Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Основы частной микробиологии. Учебное пособие
.pdf
более 100 000 бактерий в 1 мл, поэтому часто используют
различные методы обогащения;
• бактериологическое исследование с использованием для
выделения чистой культуры бактерий яичной среды Левенштейна–Йенсена (рекомендация ВОЗ). Чувствительность этого метода – 20–100 бактерий в 1 мл исследуемого материала. Недостатком его является необходимость
длительного выдерживания посевов в термостате (не менее 3–8 нед
определения чувствительности выделенных бактерий к
антибиотикам. К ускоренному методу выделения возбудителей относится метод микрокультур Прайса на предметном стекле. Через 3–4 дня культивирования в среде с
цитратной кровью на поверхности стекла вырастают
микроколонии, выявляемые при окраске по методу ЦиляНильсена. Высокий уровень бактериологической диагностики достигнут при использовании полуавтоматической
системы BACTEC 460 и полностью автоматизированной
системы BACTEC MGIT 960 для выращивания и идентификации микобактерий;
• биологический метод на морских свинках, который счи-
тается «золотым стандартом» в диагностике туберкулеза.
Минимальное количество бактерий, при котором проба
становится положительной, составляет 5 бактерий в 1 мл
материала;
• аллергическая проба Манту с туберкулином;
• серологические тесты – РСК, РНГА позволяют выявить
антитела в сыворотке крови больных. Они ставятся обязательно в динамике;
• метод ПЦР позволяет проводить идентификацию мико-
бактерий за 5–6 ч и обладает высокой специфичностью и
чувствительностью (1–10 бактерий в образце).
.) при 37°С. Метод используется также для
101
Лечение и профилактика
Специфическое лечение туберкулеза проводят противотуберкулезными препаратами, к которым относятся: изониазид, рифампицин, стрептомицин, этамбутол – это препараты основной, первой группы. К препаратам резерва относят канамицин, циклосерин, фторхинолоны, ПАСК и др.
Специфическая профилактика туберкулеза проводится вакциной БЦЖ (BCG), полученной французскими учеными Кальметтом и Гереном. Вакцинацию новорожденных
проводят на 4–7-й день жизни строго внутрикожно в дозе
0,05 мг. Иммунитет развивается через 1–3 мес. после вакцинации и сохраняется в течение 5–7 лет.
102
Глава 7. СПИРОХЕТОЗЫ
7.1. ВОЗБУДИТЕЛЬ СИФИЛИСА
Сифилис – венерическое (лат. venus – Венера, богиня
любви) антропонозное хроническое инфекционное заболевание, передающееся главным образом половым путем, протекающее с поражением различных органов и тканей и имеющее циклическое течение.
Характеристика возбудителя
Возбудителем сифилиса является спирохета Treponema
pallidum (от греч. trepo – поворачивать, nemo – нить, pallidum –
бледный), обнаруженная в 1905 г. Ф. Шаудиным и Э. Гоффманом.
T. pallidum – грамотрицательные спирохеты, окрашиваются по методу Романовского–Гимзы в бледно-розовый цвет.
Клетка T. pallidum имеет форму спирали с неглубокими равномерными завитками размером 0,2–0,6х4,0–18,0 мкм. Количество завитков 8–14. Концы спирали заострены. Снаружи она
покрыта чехлом мукопротеидной природы, под которым находится трехслойная клеточная стенка и ЦПМ, в которую заключен цитоплазматический цилиндр, содержащий нуклеоид, рибосомы, мезосомы, различные включения. На каждом
конце клетки имеются блефаропласты, к которым прикреплены 1–10 фибрилл. Они располагаются под клеточной мембраной и обеспечивают движение спирохеты. Характер движений медленный поступательный, вращательный и сгибательный. При неблагоприятных условиях трепонема может
существовать в виде цист и L-форм. Цисты покрыты многослойной муциновой оболочкой и содержат свернутую в спираль клетку. Они рассматриваются как стадии покоя. Из цист
и L-форм могут образовываться обычные спиралевидные
формы.
103
Эти бактерии являются хемоорганотрофами, требовательны к условиям культивирования. Их выращивают в
жидких средах, содержащих мозговую или почечную ткань,
сыворотку кролика при 35°С и в анаэробных условиях. Время генерации 30–33 ч. Однако выращенные культуры теряют
свою патогенность (культуральные трепонемы). Тканевые
трепонемы, сохраняющие исходные свойства возбудителей,
получают пассированием их в ткани яичек кроликов. Они
способны ферментировать углеводы, продуцировать индол и
сероводород, гемолизируют эритроциты человека, кролика,
барана, лошади, морской свинки.
Бледная трепонема обладает слабой резистентностью
к действию факторов внешней среды. Высокочувствительна
к высушиванию, действию высокой температуры, свету, солям ртути, висмута, мышьяку, пенициллину. Хорошо сохраняет жизнеспособность при низких температурах.
Антигенная структура сложная, связана с липопротеидами, полисахаридами и белками наружной мембраны.
Имеет общие антигены с другими трепонемами. Обладает
перекрестно-реагирующими антигенами, общими для человека и КРС.
