2 курс / Микробиология 1 кафедра / Экзамен микробик / vse_metody_MIKROB

Гриппозные вирусы имеют 3 типа: А, В и С.

По структуре поверхностных антигенов вирус гриппа А подразделяют на различные подтипы (Н1N1, Н3N2, и др.).

Вирусы гриппа А обладают наибольшей антигенной изменчивостью, т.к. сегментированная РНК вируса предрасположена к постоянным генетическим рекомбинациям. Выделяют две формы изменчивости: антигенный дрейф и антигенный шифт.

Антигенный дрейф обусловлен точечными мутациями в геноме вируса, что приводит к частичным изменениям в структуре поверхностных антигенов, в основном – гемагглютинина. При этом появляются новые штаммы вируса в пределах подтипов вируса гриппа А. Антигенный дрейф происходит непрерывно и приводит к новым эпидемиям гриппа.

Антигенный шифт (от англ. shift – скачок) – результат рекомбинации генов, приводящей к полному изменению H и N, появлению нового подтипа вируса гриппа А и возникновению пандемии. Антигенный шифт возникает редко и обычно является результатом рекомбинаций, происходящих при попадании в клетку двух разных гриппозных вирусов (например, от человека и от животного). В результате образуется гибридный вирус, который может адаптироваться к существованию в организме человека.

Вирусы гриппа А имеют наибольшее эпидемиологическое значение,

т.к. поражают не только человека, но и животных и становятся причиной пан-

демий. Известны 3 гриппозные пандемии, которые вызывали вирусы

гриппа:

A (H1N1) – «испанка» (1918-1920 гг.); A (H2N2) – «азиатский» (1957-1959 гг.); A (H3N2) – «гонконг» (1968-1970 гг.).

4

Источник инфекции: больной человек.

Пути передачи: воздушно-капельный, реже – контактный.

Патогенез: с помощью гемагглютинина вирус соединяется с рецепторами эпителиальных клеток респираторного тракта, в которых происходит репродукция вирусов, нейраминидаза способствует выходу размножившихся вирусов из клетки, затем вирусы попадают в кровь (виремия), поражают клетки эндотелия кровеносных сосудов, а при попадании в ЦНС могут вызывать менингоэнцефалит.

Инкубационный период: 1-2 дня.

Грипп, в отличие от других ОРВИ, характеризуется более выраженными симптомами интоксикации и тяжелыми осложнениями: пневмония, отек легких, менингит и др.

Материал на исследование: отделяемое из носоглотки, мазки-отпечатки со слизистой оболочки носа, парные пробы сыворотки.

Микробиологическая диагностика.

1.Экспресс-диагностика: РИФ, ИФА (для определения антигенов вирусов в исследуемом материале).

2.Вирусологический метод: отделяемым из носоглотки больного заражают куриные эмбрионы с последующей идентификацией вирусов в реакции торможения гемагглютинации (РТГА).

3.Серологический метод: РСК и РТГА. Диагноз ставят при 4-х кратном увеличении титра антител в парных пробах сыворотки, полученных с интервалом в 10-14 дней.

4.ПЦР.

Специфическая профилактика.

Проводится перед началом эпидемического сезона (октябрь, ноябрь). Для поддержания напряженного иммунитета требуется ежегодная ревакцинация. В России используют различные варианты вакцин: живые, инактивированные, а также химические из протективных антигенов вирусов гриппа (гемагглютинина

5

и найраминидазы). Современные химические вакцины содержат H и N вирусов, имеющих эпидемиологическое значение: A (H1N1), A (H3N2), В.

3. Характеристика вирусов парагриппа, микробиологическая диагностика

Вирусы парагриппа: РНК-содержащие, имеют суперкапсидную оболочку, культивируются в культуре клеток.

Источник инфекции: больной человек.

Пути передачи: воздушно-капельный (основной), реже – контактный. Патогенез: попадая в верхние дыхательные пути, вирус размножается и

разрушает клетки цилиндрического эпителия, развивается отек слизистой оболочки гортани, затем поражаются нижние отделы дыхательных путей (бронхи, альвеолярный аппарат).

Инкубационный период: 3-6 дней.

