книги из ГПНТБ / Тюкавкина Н.А. Хроматография на полиамидных сорбентах в органической химии

римой фракции ацетоновых экстрактов ядровой древесины Pinus silveslrisL&b. viPinus sibiricaM.a.yv шшосильвнн и его моно­ метиловый эфир градиентной элюцией смесью хлороформ— метанол с возрастанием концентрации метанола от 1 до 5 об .% . Из ацетонового экстракта предварительно проэкстрагированных петролейним эфиром опилок Pinus silvestris Ldb . хроматографированием на полиамиде в системе СС14—метанол (95 : 5) выделен иовый фенол сильвопинол (З-оксн-5-метокси-бензило- вый спирт) [220].

Хатвей [424] посредством колоночной хроматографии на по­ лиамиде элюцией смесью метанол—вода (1 : 1) выделил 3,5,4'-трноксистильбеи и его З-рЧО-глюкозид из метанольного экстракта древесины австралийского Eucalyptus wandoo, ис­ пользуемого в качестве продажного дубителя. Иосиакава и др. [731] при исследовании феиольпых соединений листьев и побегов дуба Quercus stenophylla Makino обрабатывали водные экстракты ацетатом свинца, а выпавший осадок экстрагировали эфпром. Из эфирной вытяжки на колонке с полиамидом были выделены пирогаллол и пирокатехин. Пирокатехин, салици­ ловый и гситнзиловый спирты различных видов тополя были отделены от суммы фенольных гликозидов и кислот [595, 5961. Грант и Веттер 1396] использовали полиамид для анализа фепольных соединений при цитогенетпческом исследовании

Lotus.

Кроме применения в области исследования растительных фенолов хроматография па полиамиде постепенно начинает внедряться в практику анализа фепольных соединений в син­ тезе, производстве дубителей, лаков, пластмасс и т. и.

Крабтрн и Джилл [321] изучили поведение 17 фенольних соединений, присутствующих в моче, включая фенол, изомеры

Фридрих и Рангоонвала [3831 использовали тонкослойпую хроматографию на полиамиде для идентификации и количест­ венного определения фармакологически действующего капсапцпиа (амида изодеценилваиилиновой кислоты). В дальнейшем капсаиции был синтезирован. Синтетический продукт отли­ чался от природного ifuc-копфпгурацией боковой цепи. Ран­ гоонвала [611] показал, что цис- и ягракс-капсаицины делятся на полиамиде в системе 0,1 н. NaOH—диметилформамид (9 : 1). На основании этого был предложен метод очистки синтетиче­ ского ^ис-капсаицина от ванплиламида пеларгоновой кислоты и дигидрокапсаицина.

Коташек [513, 514] анализировал состав фенолов и отде­ лял пирокатехин от водорастворимых новолачиых поликопденсатов па полиамидпом сорбенте в системе октанол — мета­ нол.

Йошек и Миллер [494], изучая фотолиз фенольиых соеди­ нений в воде, в качестве метода определения фенолов избрали хроматографию па полиамиде и исследовали большое коли­ чество низших фенолов, а также диоксптолуолов, диокси-, тетраоксибифенилов, дпоксистильбенов, диоксидпфспплмотанов и много других соединений, в том числе три изомера аминофенолов.

Диамонд [337] идентифицировал длшгаоцепочечные гс-ал- килфенолы в смазочных маслах в системе 1 н. NaOH—мета­ нол (70 : 30). Результаты показали, что в смазочных маслах присутствуют гс-додецнлфенол и более высокие гомологи.

Конденсированные фенолы типа нафтолов, флоуренолов, карбазолов, бифепилы и т. п., присутствующие в каменноуголь­ ном пеке, разделяли в системе вода—этапол—2-бутанон—аце- тилацетон (65 : 15 : 15 : 5). Авторы [622] приводят величины R/ для 46 модельных конденсированных фенолов.

Полчнн и др. [605] предложили хроматографию на поли­ амиде как удобный метод онределепия фенолов в сульфитных щелоках в целлюлозном производстве.

Дуришинова п Беллуш [343] изучили хроматографическое поведение на полиамидных слоях большой серии 2- и 2,2'-окси- бенлофеионов, являющихся УФ-поглотителямн для пластиков, красителей, текстиля, красок, лаков и т. д. В работе приве­ дены результаты для 38 2-оксибензофеноиов. В связи с тем, что гидроксильная группа в opmo-положенпи к карбонилу на­ ходится в водородносвязанном состоянии, ее роль проявляется слабо. Даже в 2,2'-диоксибензофенонах оряго-эффект прояв­ ляется значительно. Поэтому такие вещества движутся на поли­ амиде с фронтом мобильной фазы, которой является смесь хлороформа с этанолом.

Визнер [723] использовал полиамидный порошок для вы­ деления фенольиых продуктов из реакционной смеси после обработки 2,2'-бис-(4-оксифенил)-пропана эпихлоргидрином.

