Медико-биологические требования и санитарные нормы качества пищевых продуктов. Лабораторный практикум
.pdfниламина из капельницы. Интенсивность окрашивания исследуемой ткани сравнить с цветной шкалой (табл. 1.2) и определить относительное содержание нитрат-ионов в баллах. Результаты наблюдений внести в табл. 1.3.
2. Прогретый овощ (фрукт). В химический стакан вместимостью 150 см3 поместить 10 г измельченного образца и залить его 100 мл теплой воды (+70 ºС). Прогревать образец в течение 15 мин с 3-кратной сменой теплой воды каждые 5 мин. Прогретый образец (кожица или сердцевина) массой 5–10 г поместить в фарфоровую ступку, размять его с помощью пестика до кашеобразной консистенции. Стеклянной палочкой перенести содержимое ступки на предметное стекло, прилить 4–5 капель дифениламина из капельницы. Интенсивность окрашивания исследуемой ткани сравнить с цветной шкалой (см. табл. 1.2) и определить относительное содержание нит- рат-ионов в баллах. Результаты наблюдений внести в табл. 1.3.
3. Вареный овощ (фрукт). В химический стакан вместимостью 200 см3 поместить 10 г измельченного образца, залить 150 мл теплой воды (+70 ºС) и варить до готовности (20–30 мин) на электрической плитке. Вареный образец (кожица или сердцевина) массой 5–10 г поместить в фарфоровую ступку, размять его с помощью пестика до кашеобразной консистенции. Стеклянной палочкой перенести содержимое ступки на предметное стекло, прилить 4–5 капель дифениламина из капельницы. Интенсивность окрашивания исследуемой ткани сравнить с цветной шкалой (см. табл. 1.2) и определить относительное содержание нитрат-ионов в баллах. Результаты наблюдений внести в табл. 1.3.
4. Квашеные (соленые, маринованные) овощи (фрукты). Ис-
следуемый образец массой 5–10 г поместить в фарфоровую ступку, размять его с помощью пестика до кашеобразной консистенции. Стеклянной палочкой перенести содержимое ступки на предметное стекло, прилить 4–5 капель дифениламина из капельницы. Интенсивность окрашивания исследуемой ткани сравнить с цветной шкалой (см. табл. 1.2) и определить относительное содержание нитрат-ионов в баллах. Результаты наблюдений внести в табл. 1.3.
11
5. Яблочное пюре. Исследуемый образец яблочного пюре (2–3 капли) поместить на предметное стекло, прилить 4–5 капель дифениламина из капельницы. Интенсивность окрашивания исследуемой ткани сравнить с цветной шкалой (см. табл. 1.2) и определить относительное содержание нитрат-ионов в баллах. Результаты наблюдений внести в табл. 1.3.
Таблица 1.2
Относительное содержание нитратов (в баллах)
Визуальные признаки окраски ткани |
Содержание |
Относительное |
|
содержание нитратов |
|||
(цветная шкала) |
нитратов |
||
(в баллах) |
|||
|
|
||
|
|
|
|
Бледно-голубоватая |
Низкое |
1 |
|
|
|
|
|
Синяя, постепенно исчезающая |
Среднее |
2 |
|
|
|
|
|
Темно-синяя или темно-фиолетовая, |
Высокое |
3 |
|
быстро наступающая, устойчивая |
|
|
Получаемые результаты
Данные, полученные в ходе проведенных исследований, внести в табл. 1.3.
Культура
1
Капуста
Таблица 1.3
Исследование относительного содержания нитратов в овощах и фруктах
|
Относительное содержание нитратов (в баллах) |
|||||
Исследуемая |
|
|
|
|
|
|
Свежий |
Прогретый |
|
Вареный |
Квашеный, |
|
|
часть |
|
соленый, |
|
|||
овощ |
овощ |
|
овощ |
Пюре |
||
плода |
|
маринованный |
||||
(фрукт) |
(фрукт) |
|
(фрукт) |
|
||
|
|
овощ (фрукт) |
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
2 |
3 |
4 |
|
5 |
6 |
7 |
|
|
|
|
|
|
|
сердцевина |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
кожица |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Картофель сердцевина
кожица
Лук сердцевина
кожица
Морковь сердцевина
кожица
12
|
|
Исследуемая |
Культура |
|
часть |
|
|
плода |
|
|
|
1 |
|
2 |
|
|
|
Огурец |
|
сердцевина |
|
|
|
|
|
кожица |
|
|
|
Яблоко |
|
сердцевина |
|
|
|
|
|
кожица |
|
|
|
Груша |
|
сердцевина |
|
|
|
|
|
кожица |
|
|
|
|
|
|
Вино- |
|
сердцевина |
град |
|
|
|
кожица |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Окончание табл. 1.3 |
||
|
|
|
|
|
|
Относительное содержание нитратов (в баллах) |
|||||
|
|
|
|
|
|
Свежий |
Прогре- |
Вареный |
Квашеный, |
|
|
соленый, |
|
||||
овощ |
тый овощ |
овощ |
Пюре |
||
маринованный |
|||||
(фрукт) |
(фрукт) |
(фрукт) |
|
||
овощ (фрукт) |
|
||||
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Содержание отчета
Студентам необходимо ознакомиться с представленным теоретическим материалом и экспериментальной частью. Произвести все требуемые исследования и заполнить табл. 1.3. Оформить отчет с указанием цели работы, основных теоретических положений, а также описанием последовательности выполнения работы и полученных результатов. Сделать выводы об относительном содержании нитратов в исследованных образцах овощей и фруктов, а также о влиянии технологических приемов на уровень относительного содержания нитратов.