Факторами патогенности являются ЛПС и белки наружной мембраны, обладающие токсическими свойствами,
гиалуронидаза.
Эпидемиология, патогенез, клинические проявления,
иммунитет
Естественной средой обитания T. pallidum является
организм человека. Животные не восприимчивы к этой спирохете. В лабораторных условиях удалось заразить обезьян,
кроликов и хомячков.
Источником инфекции является больной человек. Все
выделения от больного содержат возбудителя и поэтому за-
104
разны. Пути заражения: половой (основной), контактнобытовой, трансплацентарный.
Восприимчивость людей к бледной трепонеме очень
высокая. Инфицирующая доза 10–100 клеток.
Сифилис относится к группе социальных болезней.
Неблагополучные условия жизни (нищета, алкоголизм, войны и др.) способствуют быстрому и широкому распространению этой инфекции.
Возбудитель проникает в организм через поврежденные слизистые оболочки или кожу. После инкубационного
периода длительностью 3–4 нед. в месте входных ворот возникает безболезненная язва с плотным инфильтратом – пер-
вичная сифилома или твердый шанкр. В воспалительный
процесс вовлекаются регионарные лимфатические узлы. Это
первичный период сифилиса, возникающий как результат местной сенсибилизации тканей с развитием тканевой аллергии
(ГЗТ).
Вторичный период сифилиса связан с проникновением спирохет в кровь и генерализацией процесса. Характерны
лихорадка, высыпания различного типа на коже и слизистых
оболочках (вторичные сифилиды), увеличение лимфоузлов,
реже поражаются внутренние органы (печень, периферическая нервная система и др.). В течение инфекции отмечается
чередование активных проявлений с периодами ремиссий.
Общая продолжительность вторичного сифилиса 2–4 года.
В периоды первичного и вторичного сифилиса больные опасны для окружающих как источники инфекции, так
как все элементы сыпи и все выделения содержат большое
количество спирохет.
Третичный период характеризуется формированием
инфильтратов в коже и внутренних органах, склонных к распаду (гуммы, бугорки). В таких элементах содержится мало
спирохет, поэтому заразительность этого периода мала. Проникновение в мозг большого количества возбудителей при-
105
водит к глубокому повреждению ЦНС с развитием параличей.
В течение заболевания развивается нестерильный
(инфекционный) иммунитет, который не обеспечивает полной гибели возбудителя и сопровождается формированием
инфекционной аллергии (ГЗТ).
После освобождения организма от трепонем (в процессе лечения) иммунитет и аллергия исчезают. Возможны
повторные заболевания в результате реинфекции.
Микробиологическая диагностика
Диагноз первичного сифилиса ставят на основании
исследования отделяемого твердого шанкра методом темнопольной микроскопии или окраской по методу Романовского–Гимзы. На 3–4-й неделе после появления твердого шанкра в крови обнаруживаются антитела, и для диагностики
применяются неспецифические (для выявления реагинов) и
специфические серологические тесты. К неспецифическим
(стандартным) методам относятся РСК с кардиолипином
(реакция Вассермана) или ее модификация с постановкой на
холоду (реакция Колмера), осадочные реакции (цитохолевая,
Закса–Витебского и др.), RPR (rapid plasma reagin), микрореакция преципитации (VDRL). Последние две относятся к
экспресс-методам.
Специфическими (трепонемными) серологическими
тестами являются РИТ (реакция иммобилизации трепонем),
РНИФ, РСК с трепонемным антигеном, РНГА, ИФА.
ПЦР-тесты для выявления ДНК бледной трепонемы
были разработаны в 1991 г. и в настоящее время активно
применяются в диагностике нейросифилиса, врожденного
сифилиса и др.
106
Лечение и профилактика
Для химиотерапии и химиопрофилактики используют
антибиотики группы пенициллина, макролиды, цефалоспорины. После лечения пациенты находятся под наблюдением
от 3 мес. до 3 лет.
Специфическая профилактика не разработана.
7.2. ВОЗБУДИТЕЛИ БОРРЕЛИОЗОВ
Общая характеристика боррелий
Боррелии – извитые бактерии размером 0,2–0,5х3–
20 мкм, образуют 3–10 неравномерных крупных витков. Ак-
тивно подвижные, грамотрицательные, по Романовскому–
Гимзе окрашиваются в сине-фиолетовый цвет.
При электронной микроскопии виден цитоплазматический цилиндр (ЦПЦ), покрытый мембраной, в котором находятся нуклеоид, мезосомы, рибосомы, гранулы с питательными веществами. На концах его имеются базальные тела, от
которых берут начало 15–20 фибрилл, обвивающих ЦПЦ.
Снаружи ЦПЦ и фибриллы покрыты пенистой 3-слойной на
ружной оболочкой. При неблагоприятных условиях образуются цисты, внутри которых содержится свернутый ЦПЦ.
Строгие анаэробы. Культивируют на сложных питательных средах с нативным белком и кусочками органов
(мозга, яичка кролика) при рН 7,2–7,4 или в курином эмбрионе. Жидкие среды заливают вазелиновым маслом для
создания анаэробных условий. Оптимальная температура
культивирования 28–30°С
обнаруживают на 6–8-е сут.
