- •Имении.М.Сеченоваминздраварф
- •Насоисканиеученойстепеникандидатамедицинскихнаук
- •Глава1.Обзор литературных данных 11
- •Глава2.Материалыиметодыисследования 43
- •Глава3.Результатыисследования 64
- •Глава4.Обсуждениерезультатов 98
- •Списокиспользованныхсокращений
- •ВведениеАктуальностьтемы
- •Цельисследования:
- •Задачиисследования:
- •Научнаяновизна
- •Практическаязначимостьработыивнедрения:
- •Личныйвкладавтора
- •Основныеположения,выносимыеназащиту
- •Апробациядиссертации:
- •1.1.1.ОбщаяхарактеристикаиструктурасистемыAp-1
- •УчастиесистемыAp-1всинтезеинтерлейкинов
- •УчастиесистемыAp-1всинтезеколлагенаIтипа
- •РольтранскрипционныхфакторовАр-1впатогенезезаболеванийкожи
- •Патогенезсклеродермии
- •Сосудистаядисфункция
- •Аутоантителаприсклеродермии
- •Нарушениесинтезаколлагена.Цитокиныихемокины
- •Оксидантныйстресс
- •Клиникаочаговойсклеродермии
- •Фотография1.Бляшечнаяформасклеродермии,эритематозныйочаг
- •Фотография2.Пациенткасбуллезнойформойочаговойсклеродермии
- •Фотография3.Очаговаясклеродермия,генерализованнаяформа
- •Глава2.Материалыиметодыисследования
- •Общаяхарактеристикапациентов
- •Фотография4.Очаговаясклеродермия,бляшечнаяформа,прогрессирую-щаястадия
- •Фотография5.Бляшечнаясклеродермия.Индурациябляшки
- •Фотография6.Вариантгенерализованнойсклеродермииупациентки,от-мечаютсяобширныеочагиколичествомболее4впределах1анатомиче-скойобласти-туловища
- •Фотография7.Вариантгенерализованнойсклеродермииупациентки,от-мечаютсяобширныеочагивпределахнесколькиханатомическихобластей
- •Характеристикаисследуемойгруппыпациентов
- •Общаяхарактеристикаметодатерапии
- •Оценкакачестважизнибольных
- •ОпределениеуровняэкспрессиигеновсемействJun,Fra,FosиAtFврежимереальноговремени Взятиеипервичнаяобработкаисследуемогоматериала.
- •Анализэкспрессиигенов,кодирующихкомпонентовтранскрипционно-гофактораAp1вбиоптатахкожиизочаговсклеродермии.
- •Статистическаяобработкарезультатовисследования.
- •Глава3.Результатыисследования
- •ОсобенностиэкспрессиигеновсистемыAp-1упациентовсочаговойсклеродермией
- •Фотография9.Пациеткасгенерализованнойформойочаговойсклеродермии,укоторойотмечалосьмаксимальнойснижениеэкспрессиигенаFra-1
- •Фотография10.Пациенткасгенерализованнойформойочаговойсклеродермии,укоторойотмечалосьдостоверноеувеличениеэкспрессиигенаJunB
- •Фотография11.Пациенткасгенерализованнойформойочаговойсклеродермии,укоторойдостоверноотмечалосьмаксимальноеувеличениеэкспрессиигенаFosb
- •Клиническаяэффективностьнаружнойтерапиипрепаратомтакроли-мус0,1%упациентовсочаговойсклеродермией
- •ДинамикаиндексаактивностиираспространенностипроцессаmLoSsi
- •Изменениепоказателейкачестважизниупациентовочаговойсклеро-дермиейнафоненаружнойтерапии
- •Терапевтическаяэффективностьметодовнаружноголеченияочаговойсклеродермии
- •Глава4.Обсуждениерезультатов
- •Перспективылекарственнойтерапииочаговойсклеродермии
- •Оценкаклиническойэффективностинаружногопримененияпрепара-татакролимус0,1%упациентовсочаговойсклеродермией
- •Практическиерекомендации
- •Списоклитературы
Личныйвкладавтора
Авторомподготовленобзорданныхотечественныхизарубежныхис-точниковлитературыпотемеисследования,сформулированыцельизадачидиссертационнойработы.Разработандизайнисследованияииндивидуальнаярегистрационнаякартабольноговсоответствие,скоторойпроведеноклинико-анамнестическоеобследованиеисформированабазаэкспериментальныхдан-ных.Авторомпроведенонепосредственноелечениепациентов.Проведенаста-тистическаяиописательнаяобработкаполученныхданныхклиническихметодовобследованияиспециальныхметодовисследования.Проведенанализрезульта-товработы,покоторымопубликованыстатьи,тезисыинаписанадиссертациясформулировкойосновныхвыводов,вытекающихизпроделаннойработы.Пред-ложеныпрактическиерекомендациипоиспользованиюалгоритмовдиагностикисклеродермиииприменениюразработаннойметодикитерапии.