Контрольные вопросы
1.Особенности накопления нитратов у разных растений.
2.Укажите, на какие группы делят растения по способности накопления нитратов? Приведите концентрации нитратов и виды растений, их накапливающие.
3.Каковы ПДК по нитратам для разных возрастных групп населения?
4.Как нитраты влияют на здоровье человека?
5.Каковы основные признаки нитратных отравлений у человека?
6.Какова качественная проба на присутствие нитратов в растениях?
7.Перечислите основные рекомендации по уменьшению количества нитратов в продуктах.
13
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 2 ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ЦИНКА В СЫРЬЕ
И ПРОДУКТАХ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ
ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ
Одним из негативных результатов бурной индустриализации является загрязнение среды обитания тяжелыми металлами, к которым относятся химические элементы, имеющие плотность больше 5 г/см3 и атомную массу более 40 Да. Среди химических элементов тяжелые металлы наиболее токсичны, так как оказывают отрицательное действие на растения и другие живые организмы при концентрации 10–5 М и выше, хотя в более низких концентрациях многие из них являются микроэлементами, без которых нормальный рост и развитие растения невозможны. Одним из тяжелых металлов является Zn [4].
Среднее содержание цинка в литосфере составляет 0,004–0,008 %. Цинк играет особую роль в биосфере. Присутствуя в живых организмах в ничтожно малых количествах, выполняет весьма важные функции, входя в состав биологически активных веществ. Цинк как кофактор входит в состав около 80 ферментов, участвуя тем самым в многочисленных реакциях обмена веществ. Он требуется для синтеза хлорофилла; входит в состав карбоангидразы. Кроме того, цинк активирует дыхательные ферменты. Цинк играет важную роль в образовании ИУК, ускоряя синтез ее предшественника ‒ триптофана [4].
Оптимальная его концентрация в организмах вырабатывалась на протяжении всего хода эволюции органического мира. Значительные отклонения от этих соотношений вызывают отрицательные, часто губительные, последствия для живых организмов.
Загрязнение среды происходит в результате сжигания топлива, деятельности горнодобывающей промышленности, сбрасывания сточных вод и внесения в почву удобрений.
В атмосферном воздухе цинк присутствует в форме органических и неорганических соединений в виде пыли и аэрозолей. При этом аэрозоли Zn состоят преимущественно из частиц диаметром 0,5–1,0 мкм.
14
Основными механизмами поступления цинка из атмосферы на поверхность почвы являются осаждение с атмосферными осадками и сухие выпадения. В атмосферных осадках, как правило, преобладают водорастворимые формы этого металла, что, вероятно, обусловлено наличием в атмосфере оксидов серы и азота, способствующих образованию растворимых солей цинка.
Перенос этого металла с поверхностными водами происходит
восновном во взвешенном состоянии, причем возрастание роли взвешенных форм в миграции наблюдается при переходе от равнинных рек к горным. Содержание растворимых форм цинка в незагрязненных пресных водоемах обычно колеблется от 0,5 до 15,0 мкг/л. Данный металл аккумулируется в придонных отложениях и биоте, тогда как в самой воде остается в сравнительно небольших концентрациях (морская вода – 9–21 мкг/л) [4].
При отсутствии или недостатке данного элемента формируются чахлые растения со слабо развитым апикальным доминированием. Для человека типичными симптомами недостаточности цинка являются замедление роста у детей, половой инфантилизм у подростков, нарушения вкуса (гипогезия) и обоняния (гипосмия) и др.