. Время генерации 12–16 ч. Рост
-
107
Боррелии неустойчивы во внешней среде: быстро погибают при высушивании и действии солнечного света, при нагревании (при 45–50°С через 30 мин.), при комнатной температуре жизнеспособность сохраняется до 8 сут., в цитратной крови животных выживают до 6–8 сут. Высоко-чувствительны к
действию дезинфицирующих веществ. Хорошо переносят низкие температуры.
Ферментативные свойства изучены недостаточно.
Расщепляют глюкозу с образованием газа.
Антигенная структура не стабильна, легко изменяется в макроорганизме под влиянием антител и других факторов защиты.
Родовое название дано в честь французского бактериолога А. Борреля (A. Borrel), изучавшего спирохеты. В настоящее время известно более 30 видов боррелий, различающихся по степени адаптации к различным членистоногим
(вшам, клещам), по географическому распространению, источнику инфекции, патогенности для лабораторных животных. Заболевания, вызываемые этими спирохетами, называются боррелиозами. Выделяют:
– антропонозный эпидемический вшивый возвратный тиф;
– зооантропонозные природно-очаговые эндемические
клещевые боррелиозы, которые различаются по переносчикам и в связи с этим делятся на 2 группы: группу
совых клещевых возвратных тифов и группу иксодовых
клещевых боррелиозов (Лайм-боррелиоз и его варианты).
7.2.1. ВОЗБУДИТЕЛЬ ЭПИДЕМИЧЕСКОГО
ВОЗВРАТНОГО ТИФА
Эпидемический возвратный тиф (син.: вшивый воз-
вратный тиф, возвратная лихорадка, возвратный спирохе-
арга-
108
тоз) – острая антропонозная трансмиссивная инфекция, передается платяными и головными вшами. Протекает с чередованием периодов лихорадки и апирексии, увеличением печени и селезенки.
Возбудитель эпидемического возвратного тифа Borrelia recurrentis открыт в 1868 г. немецким исследователем
О. Обермайером.
Эпидемиология, патогенез, клинические проявления,
иммунитет
Источником инфекции является больной человек, в
крови которого циркулируют спирохеты. Механизм передачи трансмиссивный. Переносчиками инфекции являются
платяная и головная вши человека, которые становятся заразными через 5–12 дней после кровососания на больном.
Описаны внутрилабораторные случаи заражения. Распространению инфекции способствуют факторы, приводящие к
завшивленности населения: скученность, нищета, холод, голод, войны и другие природные катастрофы. Возвратный тиф
чаще возникает зимой.
Восприимчивость людей к B. recurrentis абсолютная и
всеобщая. В России эпидемический возвратный тиф ликвидирован в 1938 г.
Через поврежденную кожу (входные ворота инфек-
ции) боррелии проникают в организм. Происходит их захват
и размножение в макрофагах. Инкубационный период длится 3–14 дней. Проникновение боррелий в кровь (спирохете-
мия), их гибель и высвобождение эндотоксина сопровождаются поражением ЦНС и внутренних органов. Болезнь начинается с приступа лихорадки, головной боли, рвоты, болей в
мышцах, увеличения селезенки, печени, слабой желтухи.
Появление антител приводит к образованию сложных комплексов (боррелии + комплемент + тромбоциты + Ig), кото-
109
рые вызывают тромбозы капилляров и формирование очагов
некроза в селезенке, почках, печени, легких. Окончание этого первого приступа лихорадки наступает через 6–7 дней в
результате действия лизинов и фагоцитоза.
В период апирексии, которая продолжается 5–7 дней,
в костном мозге и ЦНС боррелии меняют антигенную
структуру, размножаются, образуя расу, с которой не взаимодействуют Ig, образовавшиеся во время 1-го приступа лихорадки.
Новая раса боррелий выходит в кровь, вызывает рецидив приступа лихорадки. Образование Ig к новой антигенной
расе, лизис и фагоцитоз боррелий приводят к окончанию этого приступа лихорадки. Таких рецидивов может быть 1–5.
Они продолжаются до тех пор, пока в организме не накопятся антитела ко всем антигенным расам боррелий.
Выздоровление сопровождается полной элиминацией
боррелий и формированием стерильного гуморального им-
мунитета, обусловленного образованием агглютининов и
сприрохетолизинов. Однако иммунитет не стойкий, известны
повторные случаи заболевания.
Летальность в настоящее время не превышает 1%.
Микробиологическая диагностика
Используются следующие методы:
– микроскопическое исследование мазков и «толстой» кап-
ли крови, взятых в период лихорадки, окрашенных по методу Романовского–Гимзы. Обнаружение боррелий в
крови является решающим в диагностике возвратного
тифа;
– серологические исследования сыворотки крови в реакци-
ях РСК, реакции иммобилизации боррелий, реакции нагрузки боррелий тромбоцитами (реакция Риккенберга–
Брусина), РНИФ, ИФА и др. Однако серологические реакции не являются надежными;
110
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]