным антигеном (Н-АГ). Диффе-
ренцируют около 60 сероваров E. coli по Н-АГ;
– капсульным поверхностным антигеном (К-АГ).
Антигены сероваров обозначают арабскими цифрами.
Пример антигенной формулы E. coli – О
124 К72
Н.
К факторам патогенности диареегенных E. coli отно-
сят: токсинообразование, способность к адгезии и колониза-
ции, осуществляемую пилями и протеином внешней мембра-
ны (интимином), способность к инвазии в эпителиальные
клетки и продукции гемолизина, колицинов. У них обнаружены экзотоксины (энтеротоксины и шигаподобный цитотоксин) и эндотоксин (ЛПС клеточной стенки). Токсины и
другие факторы агрессии кодируются плазмидами (Ent, Hly,
Col и др.) или генами конвертируемых фагов.
В зависимости от наличия и активности факторов патогенности диареегенные E. coli делятся на 5 групп:
– энтеротоксигенные (ETEC), выделяющие энтеротокси-
ны и вызывающие острые холероподобные заболевания
и вспышки пищевых токсикоинфекций с диареей, тошнотой, рвотой, обезвоживанием, повышением температуры;
– энтеропатогенные (EPEC), обладающие адгезивными
свойствами и выделяющие шигаподобный цитотоксин,
что сопровождается повреждением поверхностного
эпителия тонкой кишки, развитием обильной водянистой диареи и обезвоживанием;
– энтероинвазивные (EIEC), характеризующиеся способ-
ностью к эпителиальной инвазии, что сопровождается
развитием дизентериеподобного колитического син-
75
дрома с развитием токсикоза, наличием в стуле слизи,
крови, лейкоцитов;
– энтерогеморрагические (EHEC), обладающие адгезив-
ными, инвазивными свойствами и продуцирующие шигаподобные экзотоксины. Заболевание известно как геморрагический колит и протекает с болями в животе,
тошнотой, рвотой, жидким стулом с обильной примесью крови («только кровь без стула»). Возможно поражение почек с развитием гемолитико-уремического
синдрома (ГУС);
– энтероадгезивные (EAEC), проявляющие адгезивные
свойства в культуре клеток Hep-2 in vitro. Изучены недостаточно.
Эпидемиология, патогенез, клинические проявления,
иммунитет
Источником экзогенной инфекции являются больные
люди или бактерионосители. Механизм передачи – фекальнооральный, который осуществляется алиментарным или контактно-бытовым путем. Факторами передачи являются вода,
пища (особенно молочная), грязные руки, мухи. Заболевае-
мость увеличивается в летне-осеннее время года.
Шигеллы, попав в организм через рот и преодолев
верхние отделы пищеварительного тракта, задерживаются в
толстом отделе кишечника. Здесь они проникают в клетки
эпителия слизистой оболочки, вызывая в ней катаральное
или фибринозно-некротическое воспаление с образованием
язв. В кровь поступают эндо- и экзотоксины бактерий, которые вызывают поражение центральной нервной системы, изменения гемодинамики, нарушения обмена веществ.
Инкубационный период составляет 1–4 дня. Заболевание начинается с внезапного озноба, боли внизу живота, рвоты и нарушения стула, частота которого может достигать 10
76
и более раз в сутки. Дефекация сопровождается схваткообразными болями в области прямой кишки и ложными позывами на стул (тенезмами). Стул скудный («ректальный плевок»), в нем содержатся слизистые массы с прожилками крови, гноем и эпителиальными клетками. В отдельных случаях
возможно обезвоживание. Наиболее тяжело протекает заболевание, вызванное
Постинфекционный иммунитет видо- и серовароспецифический, нестойкий. В крови присутствуют антитела
(агглютинины, преципитины, гемагглютинины, комплементсвязывающие антитела и др.), однако их роль в защите организма от повторного заболевания невелика. Важное значение
имеет лишь секреторный Ig A, способствующий элиминации
шигелл из желудочно-кишечного тракта.
Микробиологическая диагностика
Основное значение имеет бактериологическое исследование. У выделенной чистой культуры возбудителя обязательно изучают морфологию, ферментативные и антигенные свойства, определяют серогруппу E. coli в реакциях агглютинации с
групповыми и типовыми диагностическими сыворотками.
Для обнаружения в фекалиях экзотоксинов используют ИФА, реакцию ко-агглютинации или реакцию преципитации в агаре. Определение цитотоксинов проводят на культурах клеток Hela, Vero или ставят кератоконъюнктивальную пробу на кроликах.
С целью определения антител в сыворотке крови
применяют РНГА с О-эритроцитарными диагностикумами.
Наиболее специфичным и быстрым методом является
постановка ПЦР для выявления генов плазмид инвазивности
или адгезии.
S. dysenteriae.
77
Лечение и профилактика
Для лечения эшерихиозов применяют антибиотики
(ампициллин, норфлоксацин, цефалоспорины и др.), пробио-
тики, содержащие молочно-кислые бактерии. Проводится
борьба с обезвоживанием.