Основныеположения,выносимыеназащиту
1. УбольныхочаговойсклеродермиейпроисходитактивациягеноввсехсемействсистемыAP-1впораженныхучасткахпосравнениюсклиническиинтактнойкожей,заисключениемгенаFRA-1.МаксимальноеувеличениеэкспрессииотмечаетсяугенафактораATF-4(4,7±2разапосравнениюснепораженнойкожей),являющегосякомпонетомантиоксидантнойсистемы,чтосвидетельствуетобучастииоксидантногострессавразвитиисклеродермии.
Повышениеэкспрессиигеновотмечаетсянезависимоотстадиипатологическогопроцесса,приэтомчеткойсвязимеждумаксимальнымипоказателямиэкспресиигеновиколичествомочаговпораженияненаблюдается.
Использованиепрепарататакролимус0,1%убольныхочаговойсклеродермиейвызываетвысокийклиническийэффект,чтосопровождаетсярегрессомклиническойсимптоматикииулучшениемкачестважизнипациентов.
Апробациядиссертации:
Материалыдиссертациидоложенына:
7МеждународномфорумеДерматовенерологовикосметологов»(Москва,2013),
22dEADVCongressIstanbul,Turkey(October2013),
XXXI Научно-прaктической конференции с междунaродным учaстиeм
«Рaхмaновскиечтения:иммунозависимыедермaтoзы»(Москвa,2014).АпробацияработысостояласьнасовместномзаседанииЛабораториипоизучениюрепаративныхпроцессоввкожеНИОИммунозависимыхдерматозовПМГМУим.И.М.СеченоваиКафедрыкожныхивенерическихимениВ.А.Рахманова лечебного факультета Первого МГМУ им. И.М. СеченоваМинистерстваздравоохраненияРФ30мая2013г.
Публикации:Потемедиссертацииопубликовано8печатныхработ,изних5вжурналахрекомендованныхВАК.
Публикации:
Потемедиссертацииопубликовано8печатныхработ,изних5вжурна-лах,рекомендованныхВАК.
Структураиобъемдиссертации:
Диссертацияизложенана140страницахмашинописноготекста,состоитизвведения,обзоралитературы,описанияматериаловиметодовисследований,главысобственныхисследований,обсужденияполученныхрезультатов,выво-дов,практическихрекомендацийибиблиографическогоуказателя,содержаще-го26отечественныхи179иностранныхисточников.Работаиллюстрирована24рисунками,25таблицамии11фотографиямибольных.
Глава1.ОБЗОРЛИТЕРАТУРНЫХДАННЫХ
1.1.ГенытранскрипционныхфакторовAP-1
1.1.1.ОбщаяхарактеристикаиструктурасистемыAp-1
Транскрипционныефакторы-ДНК-связывающиебелки,имеющиеселек-тивнуюаффинностькспецифическимнуклеотиднымпоследовательностямииграющиеключевуюрольврегуляцииактивностиРНК-полимеразыIIиэкс-прессиигенов.Белок-активатор-1(AP-1)-одинизнаиболеехорошоизученныхчленовэтойгруппы,обладающийвысокимсродствомк7-bpпоследовательно-стираннегопромотораSV40.Онотноситсякгруппедимерныхбелковс«лей-циновоймолней»,включающейчленысемействJun,Fosиактивирующеготранскрипционногофактора(ATF)исостоящейизбольшогочисларазличныхкомбинацийгетеро-игомодимеров,приэтомсоставтранскрипционногофакто-раопределяетрегулируемыеимгены.