Клинические формы: у взрослых чаще наблюдается ларингит; у детей – ларинготрахеобронхит, нередко с развитием ложного крупа (отек гортани), а также пневмония.

Микробиологическая диагностика.

1.Экспресс-диагностика: РИФ и ИФА (для определения антигенов вирусов в исследуемом материале).

2.Вирусологический метод: отделяемым из носоглотки заражают культуру клеток с последующей идентификацией вирусов в РН и др.

3.Серологический метод: РСК, РН и др. Диагноз ставят при 4-х кратном увеличении титра антител в парных пробах сыворотки, полученных с интервалом в 10-14 дней.

4.ПЦР.

6

4. Характеристика аденовирусов, вызываемые заболевания, микробиологическая диагностика

Аденовирусы: ДНК-содержащие, не имеют суперкапсидной оболочки. Известно более 100 серологических типов аденовирусов, 49 из которых являются патогенными для человека. Аденовирусы культивируют в культуре клеток.

Источник инфекции: больной человек.

Пути передачи: воздушно-капельный (основной), а также контактный (чаще через воду в плавательных бассейнах) и алиментарный.

Инкубационный период: 4-5 дней.

Клинические формы: ОРВИ, пневмония, бронхит, конъюнктивит, фарингоконъюнктивит, гастроэнтерит.

Материал на исследование зависит от нозологической формы заболева-

ния.

Микробиологическая диагностика.

1.Экспресс-диагностика: обнаружение аденовирусных антигенов в мазкахотпечатках со слизистой оболочки носа с помощью РИФ, а также в отделяемом носоглотки и конъюнктивы с помощью ИФА.

2.Вирусологический метод: выделение аденовирусов в культуре клеток с последующей идентификацией в РН и др.

3.Серологический метод: РСК, РН. Диагноз ставят при 4-х кратном увеличении титра антител в парных пробах сыворотки, полученных с интервалом в 10-14 дней.

4.ПЦР.

5.Характеристика вируса кори, вызываемые заболевания, специфическая профилактика кори

Вирус кори: РНК-содержащий, имеет суперкапсидную оболочку, вызыва-

ет 2 формы заболеваний: корь и подострый склерозирующий панэнцефалит.

7

Строение вируса кори

Корь (лат. morbilli) – острая инфекция преимущественно детского возрас-

та.

Источник инфекции: больной человек.

Пути передачи: воздушно-капельный, реже – контактный.

Патогенез заболевания: вирус размножается в клетках эпителия верхних дыхательных путей, затем проникает в кровь (виремия) и поражает клетки эндотелия сосудов.

Инкубационный период: 10-14 дней.

Клинические проявления: симптомы ОРВИ, нередко конъюнктивит. За сутки до появления сыпи на слизистой оболочке щек появляются пятна Фила- това-Коплика (мелкие беловатые точки, окруженные венчиком гиперемии). На 4-5 день болезни появляется яркая пятнисто-папулезная сыпь вначале за ушами и на переносице, а затем по всему телу. В этот период выражены симптомы интоксикации, отмечается высокая температура.

8

Диагностика кори основывается на характерных клинических симптомах заболевания.

Специфическая профилактика.

Плановая (активная): проводится живой коревой вакциной (производства России, Франции) или тривакциной против кори, эпидемического паротита и краснухи (производства США).

Экстренная (пассивная): иммуноглобулин нормальный человеческий.

Подострый склерозирующий панэнцефалит (ПСПЭ) – медленная коре-

вая инфекция. Заболевание возникает через 2-30 лет после перенесенной кори в связи с длительной персистенцией вируса в клетках ЦНС в дефектной форме (без суперкапсида), в результате чего он не может завершить собственную репликацию. Накопление большого количества дефектных вирусов в нейронах приводит к их разрушению.

ПСПЭ – прогрессирующее заболевание нервной системы с характерной клинической картиной: нарушение речи, зрения, дискоординация движений, психические расстройства. Затем наступает коматозное состояние и летальный исход.

Микробиологическая диагностика ПСПЭ проводится серологическим методом. Наличие высоких титров антител к вирусу кори в ликворе и сыворотке крови подтверждает клинический диагноз заболевания. Широкая иммунизация коревой вакциной приводит к резкому сокращению случаев ПСПЭ.

