Prezentaciya-3
.pdf
Многопараметрическая проточная цитометрия на основе VCS-технологии
•Conductivity
(электропроводность) – измерение проводимости в переменном токе высокой частоты. Характеризует «непрозрачность» клетки.
•Позволяет оценить плотность клеточного ядра и внутренний состав клетки.
Электропроводность
•Рассчитывается электропроводность для каждой клетки. Это третий тип сигнала, который позволяет дифференцировать клетки крови более точно.
•Клетки с высоким ядерно-цитоплазматическим
отношением (лимфоциты) имеют низкое значение
структурной электропроводности.
•Клетки с низким ядерно-цитоплазматическим отношением имеют высокую структурную
электропроводность.
Многопараметрическая проточная цитометрия на основе VCS-технологии
•Rotated light scatter – рассеяние лазерного света под разными углами позволяет получить информацию о структуре клеточной поверхности, гранулярности цитоплазмы и лобулярности ядра.
Используется 5 углов и 7 датчиков.
Построение VCS-скатерограмм
•Полученные данные по каналам рассеивания лазерного луча, электропроводности и объема клеток суммируются и анализируются, а затем происходит распределение клеток по дифференцировочным кластерам.
•Клеточные кластеры размещаются на цветной объемной диаграмме, где по
оси Х откладывается нормированная рассеивающая способность, по оси Y – объем клеток, а по оси Z - структурная электропроводность.
•Результат отображения данного объемного графика на плоскость является лейкоцитарная скатерограмма, на которой каждый тип клеток имеет свою зону расположения.
Плот распределения клеток на основе VCS-технологии
1.Гигантские тромбоциты, агрегаты тромбоцитов, эритроциты, тромбоциты
2.Нормобласты
3.Лимфоциты
4.Моноциты и гранулоциты
5.эозинофилы
Анализ тромбоцитов на NRBC-плотах
•Позволяет достаточно легко дифференцировать гигантские тромбоциты и агрегаты тромбоцитов.
Графические данные NRBC-плота и сигнальные сообщения
Преимущества оптического метода
•Основное преимущество оптической технологии – это возможность оценки внутреннего содержимого клетки, что вместе с характеристикой ее размера, дает возможность более точно определить вид клетки крови.
•Вариант оптического метода – это лазерная технология с
использованием флуоресцентных красителей, связывающихся с нуклеиновыми кислотами.
Технология с использованием флуоресцентного красителя в гематологических анализаторах
Схематическое устройство каналов флуоресцентной проточной цитометрии
Полупроводниковй
Флуоресцентный сигнал
лазер
боковое
светорассеяние лазерного луча
Поток
клеток
прямое (малоугловое) светорассеяние