Гаспарич и соавт. [390] применили хроматографию на поли­ амиде для анализа смеси, получающейся при алкилировании различных фенолов изобутиленом или диизобутиленом. Авторы отмечают, что большое преимущество этого метода состоит в том, что для анализов можно применять регенерированные колонки после промывания их водным этанолом.

Рейх и Гебештрейт [614] применили хроматографию на по­ лиамиде для разделения синтетических дубителей, получаемых при конденсации 4,4'-диоксидифенилсульфопа с формальдеги­ дом. Для элюции использовались смеси диметилформамид— вода (1 : 4 или 1 : 5 ) , а также ацетон—вода (1 : 3). Процесс разделения идет очень четко и в индивидуальном состоянии выделяются моно-, ди-, три- и тетраметилолпроизводные, ко­ торые не удавалось разделить ранее.

Фенолгликознды

В природе фегюльные соединения часто встречаются в виде гликозидов. Поэтому многие работы посвящены использова­ нию хроматографии на полиамиде для выделения и идентифи­ кации фенольных гликозидов.

Тиме [645—666] и Перл с соавт. [364, 587—596] представили целую серию работ по систематическому изучению фенольных гликозидов цветков, листьев и коры двух родов семейства Salicacea: Salix L . и Populus L . Почти все представители со­ держат дубильные вещества, а наличие салицина является характерным признаком этого семейства. Выделение феноль­ ных гликозидов было успешно осуществлено в результате при­ менения комплекса хроматографических операций на поли­ амиде, целлюлозе и бумаге.

Все гликозпды хорошо растворяются в полярных органи­ ческих растворителях (метанол, этанол, пропанол, ацетон). В воде их растворимость различная: расщепляемые эмульси­ ном глпкозиды растворяются легко, ацилированные глико­ зпды — трудно.

В работах Тиме принято растительное сырье (кору пли листья), предварительно высушенное для прекращения фер­ ментативных процессов, экстрагировать этанолом и после упа­ ривания его остаток обрабатывать теплой водой. Водную вы­ тяжку, отфильтрованную от хлорофплла, хроматографируют на полпамндной колонке [652]. Элюцию производят водой. При этом впачале вымываются свободные сахара н легкораствори­ мые в воде глпкозиды фенолов, а затем ацилированные фенольные глпкозиды. Вещества выделяются в большинстве слу­ чаев в виде бесцветных кристаллов.

В работах Перла экстракцию растительного сырья про­ водят горячей водой. Фенольные соединения из водного рас­ твора экстрагируют этилацетатом и затем хроматографируют на колонке с полиамидом в водной системе.

Фенолглнкозыды Salicaceae, выделенные хроматографией на полиамиде

делены новые апилированные гликозиды актеозид, неоактеозид и 4-окси-р-фенилэтил-0-В-£-глюкопиранозид.

Хроматографией на полиамиде из экстрактов цветков

тин) [658].

При исследовании экстрактов листьев и веток Glycosmus pentaphylla [659] хроматографией на полиамиде не было обна­ ружено салицина и гликосмнна (вератроилсалицина), о кото­ рых ранее сообщал Датт [344].

Борисов [26, 27] выделил из надземной масти подмаренни­ ков новое соединение — круциатнн. Трощенко и Кутикова [211] выделили из корней родиолы 6-1>-глюкознд-В-(и-окспфе- нил)-этаиола.

Из еловой коры этнлацетатной экстракцией с последующим хроматографпрованпем па полиамиде были выделены моно- п диглюкозиды ппцеатаннола, пицеатапнол и трнокситетралппглюкозид [636].

Краус [521] и Краус, Дупакова [520] провели анализ арбутпнсодержащего лекарственного сырья с помощью тонкослой­ ной хроматографии на закрепленном слое полиамида. При этом обнаружили, что арбутин содержится только в листьях толокнянки и брусники, а в листьях вереска, черники и ба­ гульника его иет, хотя согласно результатам анализа другими методами это сырье относится к арбутипсодержащему. Яцюк и др. [252] выделили колоночной хроматографией на полиа­ миде арбутпн из трех видов рода Serratula семейства сложно­ цветных.

Лигнаны п продукты расщепления лигнина

. Лигнаны представляют собой сложпые феиольные соеди­ нения, содержащие в своей основе дпмер фенилпропановой структуры. Они широко распространены в древесных породах. К 1961 г. было известно свыше 50 соединений этого класса [379]. Для их выделения ранее применяли только противоточное распределение. В последнее время все больше внедряются хроматографнческпе методы.

Тиме и Вннклер [668—670] применили хроматографию на полиамиде при изучении химического состава экстрактов коры и листьев различных видов Forsythia. Элюцией системой хлороформ—метанол (95:5) они выделили четыре гликозпда лигнанов, два из которых не были описаны в литературе рань­ ше. Лигнановые гликознды хорошо кристаллизовались. Их краткая характеристика дана в табл. 21.

Ванг [707] изучил хроматографическое поведение двух лиг­

фируются на полиамидных слоях в системах СС14 — ледяная

с добавлением уксусной кислоты лигнаны продвигаются до­ вольно легко (Rf =0,74).

