98. Какие продукты называются первичными и вторичными.

Получение максимального количества клеток с одинаковыми свойствами при их выращивание в определенных концентрационных условиях.

Конечными продуктами метаболизма могут быть первичными и вторичными. 99. Чем обеспечивается теплообмен в ферментере.

Для нормального процесса ферментации аэробных процессов необходимо:

Система аэрации.

Система теплообмена(горная вода, пар)

Система пеногашения

Ферментер-культиватор, дрожжегенератор, аппарат для глубинного выращивания микроорганизмов в питательной среде в условиях постоянной температуры, интенсивного перемешивания и непрерывного продувания стерильным воздухом.

100. Назовите основные пенонгасители.

Средство борьбы с избыточным пенообразованием. Существуют химические, механические и другие. Эффективные пеногасители- растительные масла(оевые, рапсовые) животные жиры.

101. 3 Основных метода сепарации.

В процессе очистки целевого продукта является разделение культурной жидкости и клеточной биомассы- сепарация.

Методы:

1) Флотация – если клетки продукта накапливаются в поверхностных слоях биореактора. Удаляют при культивировании пену вместе с прилитыми пузырьками газа. Достоинство: экономность, высокая производительность.

2) Фильтрация – применяются различные фильтровальные системы (барабанные, ленточные, тарелки). Происходит задержка биомассы на перистом фильтрующей перегородке. Недостаток: налипание клеток на фильтре.

3)Центрифугирование- дорогостоящее оборудование. Суспензия фильтрируется очень медленно. Требуется непрерывный процесс сепарации.

102. Что такое флотация.

Флотация – если клетки продукта накапливаются в поверхностных слоях биореактора. Удаляют при культивировании пену вместе с прилитыми пузырьками газа. Достоинство: экономность, высокая производительность.

103. методы дезинтеграции клеток.

1)Механическими методами (встряхивание с бусами и продавливание под давлением и т.д.)

2) физический метод (ультразвуками, вибраторами, заморожением).

3) Химический метод (толуолом, бутанолом).

104. Какой фермент разрушает клеточную стенку бактерий.

1)разрушают лизисом

105. Какой фермент разрушает клеточную стенку дрожжей

клеточные стенки могут быть разрушены толуолом или бутанолом

106. Какой лизис клеток называют элективным.

Элективный лизис клеток вызывается воздействием ряда антибиотиков: полимиксин, новобиоцин, нистатин и др. Кроме того к аналогичным результатам приводит обработка клеток некоторыми поверхностно-активными веществами.

107. Назовите основные осадители.

Этанол, метанол, ацетон, изопропанол – основные осадители.

Осаждение растворенных веществ осуществляются физическими (нагревание, разведение или концентрирование, охлаждение раствора) или химическими воздействиями, переводящими растворенное вещество в малорастворимое состояние. Это могут быть органические и неорганические вещества.

108. Чем осуществляют высаливание продукта.

Для высаливания применяют сульфат аммония, сульфаты натрия, магния и фосфат калия.

109. Какие факторы повышают экстракцию продукта.

1. Многократная обработка экстрагирующим агентом.

2. Подбор оптимального растворителя.

3. Подогрев экстрагирующего агента или экстрагируемой жидкости, содержащей продукт.

4. Понижение давления в аппарате для экстракции, что обеспечивает экстракцию при относительно низкой температуре.

Почти полностью избежать инактивации позволяют методы экстрагирования на холоду.

110. Чем характеризуется процесс адсорбции и его экстрагирующие агенты.

Адсорбция-является достаточно распространенным методом отделения, при котором экстрагирующим агентом служит твердое тело, т.е экстрагирующий агент. Механизм ее сводится к связыванию выделяемого из жидкой или газообразной фазы вещества поверхностью твердого тела. Традиционными адсорбентами являются древесный уголь, пористые глины и т.п.

Экстрагирующими агентами могут быть (КМЦ-карбоксиметилцеллюлоза, ДЭАЭ- диэтиламиноэтилцеллюлоза, сефадексы, декстраны и т.д)

111. Какими методами осуществляется тонкая очистка продукта.

1) Аффинная преципитация (лиганд соединяется с растворимым носителем и, после взаимодействия с соответствующим выделяемым соединением, образующийся комплекс по мере его формирования выпадает в осадок) и аффинное разделение (основано на использовании системы, сосотоящий из двух водорастворимых полимеров, один из которых несет специфические лиганды, а другой обладает сродством к примесным компонентам.например,разделение нуклеиновых кислот и белков).

2)Ультрацентрифугирование: метод разделения и исследования высокомолекулярных соединений, вирусов и субклеточных частиц с помощью ультрацентрифуги.Метод заключается в том, что белки в центрифужной пробирке помещают в ротор ультрацентрифуги. При враще­нии ротора скорость оседания белков пропорцио­нальна их молекулярной массе: более тяжелые бел­ки образуют фракции, расположенные ближе ко дну кюветы, более легкие — к поверхности.

3)Аффинная хроматография: Метод базируется на задержании компонента разделяемой смеси и лиганда, который фиксирован на частицах носителя (наполнителя колонки). При данном методе используются вещества, способные специфически связывать какое-нибудь одно конкретное вещество.

4)Ионообменная хроматография: Колонка наполняется гранулами адсорбента, которые несут заряженные катионные (NH4) или анионные (SO4) группы, способные захватывать ионы противоположного заряда. Этот метод используется для выделения ионизированных веществ из жидкости, а также для очистки нейтральных соединений от примесей ионной природы.

5)Высокоэффективная жидкостная хроматография: смолы размер сфер 3-10 мкм, в основе кремний, образуют плотную, гомогенную колонку. Хроматография идет под давлением.

6)Метод молекулярных сит, гель-хроматография, гельфильтрация: эти виды основываются на разделении веществ с различной молекулярной массой и диаметром частиц. Адсорбент захватывает и удерживает, например, только низкомолекулярные соединения, пропуская соединения с более высокой молекулярной массой.

7)Гидрофобная хроматография-по гидрофобности.

8)Электрофорез.