Суточная потребность в цинке взрослого человека составляет 15 мг, при беременности и лактации – 20–25 мг. Цинк, содержащийся
врастительных продуктах, менее доступен для организма, поскольку фитин растений и овощей связывает цинк (10 % усвояемости). Цинк из продуктов животного происхождения усваивается на 40 %. Содержание цинка в пищевых продуктах составляет, мг/кг: мясо – 20–40, рыбопродукты – 15–30, устрицы – 60–1000, яйца – 15–20, фрукты и овощи – 5, картофель, морковь – около 10, орехи, зерновые – 25–30, мука высшего сорта – 5–8, молоко – 2–6 мг/л. В суточном рационе
взрослого человека содержание цинка составляет 13–25 мг. Цинк и его соединения малотоксичны. Содержание цинка в воде в концентрации 40 мг/л безвредно для человека [18].
Вместе с тем возможны случаи интоксикации при нарушении использования пестицидов, небрежного терапевтического применения
15
препаратов цинка. Признаками интоксикации являются тошнота, рвота, боль в животе, диарея. Отмечено, что цинк в присутствии сопутствующих мышьяка, кадмия, марганца, свинца в воздухе на цинковых предприятиях вызывает у рабочих «металлургическую» лихорадку.
Известны случаи отравлений пищей или напитками, хранившимися в железной оцинкованной посуде. Такие продукты содержали 200–600 мг/кг и более цинка. В этой связи приготовление и хранение пищевых продуктов в оцинкованной посуде запрещено. ПДК цинка в питьевой воде – 5 мг/л, для водоемов рыбхозов – 0,01 мг/л [18, 4].
Метод определения содержания Zn в растительном сырье основан на сравнении оптической плотности комплексного соединения цинка с дитизоном, экстрагированного четыреххлористым углеродом из раствора золы и растворов сравнения с известной концентрацией цинка [18].
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Цель работы: освоение метода определения содержания цинка в растительном сырье (зерно, крупа, солод) с помощью дитизона.
Материалы, оборудование, реактивы:
зерно, крупа, солод; весы лабораторные; мельница лабораторная; фарфоровые тигли;
делительная воронка вместимостью 50–100 см3; бюретка вместимостью 10 см3; колбы мерные вместимостью 50, 100, 500 см3; муфельная печь; ФЭК;
концентриров. HCl, ч.д.а.; ацетатный буфер; 25 %-й раствор тиосульфата натрия;
дитизон (дифенилтиокарбазон), ч.д.а.;
16
углерод четыреххлористый, х.ч. или ч.д.а; цинк гранулированный, х.ч; метиловый красный; этиловый спирт 96 %.
Последовательность выполнения работы
На лабораторной мельнице измельчают пробы зерна, крупы или солода массой 10 г. Из каждой пробы отбирают навески массой 300– 500 мг, помещают их в фарфоровые тигли и доливают 3–5 см3 спирта. Раствор озоляют в муфеле при 450–500 ºС со всеми предосторожностями, необходимыми во избежание потерь материала (постепенно повышая температуру муфельной печи). Полученную золу растворяют в 4 см3 концентрированной HCl и количественно переносят небольшим объемом воды в мерную колбу вместимостью 50 см3. Солянокислый раствор золы разбавляют так, чтобы содержание Zn в ней было от 0,2 до 1 мкг/см3, а концентрация HCl – порядка 0,3 M. Для этого при приготовлении сильно разбавленных растворов используют не только воду, но и растворы HCl.
Затем 10 см3 разбавленного раствора помещают в делительную воронку вместимостью 100 см3, прибавляют 2 капли индикатора метилового красного и по каплям раствор аммиака до перехода окраски от розовой к желтой. В воронку приливают 5 см3 ацетатного буфера, 1 см3 25 %-го раствора тиосульфата натрия и хорошо перемешивают.
Из бюретки добавляют в воронку 20 см3 свежеприготовленного раствора дитизона в CCl4, закрывают воронку и энергично встряхивают в течение 1 мин. После расслаивания окрашенный слой CCl4 отбирают пипеткой, переносят в кюветы и определяют оптическую плотность на ФЭКе с зеленым светофильтром при длине волны 538 нм.
Для построения градуировочного графика необходимо подгото-
вить растворы сравнения, используя растворы А и Б, приготовленные заранее.
Приготовление растворов сравнения. В мерные колбы вместимостью 100 см3 из бюретки вместимостью 10 см3 наливают указанные
17
в табл. 2.1 объемы раствора Б (раствор цинка массовой концентрации 20 мкг/см3), доводят до меток соляной кислотой, разбавленной 1 : 40, и тщательно перемешивают.
Растворы сравнения готовят в день проведения испытания.
Определяют оптическую плотность растворов сравнения относительно первого раствора сравнения, не содержащего цинк, при длине волны 538 нм. Одновременно проводят контрольный опыт.