Лигиановые глнкозиды Forsythia, выделенпые хроматографиеіі

на полиамиде

Сейкел н др. [438, 627] использовали хроматографию на полиамидах при выделении лигнанов и их гликозидов из дре­ весины Uhnus thomasii Sarg. Водный экстракт, подкисленный до р Н = 1 — 3 соляной кислотой, вносили в колонку и элюировали сначала водой, а затем водой с добавлением метанола. Смесью вода—метанол (9:1) выделили рацемический лионирезинол (I),

делена фракция, обогащенная (+)-лпопирезинол-2-а-0-£-рам- нозпдом ( I I I ) , очистку которого производили на силикагеле.

Хроматография на полиамиде стала применяться и при исследовании строения лигнипа. Одним из общепринятых методов является деструкция этого полимера фенольной при­ роды тем пли иным способом с последующим выделением и идентификацией продуктов распада. Кошикова и Полчин [512] предлагают применять для анализа продуктов ацидолиза лигнина хроматографию на тонких слоях полиамида, закреп­ ленных гипсом, в системе к-бутанол, насыщенный водным раст­ вором аммиака. Элюцию компонентов с хроматограммы для дальнейшего измерения их количества производят этилацетатом.

Фелеги и Коморова [366] анализировали продукты окисле­ ния лигнина, имеющие альдегидный характер (ванилин, си­ реневый альдегид, 7г-оксибеизальдегпд). Эти соединения отли­ чаются летучестью, п пх количественное разделение на бумаге не дает удовлетворительных результатов. Авторы успешно применили тонкпе слои сплона, связанные гппсом. Системами растворителей служили смеси циклогексан—уксусная кислота (10:1), этанол — вода (60:40), бензол — уксусная кислота (5:1), 1%-ная уксусная кислота. Наиболее полное разделение достигается ири двукратном проходе растворителей по одной

итой же хроматограмме.

Большое значение для выяснения строения лигнина имеют работы Нимза [567—570]. Он выделил олигомерные фенольные соединения, которые могут являться либо исходными продукта­ ми для построения более высокомолекулярного вещества, либо продуктами распада лигнина. Выделение ?г-мерных фе­ нольних соединений сначала производилось из водного или слабокислого водного экстракта древесины ели методом противоточного распределения. Полученные фракции далее хроматографировались на колонках с полиамидом (элюеит—вода).Из древесины бука и ели были выделены 1,2-дигваяцил-пропандиол- 1,3 и 2-(4-окси-3-метоксифенил)-2-(4-окси-3,5-диметоксифенил)- пропандиол-1,3 [567]. Попытки разделить эти вещества на кизельгеле были безуспешными.

При хроматографировании на полиамиде удалось разде-

лить четыре стерео-изомерные формы гваяцилглнцерина [569]. а-Гваяцилглицерин элгопровался системой бензол—этанол (9 : 1), гваяцилглицерин-8-гваяцилглицерпновый эфир — сис­ темой бензол—этанол (5:1). Нимз [568, 570] использовал хроматографию на полиамиде для выделения ди-, три-, тетра- и пентамерных фенолов фенилпропановой структуры, а также альдегидных дплигполов.

Флавоноиды

Вслед за появлением сообщений о возможности использо­ вания полиамидного сорбента для выделения фенольных сое­ динений [310, 362, 445] хроматография на полиамиде была испытана как метод разделения и очистки флавоноидных сое­ динений [439, 452, 459]. Уже первые исследования по выделению флавоноидов из лекарственного растительного сырья [86, 87, 445, 607], а также по выяснению возможности разделения флавоноидов различных классов [565] показали большие пре­ имущества полиамида перед другими ранее использованными сорбентами.

Особенно широко применяются полиамидные порошки в фитохимии флавоноидов в работах проф. Хёрхаммера и его сотрудников в ФРГ и в трудах сотрудников Харьковского химико-фармацевтического института. При этом нужно отме­ тить, что полиамидный сорбент в Советском Союзе применяется не только в научно-исследовательских целях в лабораторных масштабах, но имеется ряд разработанных технологических схем по выпуску многих лекарственных препаратов с исполь­ зованием полиамидного сорбента для очистки и выделения флавоноидных соединений в производственном масштабе. Боль­ шое практическое значение исследований по обнаружению и выделению флавоноидных соединений из лекарственного расти­ тельного сырья обеспечило бурное развитие подобного рода работ. В связи с этим появляется большой ^интерес к выясне­ нию механизма хроматографпческого разделения флавоноидов на полиамидном сорбенте.

Однако вследствие сложности строения природных флаво­

ацшгарования и т. п., а также конфигурационной и конформационной изомерии молекул трудно установить единый меха­ низм их хроматографии. В большинстве первоначальных работ [362, 363, 397, 401, 445, 459] считалось, что флавоноиды адсорбируются на полиамиде за счет образования обратимых водородных связей между фенольнымп гидроксилами и ами­ догруппой полиамида с последующим их разрушением к о н к у -