AP-1регулируетбольшоечислогенов,вовлеченныхвпроцессыпролифе-рации,морфогенеза,апоптозаидифференцировки,атакжеклеточнойзащиты.МногиеAP-1-зависимыегеныкодируютдругиетранскрипционныефакторы,цитокины,ихрецепторыиферменты,ответственныезаметаболизммежклеточ-ныхсигнальныхмолекул.
c-Jun-наиболееизученныйкомпонентсистемыAP-1.c-junпротоонкогенбылвпервыевыделенизвирусасаркомыптиц17в1987годувкачествеклеточ-ногогомологаретровирусногоонкогенаν-jun[Makietal.,1987]ивскорепослеэтогобылопределенкакосновнойкомпонентAP-1[Bohmannetal.,1987].c-Jun
-ядерныйбелок,внебольшихколичествахэкспрессируемыйвомногихтипахклеток.Егоэкспрессияусиливаетсяподвоздействиемфакторовроста,цитоки-новиультрафиолетовогоизлучения.Генс-Junчеловека-протоонкоген,вкото-ром,какивомногихнемедленно-раннихгенах,нехватаетинтронов,онбыстроикратковременноактивируетсябезнеобходимостисинтезановогобелка.Цито-кины,факторыроста,стресс,бактериальные,вирусныеинфекцииионкогеныактивируютc-junииндуцируютегоэкспрессиювразличныхклетках.Вовремя
пролиферациифибробластовc-junотрицательнорегулируетэкспрессиюp53.
Считается,что данныйгенучаствуетвконтролеклеточногоцикла,активируяпромотерциклинаD1вовремяпереходаM-G1[Bakirietal.,2000].
Какиc-Jun,транскрипционныйфакторJunBиграетрольврегуляцииэкс-прессиигеноввответнавоздействиефакторовроста.JunBобладаетсхожейпервичнойструктуройиспособностьюсвязыватьДНК,какиcJun,сотличиямивстроениитранскрипционногодомена.ВN-концевойобластиJunBотсутству-ютсериновыеостаткивпозициях63и73,чтонеобходимодляMAPK-зависи-могофосфорилирования.Темнеменеетреониновыеостаткивпозициях102и104,фосфорилируемыеJNK,соответствуюттреониновымостаткамвпозициях91и93cJun[Lietal.,1999].JunBиc-Junзначительноотличаютсявсвоейспо-собностиактивироватьтранскрипцию.Втовремя,какC-Jun-эффективныйак-тиваторпромотеровc-Junиколлагеназы,JunBтаковымнеявляется,посутиин-гибируяактивациюданныхпромотеров.Былопоказано,чтоJunBиc-Junфунк-ционируюткакантогонистывконтролеклеточнойтранскрипции,дифференци-ровкииэкспрессииAP-1зависимыхтаргетныхгенов.
JunD-наиболеераспространенныйизэкспрессируемыхвтканяхбелковAP-1[Hiraietal.,1989].ВысказывалосьпредположениеобантагонизмеJunDис-Junврегуляцииклеточногоциклаипролиферации.Темнеменеепролифера-цияфиробластов,лишенныхJunD,ограничена,чтоподтверждаетспособностьJunDкакингибировать,такиактивироватьпрогрессиюклеточногоциклавза-висимостиотпотребностейклетки[Meixneretal.,2004].
ВажныйшагвизучениитранскрипционногофактораAP-1былсделанпо-слеобнаруженияспособностионкопротеинаc-FosсвязыватьсясаналогичнойпоследовательностьюДНК,чтоиc-Jun[Rauscheretal.,1988].с-fos-немедлен-но-раннийпортоонкогенcбыстройираннейтранскрипционнойактивациейвответнамитогенныестимулы[Greenbergetal.,1984].Какиc-Jun,c-FOSвовле-ченвпроцессыпролиферации,дифференцировки,трансформациииапоптоза.ПоаналогиисJun-белкамивсебелкиданнойгруппысодержатвструктурегид-рофобнуюлейциновуюмолниюbZIP,регулирующуюбелок-белковыевзаимо-действия,атакжеосновнойучасток,отвечающийзасвязываниесДНК.Онине
способныформироватьгомодимерыпослеактивации,ноформируютгетероди-мерысбелкамиJun[Halazonetisetal.,1988].Этотбелокэкспрессируетсявне-значительныхколичествахвбольшинстветиповклеток,ноегосинтезбыстроикратковременноусиливаетсявответна различныестимулы,как,например,факторыростаистресс.с-Fosбелкиассоциированысразличнымибиологиче-скимипроцессами:отпрогрессииклеточногоцикла,доклеточнойтрансформа-цииионкогенеза[Shualinetal.,2001].Высокиеуровниэтогобелкамогутбытьобнаруженыврастущейкости,центральнойнервнойсистемеинекоторыхге-мопоэтическихклетках,какмегакариоциты[Donyetal.,1987;Caubetetal.,1989;Smeyneetal.,1992].Онкогенныесвойстваc-Fosбылипродемонстрирова-ныприповышеннойэкспрессии,котораяприводилакформированиюостеосар-комизхондробластовиостеокластов[Grigoriadisetal.,1993].