Таблица 2.1
Приготовление растворов сравнения
Номер |
Объем |
Массовая концентрация |
Массовая концентрация цинка |
|
в растворе сравнения в пересчете |
||||
раствора |
раствора Б, |
цинка в растворе |
||
на массовую долю в растительном |
||||
сравнения |
см3 |
сравнения, мкг/см3 |
||
материале млн-1 (мг/кг) |
||||
|
|
|
||
1 |
0 |
0 |
0 |
|
|
|
|
|
|
2 |
1 |
0,2 |
20 |
|
|
|
|
|
|
3 |
2 |
0,4 |
40 |
|
|
|
|
|
|
4 |
5 |
1,0 |
100 |
|
|
|
|
|
|
5 |
10 |
2,0 |
200 |
|
|
|
|
|
По данным, полученным для растворов сравнения, строят градуировочный график. По оси абсцисс откладывают массовые концентрации цинка в растворах сравнения в пересчете на массовые доли в растительном материале в млн-1, указанные в табл. 2.1, а по оси ординат − соответствующие им показания ФЭК. По градуировочному графику находят массовые концентрации цинка в анализируемых растворах в пересчете на массовые доли в растительном материале в млн-1.
Все работы с четыреххлористым углеродом следует проводить в вытяжном шкафу!
Получаемые результаты
Содержание цинка (Zn, %) в растительном материале вычисляют по формуле
, |
(2.1) |
18
где А – концентрация цинка в мг/мл найдена по графику и соответствует оптической плотности испытанного раствора;
1000 – для пересчета навески в мг;
w – влажность растительного материала, %; 100 – для пересчета в %;
m – масса навески в г, соответствующая взятому для опыта объему раствора.
Результаты измерений и расчетов записать в табл. 2.2.
|
|
|
|
|
|
Таблица 2.2 |
||
Определение содержания цинка в растительных образцах |
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Навеска, |
|
Содержание |
Содержание Zn2+ |
|||
Варианты |
№ |
Показания |
|
|
||||
мг/г |
|
|||||||
взятая |
Zn2+ |
по калибро- |
|
|||||
опыта |
колб |
прибора |
сухой |
мг/% |
||||
для сжигания |
вочной кривой |
|||||||
|
|
|
массы |
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Содержание отчета
Студентам необходимо ознакомиться с представленным теоретическим материалом и экспериментальной частью. Произвести все требуемые исследования и заполнить табл. 2.2. Оформить отчет с указанием цели работы, основных теоретических положений, а также описанием последовательности выполнения работы и полученных результатов. Ответить в письменном виде на контрольные вопросы.
Контрольные вопросы
1.Какие функции выполняет цинк в живых организмах?
2.Каковы основные пути загрязнения окружающей среды цинком?
3.Как происходит перенос этого металла в водной среде?
4.Чем опасен дефицит цинка для растений и человека?
5.Каковы симптомы отравления цинком?
19
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 3 ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЖЕЛЕЗА В СЫРЬЕ И ГОТОВЫХ ПРОДУКТАХ
ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ
Виноматериалы содержат минеральные вещества, количество и состав которых зависят от почвенно-климатических условий произрастания, агротехники возделывания, сорта винограда и режима его переработки [1]. Общее содержание минеральных веществ определяет такой показатель, как массовая доля золы в сусле и вине. Основную часть минеральных веществ сусла и вина составляют металлы [25].
Содержание основных химических элементов сусла и вина представлено в табл. 3.1.
Таблица 3.1
Содержание основных химических элементов в виноматериалах, мг/л
Наименование |
В сусле |
В вине |
|
|
|
калий |
400–2000 |
До 3500 |
|
|
|
магний |
13–200 |
60–150 |
|
|
|
кальций |
40–150 |
50-400 |
|
|
|
натрий |
5–200 |
0,7–46 |
|
|
|
железо |
1–30 |
1–50 |
|
|
|
цинк |
0,5–3,6 |
0,2–7,7 |
|
|
|
медь |
1–15 |
0,02–15 |
|
|
|
марганец |
0,015 |
0,01 |
|
|
|
кадмий |
0,03 |
0,02 |
|
|
|
Известно, что в процессе брожения сусла большая часть металлов осаждается и их содержание снижается: железо на 28–31 %, медь ‒
76–97 %, цинк ‒ 6–22 %, марганец ‒ 13–18 %, кадмий ‒ 60–75 %.
Металлы, переходящие в сусло и вино из винограда, т. е. естественным путем, не оказывают отрицательного действия на стабильность вин, так как масса их, как правило, незначительна. Основные трудности в производстве связаны с избыточным содержанием металлов, которыми обогащают вина на различных этапах технологического процесса [5].
20