Специфическая профилактика эшерихиозов находится в стадии разработки. Предложены и проходят апробацию
следующие вакцины:
– токсоидная вакцина (предложена американскими уче-
ными Levin & Ewans) стимулирует выработку сывороточных и копроантител, которые и боеспечивают защиту от инфекции;
– моновакцина живая, приготовлена из аттенуированных
штаммов ETEC;
– оральная живая аттенуированная бивалентная вакцина
против брюшного тифа и ETEC;
– поливалентная фимбриальная вакцина (из фимбрий
ETEC) предотвращает колонизацию тонкой кишки диа-
реегенными E. coli.
4.4. ВОЗБУДИТЕЛИ ХОЛЕРЫ
Характеристика возбудителей
Возбудители холеры относятся к семейству Vibriona-
ceae,
грамотрицательные подвижные палочки с одним жгутиком.
Спор и капсул не образуют, склонны к полиморфизму. Под
действием ряда факторов способны образовывать L-формы.
Возбудителями холеры являются вибрионы 2 биоваров: Vi-
роду Vibrio и представляют собой слегка изогнутые
78
brio cholera cholera (вибрион Коха, классический холерный
вибрион) и Vibrio cholera eltor.
Тип дыхания – факультативно-анаэробный, но при
культивировании выражены аэробные свойства. Температурный оптимум +37˚С.
Холерные вибрионы растут на простых питательных
средах, но являются щелочелюбивыми микроорганизмами и
оптимальные показатели рН для них 7,6–8,0. Элективные
среды для холерных вибрионов – 1% пептонная вода и щелочной агар. На жидких питательных средах вибрионы растут, образуя поверхностную пленку, а на плотных средах
формируют колонии S-формы.
Возбудители холеры биохимически активны и ферментируют с образованием кислоты без газа сахарозу, маннозу, глюкозу, маннит, расщепляют крахмал, но не разлагают
арабинозу и глюкозу. Продуцируют индол при расщеплении
белков, восстанавливают нитраты до нитритов, но не образуют сероводород.
Холерные вибрионы имеют жгутиковые (Н) и соматические (О) антигены. Н-антигены одинаковы у всех представителей рода Vibrio и поэтому не являются специфичными. По составу О-антигенов все вибрионы этого рода подразделяются на серогруппы. Известно около 200 серогрупп.
Оба биовара относятся к серогруппе О1, внутри
деляют 3 серовара: Инаба, Огава и Гикошима.
Холерные вибрионы образуют токсины нескольких
типов – эндотоксин, экзотоксин (холероген) и фактор сосудистой проницаемости. Экзотоксин является основным фактором патогенности. Его продукция регулируется tox-геном.
Он термолабилен, вызывает гиперсекрецию воды и хлоридов
в просвет кишечника и нарушает их обратное всасывание,
что приводит к
токсин – термостабильный липополисахарид – вызывает интоксикацию и защищает вибрионы от фагоцитоза. Фактор
быстрому обезвоживанию организма. Эндо-
которой вы-
79
сосудистой проницаемости повышает проницаемость капилляров. Патогенность холерных вибрионов обусловлена также
их подвижностью, позволяющей быстро распространяться в
организме, и синтезом ферментов агрессии: муциназы, протеаз, нейраминидазы, способствующих адгезии, разрушению
белков и взаимодействию с клетками эпителия кишечника.
Функцию адгезии выполняют и белки наружной мембраны
вибрионов.
Возбудители холеры обладают невысокой устойчивостью во внешней среде. Они погибают через 30 мин. при
температуре 56˚С, а при 100˚С – мгновенно; очень чувствительны к дезинфицирующим веществам, особенно кислотам,
которые убивают их в концентрации 1:10 000 за 1 мин. Относительно долго вибрионы выживают в воде. Этому способствуют пониженная температура, которую они выдерживают
лучше, чем повышенную, и щелочные показатели рН. Так,
при комнатной температуре в стерильной воде вибрионы сохраняются до 17 дней, а при понижении температуры до +5 –
10˚С – до 42 дней. Биовар eltor более устойчив по сравнению
с классическим вибрионом. Есть данные о том, что при благоприятных условиях он способен даже размножаться в воде
природных водоемов. У возбудителей холеры паразитируют
видовые и биовароспецифичные бактериофаги.
Эпидемиология, патогенез, клинические проявления,
иммунитет
Холера – острая антропонозная особо опасная карантинная инфекция, вызывающая массовые вспышки среди населения на различных территориях (пандемии). С 1961 г. по
настоящее время наблюдается 7-я по счету пандемия холеры.
Источники инфекции – больные люди и вибрионосители.
Пути передачи: водный, пищевой, контактно-бытовой. Механизм передачи – фекально-оральный. Возбудители попадают в организм через рот, и те из них, которые не погибают
80
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]