9

6. Характеристика вируса эпидемического паротита, осложнения при паротите, специфическая профилактика

Вирус эпидемического паротита: РНК-содержащий, имеет суперкапсидную оболочку.

Источник инфекции: больной человек.

Путь передачи: воздушно-капельный.

Эпидемическим паротитом обычно болеют дети в возрасте 3-15 лет.

Инкубационный период: 14-20 суток.

Патогенез и клиника: вирус размножается в эпителиальных клетках слизистой оболочки носоглотки, затем попадает в кровь и гематогенным путем проникает в железистую ткань. Заболевание сопровождается воспалением слюнных желез, чаще околоушных (они увеличены в размерах и болезненны). Отмечается умеренное повышение температуры. Реже поражаются другие железистые органы (поджелудочная железа, яички, яичники), а также ЦНС.

Осложнения при паротите: острый панкреатит, орхит (может быть причиной бесплодия, т.к. tunica albuginea яичка препятствует его гипертрофии и вызывает компрессионный некроз сперматоцитов), оофорит, серозный менингит.

Микробиологическая диагностика в случаях типичного течения болезни не проводится.

При атипичных формах заболевания используют:

1.РИФ для обнаружения антигенов вируса в материале от больного (слюна, моча, при серозном менингите – ликвор).

10

2.Серологический (ИФА): для выявления в сыворотке крови больного анти-

тел (IgM, IgG).

Специфическая профилактика эпидемического паротита проводится живой паротитной вакциной (Россия) или тривакциной против кори, эпидемического паротита и краснухи (США).

7. Характеристика вируса краснухи, его значение в патологии человека, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика

Вирус краснухи: РНК-содержащий, имеет суперкапсидную оболочку.

Источник инфекции: больной человек.

Пути передачи: воздушно-капельный (основной), реже – контактный, трансплацентарный.

Краснуха – высококонтагиозная детская инфекция. Чаще болеют дети в возрасте 1-7 лет, но могут болеть и взрослые. Особенно опасно заражение беременных.

Патогенез заболевания: вирус проникает через слизистые оболочки носоглотки в регионарные лимфатические узлы, размножается, а затем попадает в кровь и различные органы.

Инкубационный период: 14-21 день.

Приобретенная краснуха: начало заболевания характеризуется ринитом, сухим кашлем, гиперемией ротоглотки, увеличением шейных и затылочных лимфоузлов, лихорадкой, затем появляется характерный признак заболевания – обильна пятнисто-папулезная сыпь розового цвета.

11

Убеременных в период вирусемии возбудитель проникает через плаценту

иинфицирует плод. Особенно опасно заражение краснухой в I триместре, т.к. частота пороков развития плода составляет 60%, во II и III триместрах частота пороков снижается. Это связано со сроками формирования плаценты. В более поздние сроки беременности плацента в большинстве случаев не пропускает вирус краснухи. Развивается воспалительная реакция в самой плаценте (плацентит) и поэтому плод (II-III триместр) реже подвержен риску инфицирования, чем эмбрион (I триместр).

Врожденная краснуха: при врожденной краснухе чаще наблюдается триада пороков развития: катаракта, пороки сердца и глухота. Реже развивается микроцефалия (с нарушением умственного развития).

Диагноз приобретенной краснухи устанавливают на основе клиникоэпидемиологических данных.

Микробиологическая диагностика проводится при подозрении на врож-

денную краснуху и беременным, контактировавшим с больными краснухой.

С этой целью используют серологический метод (ИФА) для определения IgM против вируса краснухи. Для женщин, инфицированных вирусом в I триместре беременности, обнаружение IgM в сыворотке крови является показанием к прерыванию беременности.

Специфическая профилактика краснухи проводится живой краснушной вакциной или тривакциной против кори, эпидемического паротита и краснухи.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА.

1. Учет результатов серологического исследования парных проб сыворотки больного с предварительным диагнозом: грипп.

12

Схема учета РТГА с парными пробами сыворотки крови больного с подозрением на грипп

Заключение о типе вируса сделать самостоятельно.

2. Вирусологическая диагностика аденовирусной инфекции.

Учет реакции нейтрализации в культуре клеток для идентификации выделенных аденовирусов

Заключение о типе вируса сделать самостоятельно.

13